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公开(公告)号：CN116445591A
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202310020623.4
申请日：2023-01-06
Applicant: 苏州大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明涉及一种初级和前体miRNA的检测方法，包括对目标miRNA定位、针对目标miRNA设计引物以及RT‑QPCR检测步骤，具体地：根据转录起始位点、CpG岛、表达序列标签、polyA、基因表达的Cap分析、CIS‑PET/Ditags中的一种或几种对目标miRNA进行定位；设计引物时，正向引物设置范围为序列5’端至GU基序，反向引物设置范围为CNNC基序至3’端，正向引物和反向引物的Tm值为55～61℃，且正向引物与反向引物的最大Tm差为2℃；对样本进行逆转录和PCR，建立荧光强度和目标miRNA的坐标系，实现对目标miRNA的检测。本发明根据对初级和前体miRNA上下游边界注释，根据其转录特点设计定量扩增引物，设计方法简便易行，对于具有临床诊断意义的miRNA的标志物具有良好的潜在应用价值。
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