一种家蚕体内辛硫磷残留量的检测方法

    公开(公告)号:CN102841159A

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201210364291.3

    申请日:2012-09-26

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种家蚕体内辛硫磷残留量的检测方法,包括以下步骤:(1)待测样本经甲醇或乙酸乙酯提取后在40℃~50℃烘干得到提取物;(2)将提取物溶于乙腈,再用0.4μm~0.5μm的滤膜过滤得到提取物溶液;(3)以乙腈-水溶液作为流动相溶剂,利用高效液相色谱分析法进行检测,得到辛硫磷残留量;待测样本选自家蚕个体血液、经过匀浆处理后的去除肠道中内容物后的个体或者家蚕各器官经过匀浆处理后的样本中的一种。该方法的对辛硫磷农药的检出限为0.010μg/mL,可用于家蚕体内辛硫磷含量的检测,不受家蚕品种、发育阶段以及中毒方式的限制,具有高效、准确的特点。

    判断家蚕化蛾时间用引物

    公开(公告)号:CN112210610B

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202011151064.3

    申请日:2020-10-24

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种判断家蚕化蛾时间用的引物,以待检测家蚕蚕蛹的肌动蛋白基因3、溶茧酶基因为模板,利用所述引物进行实时荧光定量PCR反应,分别得到肌动蛋白基因3转录表达量、溶茧酶基因转录表达量;溶茧酶基因相对转录表达量为溶茧酶基因的转录表达量/肌动蛋白基因3基因的转录表达量;再将溶茧酶基因相对转录表达量带入蚕蛹溶茧酶基因的相对转录表达量与蛹期发育时间的关联模型;完成家蚕化蛾时间的判断。该方法可通过对一个或多个蚕蛹的蛹期发育时间进行精确测定而精确判断家蚕化蛾时间,可减少传统肉眼观察造成的误差,为家蚕制种工作中判定化蛾时间提供新的检测方法。

    一种降低家蚕1型乙酰胆碱酯酶对辛硫磷敏感性的方法

    公开(公告)号:CN103290037B

    公开(公告)日:2014-12-31

    申请号:CN201310276821.3

    申请日:2013-07-03

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种降低家蚕1型乙酰胆碱酯酶对辛硫磷敏感性的方法,具体包括以下步骤:(1)家蚕1型乙酰胆碱酯酶基因(Bmace1)的克隆;(2)对Bmace1进行定点突变,对产物克隆与测序验证,获得突变的Bmace1;(3)利用真核表达系统对突变的Bmace1进行表达获得对辛硫磷敏感性降低的家蚕1型乙酰胆碱酯酶。该方法通过对Bmace1中3个重要位点进行突变,使其编码的氨基酸发生改变,使其翻译的蛋白对辛硫磷农药的敏感性降低了40.08%,操作简单;由此方法获得的新型家蚕1型乙酰胆碱酯酶为转基因培育抗辛硫磷农药家蚕新品种提供了素材。

    一种判断家蚕化蛾时间的方法

    公开(公告)号:CN112322747B

    公开(公告)日:2023-08-15

    申请号:CN202011151065.8

    申请日:2020-10-24

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种判断家蚕化蛾时间的方法,具体包括以下步骤:(1)分别构建待检测品种雄蛹、雌蛹的溶茧酶(Cocoonase,Coc)基因的相对转录表达量与蛹期发育时间的关联模型;(2)测定待检测蚕蛹溶茧酶基因相对表达量,根据性别雌雄对照步骤(1)所得关联模型,计算得出蛹期发育时间,进而判断化蛾时间。该方法可通过对一个或多个蚕蛹的蛹期发育时间进行精确测定而精确判断家蚕化蛾时间,可减少传统肉眼观察造成的误差,为家蚕制种工作中判定化蛾时间提供新的检测方法。

    一种降低家蚕1型乙酰胆碱酯酶对辛硫磷敏感性的方法

    公开(公告)号:CN103290037A

    公开(公告)日:2013-09-11

    申请号:CN201310276821.3

    申请日:2013-07-03

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种降低家蚕1型乙酰胆碱酯酶对辛硫磷敏感性的方法,具体包括以下步骤:(1)家蚕1型乙酰胆碱酯酶基因(Bmace1)的克隆;(2)对Bmace1进行定点突变,对产物克隆与测序验证,获得突变的Bmace1;(3)利用真核表达系统对突变的Bmace1进行表达获得对辛硫磷敏感性降低的家蚕1型乙酰胆碱酯酶。该方法通过对Bmace1中3个重要位点进行突变,使其编码的氨基酸发生改变,使其翻译的蛋白对辛硫磷农药的敏感性降低了40.08%,操作简单;由此方法获得的新型家蚕1型乙酰胆碱酯酶为转基因培育抗辛硫磷农药家蚕新品种提供了素材。

    家蚕胚胎发育进程的测定方法

    公开(公告)号:CN103070141A

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201310059955.X

    申请日:2013-02-26

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种家蚕胚胎发育进程的测定方法,具体包括以下步骤:(1)构建待检测品种的家蚕胚胎的一型乙酰胆碱酯酶(ace1)相对转录表达量和胚胎发育进程的关联关系的模型;(2)在待测定家蚕胚胎中取一个以上作为样本,测定样本的ace1相对表达量然后对照步骤(1)所得模型,根据待测样本的ace1的相对转录表达量确定出家蚕胚胎的发育进程。该方法可以通过对少量蚕卵胚胎的发育进程进行测定而精确定量蚕卵整体的发育阶段,减少人为操作带来的误差,简化了测定流程,为家蚕胚胎的分子生物学研究提供发育进程的鉴定方法。

    一种低成本提高家蚕对有机磷农药抗性的方法

    公开(公告)号:CN116965381A

    公开(公告)日:2023-10-31

    申请号:CN202310968461.7

    申请日:2023-08-03

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种低成本提高家蚕对有机磷农药抗性的方法,主要采用添食喷洒短链脂肪酸添加剂的桑叶,可以显著提高家蚕在取食低剂量辛硫磷农药下的存活率。本发明利用短链脂肪酸添加剂喷洒的桑叶饲喂家蚕,试验表明,50kg适熟桑叶添加0.4±0.1L剂量添加剂,晾干后饲喂家蚕可以显著提高家蚕在辛硫磷暴露下的存活率,效果显著。该方法具有品种和区域的通用性;使用的短链脂肪酸用量少、来源广泛、成本低、环保安全;无需改变生产规律,操作方便,适合在我国蚕区推广应用。

    一种提高家蚕对辛硫磷农药抗性的方法

    公开(公告)号:CN113142384A

    公开(公告)日:2021-07-23

    申请号:CN202110397213.2

    申请日:2021-04-13

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高家蚕对辛硫磷农药抗性的方法,主要采用添食喷洒混合微生物助剂,可以显著提高家蚕在取食低剂量辛硫磷农药下的存活率。本发明利用微生物混合菌剂喷洒的桑叶饲喂家蚕,试验表明,50kg适熟桑叶添加0.5±0.1L剂量混合菌剂,晾干后饲喂家蚕可以显著提高家蚕在辛硫磷暴露下的存活率,效果显著。该方法具有品种和区域的通用性;使用的微生物助剂用量少、成本低、环保安全;无需改变生产规律,操作方便,适合在我国蚕区推广应用。

    家蚕胚胎发育进程的测定方法

    公开(公告)号:CN103070141B

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201310059955.X

    申请日:2013-02-26

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种家蚕胚胎发育进程的测定方法,具体包括以下步骤:(1)构建待检测品种的家蚕胚胎的一型乙酰胆碱酯酶(ace1)相对转录表达量和胚胎发育进程的关联关系的模型;(2)在待测定家蚕胚胎中取一个以上作为样本,测定样本的ace1相对表达量然后对照步骤(1)所得模型,根据待测样本的ace1的相对转录表达量确定出家蚕胚胎的发育进程。该方法可以通过对少量蚕卵胚胎的发育进程进行测定而精确定量蚕卵整体的发育阶段,减少人为操作带来的误差,简化了测定流程,为家蚕胚胎的分子生物学研究提供发育进程的鉴定方法。

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