公开(公告)号：CN105925614A

公开(公告)日：2016-09-07

申请号：CN201610342710.1

申请日：2016-05-23

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 林玉玲 ,  赖瑞联 ,  赖钟雄 ,  程春振 ,  刘生财 ,  陈裕坤 ,  张梓浩

IPC: C12N15/87

CPC classification number: C12N15/87

Abstract: 本发明提供了一种快速抑制龙眼胚性愈伤组织细胞中目标基因表达的方法。本发明根据目标mRNA全长序列设计合成数个靶点寡核苷酸siRNA序列，利用悬浮细胞培养体系，通过细胞转染剂Lipofectamine 2000 reagent介导法导入龙眼胚性愈伤组织细胞中，从而实现特异性抑制目标mRNA表达。该方法具有操作简单、抑制效果显著、无需载体构等优点，避免了现有方法由于依赖农杆菌介导的转基因技术而实验周期长，费时费力的缺点，本发明提供了一种快速高效的新技术手段，为龙眼偏性愈伤组织中目标基因的功能研究奠定了重要基础。

公开(公告)号：CN105969806A

公开(公告)日：2016-09-28

申请号：CN201610342716.9

申请日：2016-05-23

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 林玉玲 ,  赖瑞联 ,  赖钟雄 ,  程春振 ,  刘生财 ,  陈裕坤 ,  张梓浩

IPC: C12N15/88

CPC classification number: C12N15/88

Abstract: 本发明提供了一种增强和抑制表达龙眼胚性愈伤组织中miRNA的方法。本发明根据miRNA成熟体经化学修饰和特殊标记设计的miRNA模拟物agomir和高效阻断剂antagomir，采用细胞转染剂Lipofectamine 2000 reagent将二者导入龙眼胚性愈伤组织细胞，实现在龙眼活体中特异性增强或抑制目标miRNA活性，同时进行miRNA表达体系优化和作用效果持续时间鉴定。该方法具有操作简单快速、干扰效果显著、稳定持久等优点，避免了现有方法依赖转基因技术因而实验周期长、费时费力等缺点，本发明为龙眼愈伤组织miRNA研究提供了一种高效便捷的方法，对miRNA表达调控和功能鉴定具有重要意义。