公开(公告)号：CN109517029B

公开(公告)日：2022-03-04

申请号：CN201811420354.6

申请日：2018-11-26

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 方长旬 ,  杨陆可 ,  李兰兰 ,  张鹏丽 ,  林文雄

IPC: C07K1/22

Abstract: 本发明提供一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法，包括利用含有NP‑40,NaCl,PMSF等的蛋白提取缓冲液提取水稻叶片天然总蛋白，进一步用生物素标记引物并扩增启动子DNA，将启动子DNA与链霉亲和素偶联的磁珠孵育，在此基础上，将启动子DNA与磁珠的复合物与水稻叶片天然总蛋白孵育，得到与启动子DNA结合的蛋白。本方法适用于水稻不同品种的启动子DNA结合蛋白的研究，也可用于研究不同植物启动子DNA的结合蛋白。建立了一种高效、简易获得植物启动子DNA结合蛋白的技术。

公开(公告)号：CN109517029A

公开(公告)日：2019-03-26

申请号：CN201811420354.6

申请日：2018-11-26

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 方长旬 ,  杨陆可 ,  李兰兰 ,  张鹏丽 ,  林文雄

IPC: C07K1/22

Abstract: 本发明提供一种有效垂钓水稻启动子DNA结合蛋白的方法，包括利用含有NP-40,NaCl,PMSF等的蛋白提取缓冲液提取水稻叶片天然总蛋白，进一步用生物素标记引物并扩增启动子DNA，将启动子DNA与链霉亲和素偶联的磁珠孵育，在此基础上，将启动子DNA与磁珠的复合物与水稻叶片天然总蛋白孵育，得到与启动子DNA结合的蛋白。本方法适用于水稻不同品种的启动子DNA结合蛋白的研究，也可用于研究不同植物启动子DNA的结合蛋白。建立了一种高效、简易获得植物启动子DNA结合蛋白的技术。

公开(公告)号：CN109180793A

公开(公告)日：2019-01-11

申请号：CN201811420355.0

申请日：2018-11-26

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 方长旬 ,  张鹏丽 ,  杨陆可 ,  李兰兰 ,  林文雄

IPC: C07K14/415 ,  C07K1/14 ,  G01N33/68

Abstract: 本发明提供一种快速提取植物叶片总蛋白的方法，包括先将植物叶片在液氮条件下用竹签手工捻转研磨以快速破碎，进一步加入含有SDS和β-巯基乙醇的裂解液，于100℃条件下裂解细胞游离蛋白，最后常温离心获得蛋白溶液，用于SDS-PAGE电泳及下游的相关试验。本方法适用于拟南芥、烟草、水稻等多种植物叶片总蛋白的提取，建立了一种操作流程简易、制备样品快速、总量高的提取技术，能够为供体植物目标蛋白的快速检测提供重要基础。