公开(公告)号：CN113957053A

公开(公告)日：2022-01-21

申请号：CN202111167760.8

申请日：2021-09-30

Applicant: 福建中医药大学

Inventor： 曹治云 ,  纳撒尼尔·韦甘特 ,  严子兴 ,  曾建伟 ,  彭军 ,  杜军 ,  杨寓宁 ,  丁灵 ,  鲁琴

IPC: C12N5/09 ,  C12N5/071 ,  C12Q1/02 ,  G01N33/68 ,  G01N33/574 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明公开了一种以人源肠癌类器官筛选抗肠癌干细胞中药活性成分的方法，包括：从肠癌患者肠道活检标本中分离组织进而分离隐窝并计数，多次进行传代培养至肠癌类器官充分表现出显著的肿瘤干细胞特征表型时可进行药物筛选，每天显微镜观察类器官生长情况，计数类器官数量和活细胞数，Calcein‑AM荧光试剂标记用药后类器官干细胞活力，免疫印迹检测给药后类器官标记分子表达情况。本发明以肠癌干细胞为靶向具有从源头抑制肿瘤增殖、耐药及转移的优势，筛选中药活性成分具有毒副作用低、价格低廉的优势，以肠癌类器官为模型具有再现体内肠癌干细胞分化发育为肠癌的真实过程性，较二维干细胞培养更好反映肿瘤生长的微环境，进行疗效确切的药物筛选。采用显微镜观察、类器官干细胞活力评估及干细胞标记分子组检测相结合的整套评估方式，从类器官形态到分子功能全面评估中药活性成分抗肠癌干细胞的作用效果，不再局限于现有细胞活力的单一评价模式，此筛选方法指标明确、体系完整、评估确切。