公开(公告)号：CN109251891A

公开(公告)日：2019-01-22

申请号：CN201811107312.7

申请日：2018-09-21

Applicant: 苏州大学附属第一医院

Inventor： 古彦铮 ,  张学光 ,  黄子逸 ,  刘翠平

IPC: C12N5/078

Abstract: 本发明公开了一种CD40联合PD-L及细胞因子扩增PBMC的方法，步骤如下：1)取正常人外周血，与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心；2)离心结束后，得到4层液体；用移液管吸取中间云雾层细胞，用10倍体积的PBS洗涤离心，得到PBMC；3)将PBMC细胞用RMPI1640完全培养基配成细胞悬液，转入6孔板和24孔板里，然后于各组细胞培养液中加入相应细胞因子液：将孔板放到CO2培养箱内培养；4)视细胞状态每隔2～3天补加一次细胞因子液。本发明从CD40信号联合PD-L1及细胞因子IL-15和IL-7组合扩增PBMC制备新型过继免疫治疗细胞为切入点，提供一种新的过继免疫细胞的体外诱导方案。此外，本发明所提供的方法实验设备要求低、操作简单省时、过继免疫细胞的收集率高、纯度高。

公开(公告)号：CN109251891B

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN201811107312.7

申请日：2018-09-21

Applicant: 苏州大学附属第一医院

Inventor： 古彦铮 ,  张学光 ,  黄子逸 ,  刘翠平

IPC: C12N5/078

Abstract: 本发明公开了一种CD40联合PD‑L1及细胞因子扩增PBMC的方法，步骤如下：1）取正常人外周血，与PBS混合稀释后进行Ficoll密度梯度离心；2）离心结束后，得到4层液体；用移液管吸取中间云雾层细胞，用10倍体积的PBS洗涤离心，得到PBMC；3）将PBMC细胞用RMPI1640完全培养基配成细胞悬液，转入6孔板和24孔板里，然后于各组细胞培养液中加入相应细胞因子液：将孔板放到CO2培养箱内培养；4）视细胞状态每隔2~3天补加一次细胞因子液。本发明从CD40信号联合PD‑L1及细胞因子IL‑15和IL‑7组合扩增PBMC制备新型过继免疫治疗细胞为切入点，提供一种新的过继免疫细胞的体外诱导方案。此外，本发明所提供的方法实验设备要求低、操作简单省时、过继免疫细胞的收集率高、纯度高。