公开(公告)号：CN113174373B

公开(公告)日：2023-03-24

申请号：CN202110502748.1

申请日：2021-05-09

Applicant: 苏州大学

Inventor： 苏武杰 ,  李兵

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/866 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种敲除杆状病毒必需基因的方法，具体包括以下步骤将转移载体和改造的杆状病毒杆粒在家蚕细胞中进行同源重组和纯化，并抽提DNA，再转化大肠杆菌感受态，挑取菌落做菌液PCR，得到含有中间敲除株的菌株，然后将中间敲除株病毒与未经改造的杆粒病毒共感染家蚕细胞进行同源重组并抽提DNA，再转化大肠杆菌感受态，挑取蓝色菌落做菌液PCR，得到含有必需基因敲除的杆粒的菌株，实现杆状病毒必需基因的敲除。本发明无需特定的细胞或者细菌系统，省时省力，可以节省资金投入，而且无需特殊设备，操作简单，易于上手，可以应用于其它杆状病毒必需基因的敲除，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN113174373A

公开(公告)日：2021-07-27

申请号：CN202110502748.1

申请日：2021-05-09

Applicant: 苏州大学

Inventor： 苏武杰 ,  李兵

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/866 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明公开了一种敲除杆状病毒必需基因的方法，具体包括以下步骤将转移载体和改造的杆状病毒杆粒在家蚕细胞中进行同源重组和纯化，并抽提DNA，再转化大肠杆菌感受态，挑取菌落做菌液PCR，得到含有中间敲除株的菌株，然后将中间敲除株病毒与未经改造的杆粒病毒共感染家蚕细胞进行同源重组并抽提DNA，再转化大肠杆菌感受态，挑取蓝色菌落做菌液PCR，得到含有必需基因敲除的杆粒的菌株，实现杆状病毒必需基因的敲除。本发明无需特定的细胞或者细菌系统，省时省力，可以节省资金投入，而且无需特殊设备，操作简单，易于上手，可以应用于其它杆状病毒必需基因的敲除，具有广阔的应用前景。