公开(公告)号：CN114457142B

公开(公告)日：2024-07-26

申请号：CN202210176147.0

申请日：2022-02-25

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 林文忠 ,  许瑜婷 ,  黄婉婷 ,  杜振国 ,  高芳銮 ,  吴祖建

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/70 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明提供一种高效加尾快速扩增植物dsRNA病毒基因组末端序列的方法及其应用。该方法通过加热总RNA变性成单链RNA；对单链RNA的3'端加A尾；使用oligo(dT)10‑RT将RNA逆转录成cDNA；以cDNA为模板将病毒基因组各分段的两端划分为5'端区域和3'端区域进行Multiplex PCR；跑胶回收目的条带并将其连接至克隆载体后进行测序，获得基因组的全部末端序列。该方法对样品的RNA质量要求低，oligo(dT)10‑RT与Anchor24‑F引物在dsRNA病毒基因组末端序列鉴定上可通同，适用于批量获得dsRNA病毒基因组末端序列，将有助于未知的dsRNA基因组全长序列的获得。

公开(公告)号：CN113528568A

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN202110868973.7

申请日：2021-07-30

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 林文忠 ,  张洁 ,  杜振国 ,  吴祖建 ,  李景远 ,  查晴辰 ,  张文文

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/34 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供一种黄麻黄脉病毒侵染性克隆及其构建方法，属于植物基因工程技术领域。本发明首次构建了黄麻黄脉病毒的侵染性克隆pBINPLUS‑CoYVV‑1.2A和pBINPLUS‑CoYVV‑2.0B，该侵染性克隆能使接种黄麻产生黄脉、花叶、斑驳、卷叶等症状，这为研究黄麻黄脉病毒基因组的结构和功能及其致病机制奠定基础。

公开(公告)号：CN114457142A

公开(公告)日：2022-05-10

申请号：CN202210176147.0

申请日：2022-02-25

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 林文忠 ,  许瑜婷 ,  黄婉婷 ,  杜振国 ,  高芳銮 ,  吴祖建

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/70 ,  C12R1/94

Abstract: 本发明提供一种高效加尾快速扩增植物dsRNA病毒基因组末端序列的方法及其应用。该方法通过加热总RNA变性成单链RNA；对单链RNA的3'端加A尾；使用oligo(dT)10‑RT将RNA逆转录成cDNA；以cDNA为模板将病毒基因组各分段的两端划分为5'端区域和3'端区域进行Multiplex PCR；跑胶回收目的条带并将其连接至克隆载体后进行测序，获得基因组的全部末端序列。该方法对样品的RNA质量要求低，oligo(dT)10‑RT与Anchor24‑F引物在dsRNA病毒基因组末端序列鉴定上可通同，适用于批量获得dsRNA病毒基因组末端序列，将有助于未知的dsRNA基因组全长序列的获得。

公开(公告)号：CN113528568B

公开(公告)日：2023-09-29

申请号：CN202110868973.7

申请日：2021-07-30

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 林文忠 ,  张洁 ,  杜振国 ,  吴祖建 ,  李景远 ,  查晴辰 ,  张文文

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/34 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明提供一种黄麻黄脉病毒侵染性克隆及其构建方法，属于植物基因工程技术领域。本发明首次构建了黄麻黄脉病毒的侵染性克隆pBINPLUS‑CoYVV‑1.2A和pBINPLUS‑CoYVV‑2.0B，该侵染性克隆能使接种黄麻产生黄脉、花叶、斑驳、卷叶等症状，这为研究黄麻黄脉病毒基因组的结构和功能及其致病机制奠定基础。