公开(公告)号：CN107129999A

公开(公告)日：2017-09-05

申请号：CN201710319180.3

申请日：2017-05-09

Applicant: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 李兆龙 ,  丰志华 ,  陈骐 ,  余文权

IPC: C12N15/90 ,  C12N9/22 ,  C12N7/01 ,  A61K39/245 ,  A61P31/22

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及通过稳转CRISPR/Cas9系统对病毒基因组进行编辑从而改变其遗传特性的方法。针对现有的病毒基因组编辑技术的不足，本发明提供一种利用稳转CRISPR/Cas9系统对病毒基因组进行编辑的方法，包括如下步骤：首先构建用于靶向编辑病毒基因组的特异性载体，然后包装慢病毒，再用慢病毒侵染ST细胞与293T细胞获得稳转CRISPR/Cas9系统的ST细胞与293T细胞，最后用病毒侵染这种稳转细胞，并纯化出基因组被编辑的病毒。利用稳转CRISPR/Cas9系统编辑病毒的基因组操作简单、效率高、成本低、适用范围广，能在短时间内获得基因改良型的病毒株。

公开(公告)号：CN108841795A

公开(公告)日：2018-11-20

申请号：CN201810793855.2

申请日：2018-07-19

Applicant: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 李兆龙 ,  黄喻 ,  傅光华 ,  丰志华 ,  陈江华

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/078

Abstract: 本发明提供一种鸭圆环病毒的体外增殖及培养方法，包括如下步骤：(1)采集健康成年番鸭血，进行PBMC的分离培养，制备PBMC细胞悬液；(2)将检测为鸭圆环病毒阳性的病料，加入到PBMC细胞悬液中培养。本发明提供了一种体外增殖培养DuCV的方法，接毒培养后病毒滴度有大幅度的提高，能够实现在实验室完成病毒的分离鉴定，对其致病机理及危害的研究提供较大的帮助。

公开(公告)号：CN108841795B

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN201810793855.2

申请日：2018-07-19

Applicant: 福建省农业科学院畜牧兽医研究所

Inventor： 李兆龙 ,  黄喻 ,  傅光华 ,  丰志华 ,  陈江华

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/078

Abstract: 本发明提供一种鸭圆环病毒的体外增殖及培养方法，包括如下步骤：(1)采集健康成年番鸭血，进行PBMC的分离培养，制备PBMC细胞悬液；(2)将检测为鸭圆环病毒阳性的病料，加入到PBMC细胞悬液中培养。本发明提供了一种体外增殖培养DuCV的方法，接毒培养后病毒滴度有大幅度的提高，能够实现在实验室完成病毒的分离鉴定，对其致病机理及危害的研究提供较大的帮助。