一种用于可视化检测活细胞内肿瘤相关mRNA的DNA四棱锥的制备方法

    公开(公告)号:CN112280830A

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN202011294095.4

    申请日:2020-11-18

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 陈宪 文俊梅 陈果

    Abstract: 本发明公开了一种用于可视化检测活细胞内肿瘤相关mRNA的DNA四棱锥的制备方法,该DNA四棱锥由两条捕获探针和四条带有荧光标记的DNA支撑探针经两步退火反应自组装而成。当目标不存在时,支撑探针的刚性双链使DNA四棱锥保持张开的三维立体结构;而当目标存在时,目标链引发链置换反应,捕获探针离开并捕获目标。与此同时,DNA四棱锥底边单链则自动折叠形成更稳定的发夹结构,带动DNA四棱锥的整体空间结构发生变化。标记在DNA四棱锥的底边两端的Cy3和Cy5随着折叠过程而靠近,直至发生荧光共振能量转移。这项工作提出了可视化检测细胞中特异性mRNA的另一个维度,也可以为其他许多生物分子的检测开辟新的途径。

    一种用于检测路易体病标志物的Cas12a-DNAzyme传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN113186253B

    公开(公告)日:2022-06-21

    申请号:CN202110456485.5

    申请日:2021-04-27

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 陈宪 文俊梅

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测路易体病标志物的Cas12a‑DNAzyme传感器及其制备方法。该传感器包括以下组分:DNAzyme和Locker杂交链D‑L溶液;sub‑1和sub‑2杂交链sub1‑2溶液;发夹H溶液;含LbCas12a、crRNA 1μM和ssDNA‑FQ的报告器溶液;和目标物溶液。该传感器通过核酸适配体与目标α‑syn寡聚体的特异性结合,将非核酸的蛋白目标转换为核酸检测,然后利用基于DNAzyme的步行器和Cas12a的结合,两次放大检测信号,实现了血清中α‑syn寡聚体的灵敏检测。

    一种用于可视化检测活细胞内肿瘤相关mRNA的DNA四棱锥的制备方法

    公开(公告)号:CN112280830B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202011294095.4

    申请日:2020-11-18

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 陈宪 文俊梅 陈果

    Abstract: 本发明公开了一种用于可视化检测活细胞内肿瘤相关mRNA的DNA四棱锥的制备方法,该DNA四棱锥由两条捕获探针和四条带有荧光标记的DNA支撑探针经两步退火反应自组装而成。当目标不存在时,支撑探针的刚性双链使DNA四棱锥保持张开的三维立体结构;而当目标存在时,目标链引发链置换反应,捕获探针离开并捕获目标。与此同时,DNA四棱锥底边单链则自动折叠形成更稳定的发夹结构,带动DNA四棱锥的整体空间结构发生变化。标记在DNA四棱锥的底边两端的Cy3和Cy5随着折叠过程而靠近,直至发生荧光共振能量转移。这项工作提出了可视化检测细胞中特异性mRNA的另一个维度,也可以为其他许多生物分子的检测开辟新的途径。

    一种用于检测路易体病标志物的Cas12a-DNAzyme传感器及其制备方法

    公开(公告)号:CN113186253A

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN202110456485.5

    申请日:2021-04-27

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 陈宪 文俊梅

    Abstract: 本发明公开了一种用于检测路易体病标志物的Cas12a‑DNAzyme传感器及其制备方法。该传感器包括以下组分:DNAzyme和Locker杂交链D‑L溶液;sub‑1和sub‑2杂交链sub1‑2溶液;发夹H溶液;含LbCas12a、crRNA 1 μM和ssDNA‑FQ的报告器溶液;和目标物溶液。该传感器通过核酸适配体与目标α‑syn寡聚体的特异性结合,将非核酸的蛋白目标转换为核酸检测,然后利用基于DNAzyme的步行器和Cas12a的结合,两次放大检测信号,实现了血清中α‑syn寡聚体的灵敏检测。

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