一种枯草芽孢杆菌中CRISPR/Cas9组件的高表达系统

    公开(公告)号:CN118581126A

    公开(公告)日:2024-09-03

    申请号:CN202410788422.3

    申请日:2024-06-18

    Abstract: 本发明公开一种基于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中建立的CRISPR/Cas9组件的高表达系统。本发明借助核糖体RNA(rRNA)启动子高表达的特性,构建含有rRNA启动子(P1启动子)、sgRNA片段、Cas9片段的整合质粒。将整合质粒通过整合载体pDGIEF转化至枯草芽孢杆菌SCK6中,利用枯草芽孢杆菌表达系统的优点和rRNA启动子高表达的特性,提高了CRISPR/Cas9系统在枯草芽孢杆菌中的表达效率,并通过无抗筛选避免了在实际生产应用过程中可能产生的抗性基因污染的问题。

    一种双斑东方鲀卵巢组织细胞系及其应用

    公开(公告)号:CN113621553B

    公开(公告)日:2023-06-30

    申请号:CN202110759358.2

    申请日:2021-07-06

    Abstract: 本发明提供一种双斑东方鲀卵巢组织细胞系及其应用,属于生物技术领域。本发明将双斑东方鲀的卵巢进行分离培养,获得其原代细胞,并进行连续继代培养,最终建立稳定的双斑东方鲀卵巢细胞系。该细胞系的细胞性状优良,以长纤维状细胞为主,分裂旺盛,传代时间短,易消化,贴壁率好,耐饥饿。本发明的双斑东方鲀卵巢细胞系为双斑东方鲀性腺发育机制研究提供了一种新的体外模型。

    一种双斑东方鲀精巢组织细胞系及其应用

    公开(公告)号:CN114717176A

    公开(公告)日:2022-07-08

    申请号:CN202111643767.2

    申请日:2021-12-30

    Abstract: 本发明提供一种双斑东方鲀精巢组织细胞系及其应用,属于生物技术领域。本发明将双斑东方鲀的精巢进行分离培养,获得其原代细胞,并进行连续继代培养,最终建立稳定的双斑东方鲀精巢细胞TBTc。双斑东方鲀精巢细胞TBTc已于2021年10月11日于中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC NO:C2021230,该细胞系的细胞性状优良,以长纤维状细胞为主,分裂旺盛,传代时间短,易消化,贴壁率好,耐饥饿。本发明的双斑东方鲀精巢细胞系为双斑东方鲀性腺发育机制研究提供了一种新的体外模型。

    一种双斑东方鲀卵巢组织细胞系及其应用

    公开(公告)号:CN113621553A

    公开(公告)日:2021-11-09

    申请号:CN202110759358.2

    申请日:2021-07-06

    Abstract: 本发明提供一种双斑东方鲀卵巢组织细胞系及其应用,属于生物技术领域。本发明将双斑东方鲀的卵巢进行分离培养,获得其原代细胞,并进行连续继代培养,最终建立稳定的双斑东方鲀卵巢细胞系。该细胞系的细胞性状优良,以长纤维状细胞为主,分裂旺盛,传代时间短,易消化,贴壁率好,耐饥饿。本发明的双斑东方鲀卵巢细胞系为双斑东方鲀性腺发育机制研究提供了一种新的体外模型。

    基于miRNA的虾蟹卵巢发育促进剂

    公开(公告)号:CN110760545A

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201911050844.6

    申请日:2019-10-31

    Abstract: 本发明涉及一种基于microRNA(以下简称miRNA)的促进虾蟹卵巢发育的方法,其特征在于,在眼柄中注射可特异性结合拟穴青蟹眼柄vih的miRNA,从而抑制vih的表达,促进虾蟹卵巢发育。可特异性结合拟穴青蟹眼柄vih的miRNA序列为GUUAUGGAGUGCGUGUCUGGUGAAG。通过体外实验证实其可以有效降低拟穴青蟹vih mRNA的表达,进一步地,在体实验也证实在眼柄中注射该miRNA可抑制拟穴青蟹眼柄vihmRNA的表达。由于miRNA作用的特异性,使其较剪除眼柄的方法的副作用小;由于miRNA的分子量小于抗体,其在眼柄中扩散能力较强,效率高。

    一种快速构建基因组编辑动物纯系的方法

    公开(公告)号:CN118813702A

    公开(公告)日:2024-10-22

    申请号:CN202410788405.X

    申请日:2024-06-18

    Abstract: 本发明公开通过将基因组编辑组件(如表达Cas9和sgRNA质粒)与阳离子聚合物(PEI)混合后直接注射到亲本性腺,大批量快速产生纯系基因组编辑后代的方法。本发明根据利用PEI能够与外源核酸形成复合物,并通过细胞膜内吞作用进入细胞内的原理和基因编辑技术的原理设计并鉴别出1个可特异性地作用于皱纹盘鲍MSTN的sgRNA,并直接通过微量注射器,靶向注射皱纹盘鲍性腺,对亲本性腺进行编辑,产生编辑后的卵细胞和精细胞,通过催产受精,产生大批量纯系基因编辑后代。这样一种快速构建基因组编辑动物纯系的方法,除可用于皱纹盘鲍基因编辑以外,其原理应该也适用于其它物种。

    刺激隐核虫重组蛋白质疫苗及制备方法

    公开(公告)号:CN107814833B

    公开(公告)日:2020-12-04

    申请号:CN201710942068.5

    申请日:2017-10-11

    Abstract: 本发明涉及一种刺激隐核虫重组蛋白质疫苗及制备方法,其氨基酸序列为:NWVEKTAAADWKGTFVVTSSSCLASCGWKIGTTVVIADKASDATKVTWVGTAHTTDSTNVDVASGSCKYVSSVANAGTAGTAAEVLNNNDECVFATGMCTIMGQKQKSPAKVTFNRDTTLDTKPFQILYKQLAMVPKAQTTVQAAADQATDCDTKASLVDTTTDAKSIVGTLKLSKATCDKCSWDTTKDLKITQDATKKYMVTLAGTIKETTSGDCKNKLTASEACYVTKKDDKTFILVSCTTLDTTNKGIPIAITTANSKTTLTLTRTDSSSQACNVVGEIT。该发明克服了抑动抗原DNA序列难以在细菌中表达、市面上没有有效的预防海水鱼类刺激隐核虫感染的基因重组疫苗的缺点,具有可于大肠杆菌中表达、具有免疫原性、可预防海水鱼类的刺激隐核虫感染的优点。

    基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂

    公开(公告)号:CN110760514A

    公开(公告)日:2020-02-07

    申请号:CN201911050838.0

    申请日:2019-10-31

    Abstract: 本发明公开一种基于基因组编辑的种类特异杀虫剂,通常用化学合成药物来防治寄生虫的感染。但化学合成药物特异性较差,副作用大且有药物残留的问题。寄生虫疫苗常因寄生虫表面抗原的突变而失效。我们根据基因编辑技术的原理设计并鉴别出2个可特异性地作用于刺激隐核虫DNA条形码序列和5.8S核糖体RNA基因的sgRNA,并经直接浸泡试验证实其可特异性地切割刺激隐核虫DNA条形码序列,杀死刺激隐核虫。这样一种基于基因组编辑和DNA条形码的种类特异杀虫剂,除可用于刺激隐核虫防治外,其原理应该也适用于其它寄生虫。

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