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公开(公告)号:CN111454983A
公开(公告)日:2020-07-28
申请号:CN202010065345.0
申请日:2020-01-20
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供了一种番木瓜愈伤组织农杆菌转化受体的制备方法,其特征在于:将番木瓜种子消毒后,先后浸泡于NaClO溶液和KNO3溶液中,再转移到含有抗生素的无菌水中萌发长芽,待芽长出后移植到琼脂培养基中黑暗培养至长苗,将苗的下胚轴切下进行愈伤组织诱导,待胚性愈伤长出后扩繁四到五次,即所述的番木瓜愈伤组织农杆菌转化受体。该方法与传统番木瓜愈伤组织转化相比,通过改良愈伤组织的诱导培养基,愈伤诱导时间显著缩短,并且愈伤状态好利于转化,番木瓜转化效率高。本发明所述方法所需设备简单、操作技术容易掌握,具有广阔的开发应用前景。
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公开(公告)号:CN111500620A
公开(公告)日:2020-08-07
申请号:CN202010065344.6
申请日:2020-01-20
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供了一种番木瓜下胚轴农杆菌转化受体的制备及转化方法,将番木瓜种子消毒后,先后浸泡于NaClO溶液和KNO3溶液中,再转移到含有抗生素的无菌水中萌发长芽,待芽长出后移植到琼脂培养基中黑暗培养至长苗,后,再在优化培养基M13上诱导外植体长愈伤,即得所述的番木瓜下胚轴农杆菌转化受体。该转化方法与传统番木瓜转化相比,直接使用预培养的下胚轴作为外植体,避免了愈伤诱导后扩繁的4-5个月时间,显著缩短转化周期。本发明所述方法所需设备简单、操作技术容易掌握,具有广阔的开发应用前景。
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公开(公告)号:CN113293176A
公开(公告)日:2021-08-24
申请号:CN202110599213.0
申请日:2021-05-31
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了菠萝农杆菌转化受体的制备方法及其在菠萝转化中的应用,制备方法包括:取菠萝植株作为外植体,将菠萝植株消毒处理后,通过不定芽诱导培养基诱导不定芽的产生,使不定芽产生的过程中,菠萝植株的基部产生组织块,然后取组织块,将其切成小块后,置于菠萝愈伤组织诱导培养基中,制得菠萝愈伤组织,即菠萝农杆菌转化受体;该方法与传统菠萝愈伤组织诱导和转化相比,通过优化外植体消毒方法得到无菌植株,并在组织块的基础上诱导菠萝愈伤组织,缩短了菠萝愈伤组织诱导时间,并且诱导得到的菠萝愈伤组织状态较好,利于转化,提高了菠萝的转化效率。本发明所述方法所需设备简单、操作技术容易掌握,具有广阔的开发应用前景。
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公开(公告)号:CN119570848A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202510062393.7
申请日:2025-01-15
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供了一种发根农杆菌介导的番木瓜毛状根遗传转化方法及番木瓜转基因阳植株,属于植物基因工程技术领域。本发明提供了一种不依赖组培的番木瓜遗传转化方法,可直接利用发根农杆菌处理外植体培养得到番木瓜转基因阳性植株,不用经过诱导愈伤组织、诱导分化生根等一系列繁琐复杂的无菌过程,避免了组织培养转化周期长、人力物力消耗大、阳性率较低等问题。本发明构建的发根农杆菌介导的遗传转化系统具有高效、稳定、快速的特点,利用固体TY培养基培养的发根农杆菌K599可直接侵染伤口,操作简单、毛根发生率及阳性率均较高,且无需额外的实验设备,适用于大部分实验室。
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公开(公告)号:CN113512523A
公开(公告)日:2021-10-19
申请号:CN202110599212.6
申请日:2021-05-31
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明提供了一种无菌菠萝外植体制备方法及其农杆菌转化方法,无菌菠萝外植体制备方法包括将菠萝幼嫩植株先用清水冲洗干净,然后通过75%的酒精和0.1%HgCl2分别进行消毒后,通过菠萝不定芽诱导培养基诱导菠萝不定芽的产生,产生的不定芽转移至不定芽扩繁培养基上继续光照培养,得到无菌菠萝植株,无菌菠萝植株转移至壮苗培养基上继续光照培养,得到较为粗壮的无菌菠萝植株,将其切成约3mm左右厚度的茎圆片,可以用于菠萝农杆菌转化。该方法通过优化外植体消毒方法得到无菌植株,通过不定芽途径得到大量菠萝茎圆片,并在茎圆片的基础上进行菠萝的转化,提高了菠萝的转化效率;该方法所需设备简单、操作技术容易掌握,具有广阔的开发应用前景。
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