糖肽富集材料及其制备方法和富集方法

    公开(公告)号:CN113058577B

    公开(公告)日:2024-01-19

    申请号:CN202110284482.8

    申请日:2021-03-17

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 杨霜 刘兆亮

    Abstract: 本申请涉及一种糖肽富集材料的制备方法,其包括:S1、提供基质微球颗粒、以及氨基羰基化合物或多肽,将基质微球颗粒与氨基羰基化合物或多肽共价结合,在基质微球颗粒表面共价结合高密度亲水性的酰胺基、叔胺基或羟基中的一个或多个;S2、洗脱纯化得到糖肽富集材料。在基质微球颗粒表面共价结合亲水性的叔胺基、酰胺基或羟基,不但提高对N‑糖肽和O‑糖肽的富集,同时对带有负电的唾液酸糖肽和氨基酸有优异的特异性,该富集材料可广泛应用到生物医药、临床样本分析和药物开发,大大降低填充材料的成本。

    一种基于固相富集结合O-糖肽酶切分析Tn抗原的方法

    公开(公告)号:CN114354778A

    公开(公告)日:2022-04-15

    申请号:CN202111487621.3

    申请日:2021-12-08

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 杨霜 李佳佳

    Abstract: 本发明公开了一种基于固相富集结合O‑糖肽酶切分析Tn抗原的方法,包括步骤:蛋白提取和浓度测量;蛋白酶解;多肽纯化;固相结合;唾液酸处理;N聚糖切除;OpeRATOR酶切;O‑Glycoprotease酶切;LC‑MS分析。该方法能够在固相上耦合糖肽,使用两种O‑糖肽酶切O‑糖肽来鉴定Tn抗原的O‑糖基化位点和Tn抗原的表达量,用作癌症诊断的生物标志物。

    酸水解化合物的合成方法及其用于固相耦合糖蛋白、固相改性衍生和富集糖肽的方法

    公开(公告)号:CN113185489A

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN202110466156.9

    申请日:2021-04-28

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 杨霜 李舒伟

    Abstract: 本发明公开了一种酸水解化合物的合成方法及其用于固相耦合糖蛋白、固相改性衍生和富集糖肽的方法,首先合成具有二氧戊环、胺基和羧基官能基团化合物6,然后将化合物与带有胺基硅胶通过还原胺化反应,得到与硅胶共价结合的化合物7,再用Schiff‑base反应将丙二醛与化合物7共价结合得到化合物8,再与糖蛋白或糖肽共价结合形成9,经过处理的糖肽与酸性溶液孵化,室温下在二氧戊环初水解洗脱得到带有标记的糖肽10。本方法对研究唾液酸糖蛋白或糖肽在各种疾病中的变化等方面有着重要意义。

    一种富集并鉴定糖基化DNA及其位点的固相化学酶方法

    公开(公告)号:CN119979687A

    公开(公告)日:2025-05-13

    申请号:CN202411923004.7

    申请日:2024-12-25

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种富集并鉴定糖基化DNA及其位点的固相化学酶方法。通过醛基与酰肼的缩合反应以及酶的特异性作用,实现对糖基化脱氧核糸核酸(DNA)片段的高效富集。这种方法旨在填补现有技术的空白,通过对DNA糖基化的深入研究,进一步揭示其在生命过程和疾病机制中的潜在作用。该方法可同时适用于多种类型的生物样本,包括石蜡包埋组织、新鲜组织以及血液/细胞样本,具有广泛的适用性,多步骤分析DNA糖基化位点及序列。本方法可获得完整的DNA糖基化位点信息,为研究DNA表观遗传修饰提供了重要的技术手段,在肿瘤标志物筛查、疾病诊断和药物研发等领域具有重要的应用价值。

    一种糖基化DNA及其糖基化修饰方法和应用

    公开(公告)号:CN118360355A

    公开(公告)日:2024-07-19

    申请号:CN202410445561.6

    申请日:2024-04-15

    Inventor: 徐龙江 杨霜 肖晟

    Abstract: 本发明公开了一种糖基化DNA及其糖基化修饰方法和应用,通过对提取得到的DNA直接进行糖苷酶水解处理,即实现对应酶糖基化的DNA,打破了以往只有蛋白质、脂质和RNA能够作为糖基化修饰目标分子的技术偏见,通过鉴定DNA的糖基化可以揭示一种全新的细胞调控机制,有利于更深入地了解基因的打开和关闭方式,从而影响发育生物学和基因疗法领域的研究,对于发育生物学和基因疗法领域具有重要意义。

    一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法

    公开(公告)号:CN114839280A

    公开(公告)日:2022-08-02

    申请号:CN202210291094.7

    申请日:2022-03-23

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于固相岩藻糖糖蛋白富集及岩藻糖糖基化酶切分析的方法,包括步骤:提取得到蛋白质,然后将蛋白水解得到多肽和糖肽,接着用糖苷内切酶处理,包括①将肽段用糖苷内切酶处理,然后将糖肽氧化结合到酰肼树脂上,通过岩藻糖糖苷酶水解后获取岩藻糖糖基化位点或去岩藻糖糖肽;②将糖肽用糖苷内切酶处理,再使用亲水相互作用色谱得到完整岩藻糖糖肽。也可将糖蛋白或者酶切糖肽,经氧化和与酰肼结合,酶切得到支链α1,3‑岩藻糖糖肽。最后用质谱对岩藻糖肽和含有岩藻糖基化位点的肽段进行分析。本方法对发现疾病细胞、临床组织和人体体液标本中具有岩藻糖基化的疾病标志物,以及疾病早期诊断和预后标志物的研究等方面有着重要意义。

    一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法和应用

    公开(公告)号:CN113960232A

    公开(公告)日:2022-01-21

    申请号:CN202111259337.0

    申请日:2021-10-28

    Applicant: 苏州大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于唾液特异性岩藻糖基化结构糖谱及其检测方法,首先采集人体唾液标本,接着从唾液中提取蛋白质,然后将聚糖从糖蛋白质上酶解富集,再用质谱对聚糖结构解析和丰度定量分析,最后确定样本中聚糖糖谱。通过对健康、非癌症和肺癌唾液分析,鉴定高丰度核心岩藻糖和支链岩藻糖的糖谱,可应用于肺癌的临床筛查。本方案便于早期诊断,样本易收集,对患者无伤害,具有优良的应用前景,对高发病率和高死亡率肺癌的早期筛查和治疗等方面有着重要意义。

    一种基于固相糖蛋白富集和Tn糖肽酶切的分析方法

    公开(公告)号:CN114252629B

    公开(公告)日:2023-08-11

    申请号:CN202111411385.7

    申请日:2021-11-25

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 杨霜 岳爽

    Abstract: 本发明公开了一种基于固相糖蛋白富集和Tn糖肽酶切的分析方法,包括步骤:固相结合;Tn糖肽确定;Tn糖肽位点确定。本方法能从复杂的蛋白多肽中,特异性富集分析Tn糖肽O‑糖肽,并能够广泛的应用于各类分析中,本方法还能应用于制备癌细胞诊断检测试剂。

    酸水解化合物的合成方法及其用于固相耦合糖蛋白、固相改性衍生和富集糖肽的方法

    公开(公告)号:CN113185489B

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202110466156.9

    申请日:2021-04-28

    Applicant: 苏州大学

    Inventor: 杨霜 李舒伟

    Abstract: 本发明公开了一种酸水解化合物的合成方法及其用于固相耦合糖蛋白、固相改性衍生和富集糖肽的方法,首先合成具有二氧戊环、胺基和羧基官能基团化合物6,然后将化合物与带有胺基硅胶通过还原胺化反应,得到与硅胶共价结合的化合物7,再用Schiff‑base反应将丙二醛与化合物7共价结合得到化合物8,再与糖蛋白或糖肽共价结合形成9,经过处理的糖肽与酸性溶液孵化,室温下在二氧戊环初水解洗脱得到带有标记的糖肽10。本方法对研究唾液酸糖蛋白或糖肽在各种疾病中的变化等方面有着重要意义。

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