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公开(公告)号：CN103805620A
公开(公告)日：2014-05-21
申请号：CN201310715572.3
申请日：2013-12-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种无抗生素四价抗病虫和除草剂植物表达载体及应用。所述载体的T-DNA区结构为：右边界-35S启动子-正向双价抗病序列-内含子-反向双价抗病序列-OCS终止子-Ubi启动子-抗虫基因-NOS终止子-NOS启动子-抗除草剂基因-NOS终止子-左边界，T-DNA区左右边界内无抗生素基因，其中正向双价抗病序列即甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒双价干扰序列，其DNA序列如SEQIDNO.1所示。得到的植物表达载体可用于转化获得同时具有4种抗性的转基因作物，并且获得的转基因作物没有抗生素抗性基因，可提高转基因作物的安全性。并且同一次转化中可获得同时具有4种抗性的转基因作物，与单一抗性的遗传转化相比，可以提高效率3倍以。
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公开(公告)号：CN103966233B
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201410197758.9
申请日：2014-05-13
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , A01H5/00
Abstract: 本发明提供了一种甘蔗愈伤组织显色控制基因ScSN及其应用，根据玉米花青素转录因子基因SN（GenBank:X60706.1）的上游、下游序列设计引物，利用同源克隆技术，从甘蔗上得到花青素转录因子基因ScSN的全长序列。甘蔗ScSN基因开放读码框长度为1722 bp，编码573个氨基酸。将甘蔗ScSN基因的编码区序列在NCBI中进行BLAST分析，与众多玉米花青素相关基因的BLAST同源搜索中，E值等于零，说明了所克隆的基因确实为甘蔗花青素合成相关基因。在ScSN序列两端分别添加KpnⅠ、SalⅠ酶切位点，构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScSN，再通过基因枪轰击转化甘蔗愈伤组织，转化的愈伤组织颜色转变为暗红色，进一步证实所克隆的基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能。
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公开(公告)号：CN103614471B
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201310607161.2
申请日：2013-11-26
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 以甘蔗内源基因ALS和外源基因元件（包括Ubiquitin启动子，NOS启动子、NOS 终止子，Bar基因和Bt基因）设计多重PCR引物。通过对多重PCR反应体系进行优化建立了添加60% Premix TaqTM体积、0.3μM引物浓度、150 ng DNA模板和设定56℃的退火温度的多重PCR反应体系，一次PCR反应可同时检测一个甘蔗内标准基因（ALS基因）和5个外源转基因元件（Ubi启动子、Bt基因、Bar基因、NOS启动子、NOS终止子），并且检测极限可达模板DNA含量的1%。本实验建立的多重PCR反应体系不仅可以检测转基因甘蔗外源基因成分，而且还能有效的检测其它转基因作物。
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公开(公告)号：CN103409413B
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201310292837.3
申请日：2013-07-12
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因果糖-6-磷酸2-激酶基因PCR引物序列及扩增方法。引物序列是由ScF2KP-F和ScF2KP-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103614471A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310607161.2
申请日：2013-11-26
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/686 , C12Q2537/143
Abstract: 以甘蔗内源基因ALS和外源基因元件（包括Ubiquitin启动子，NOS启动子、NOS终止子，Bar基因和Bt基因）设计多重PCR引物。通过对多重PCR反应体系进行优化建立了添加60%PremixTaqTM体积、0.3μM引物浓度、150ngDNA模板和设定56℃的退火温度的多重PCR反应体系，一次PCR反应可同时检测一个甘蔗内标准基因（ALS基因）和5个外源转基因元件（Ubi启动子、Bt基因、Bar基因、NOS启动子、NOS终止子），并且检测极限可达模板DNA含量的1%。本实验建立的多重PCR反应体系不仅可以检测转基因甘蔗外源基因成分，而且还能有效的检测其它转基因作物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103409412B
公开(公告)日：2015-02-04
申请号：CN201310292810.4
申请日：2013-07-12
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因异戊二烯基二磷酸δ-异构酶基因PCR引物序列及扩增方法。引物序列是由ScIDI2-F和ScIDI2-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明是为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103409414A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310294696.9
申请日：2013-07-15
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因乙酰乳酸合酶基因PCR引物序列及扩增方法，引物序列是由ScALS-F和ScALS-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103409413A
公开(公告)日：2013-11-27
申请号：CN201310292837.3
申请日：2013-07-12
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因果糖-6-磷酸2-激酶基因PCR引物序列及扩增方法。引物序列是由ScF2KP-F和ScF2KP-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103409414B
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201310294696.9
申请日：2013-07-15
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了甘蔗基因组内标基因乙酰乳酸合酶基因PCR引物序列及扩增方法，引物序列是由ScALS-F和ScALS-R组成，PCR扩增方法包括反应体系和扩增条件。本发明为转基因甘蔗PCR检测和物种特异性鉴定提供了基因组内标基因，同时为转基因甘蔗检测精度和结果的准确性提供了保证。
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公开(公告)号：CN103805620B
公开(公告)日：2016-02-24
申请号：CN201310715572.3
申请日：2013-12-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种无抗生素四价抗病虫和除草剂植物表达载体及应用。所述载体的T-DNA区结构为：右边界-35S启动子-正向双价抗病序列-内含子-反向双价抗病序列-OCS终止子-Ubi启动子-抗虫基因-NOS终止子-NOS启动子-抗除草剂基因-NOS终止子-左边界，T-DNA区左右边界内无抗生素基因，其中正向双价抗病序列即甘蔗花叶病毒和甘蔗黄叶病毒双价干扰序列，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。得到的植物表达载体可用于转化获得同时具有4种抗性的转基因作物，并且获得的转基因作物没有抗生素抗性基因，可提高转基因作物的安全性。并且同一次转化中可获得同时具有4种抗性的转基因作物，与单一抗性的遗传转化相比，可以提高效率3倍以。
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