公开(公告)号：CN114592070A

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202210228249.2

申请日：2022-03-07

Applicant: 珠海市现代农业发展中心(珠海市金湾区台湾农民创业园管理委员会、珠海市农渔业科研与推广中心) ,  中山大学

Inventor： 李勇 ,  李水生 ,  郭建谊 ,  张晋 ,  盘润洪 ,  张勇 ,  古群红 ,  李桂峰 ,  罗志平

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种黄鳍鲷微卫星家系鉴定的方法，包括以下步骤：(1)黄鳍鲷全同胞家系建立；(2)黄鳍鲷亲本和子代基因组DNA提取；(3)多态性微卫星引物筛选；(4)荧光标记8重PCR体系开发和扩增；(5)微卫星位点基因分型及家系鉴定：(5.1)确定亲本和家系个体在各微卫星位点上对应的基因型；(5.2)家系鉴定。该方法首次在黄鳍鲷上利用荧光修饰的多态微卫星标记建立了亲子鉴定平台，鉴定准确率高，快速，成本低。还公开了上述方法在黄鳍鲷的群体遗传学评价、系谱认证、亲子鉴定、分子标记辅助家系管理和分子标记辅助亲本选择方面的应用。

公开(公告)号：CN114592070B

公开(公告)日：2023-10-17

申请号：CN202210228249.2

申请日：2022-03-07

Applicant: 珠海市现代农业发展中心(珠海市金湾区台湾农民创业园管理委员会、珠海市农渔业科研与推广中心) ,  中山大学

Inventor： 李勇 ,  李水生 ,  郭建谊 ,  张晋 ,  盘润洪 ,  张勇 ,  古群红 ,  李桂峰 ,  罗志平

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种黄鳍鲷微卫星家系鉴定的方法，包括以下步骤：(1)黄鳍鲷全同胞家系建立；(2)黄鳍鲷亲本和子代基因组DNA提取；(3)多态性微卫星引物筛选；(4)荧光标记8重PCR体系开发和扩增；(5)微卫星位点基因分型及家系鉴定：(5.1)确定亲本和家系个体在各微卫星位点上对应的基因型；(5.2)家系鉴定。该方法首次在黄鳍鲷上利用荧光修饰的多态微卫星标记建立了亲子鉴定平台，鉴定准确率高，快速，成本低。还公开了上述方法在黄鳍鲷的群体遗传学评价、系谱认证、亲子鉴定、分子标记辅助家系管理和分子标记辅助亲本选择方面的应用。

公开(公告)号：CN114686524B

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202210611146.4

申请日：2022-06-01

Applicant: 中山大学

Inventor： 张晋 ,  李水生 ,  张勇 ,  彭诚 ,  卢丹琪 ,  李桂峰

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种规模化生产全雌性黄鳍鲷的方法，包括以下步骤：（S1）F0代嵌合体雄鱼的获得；（S2）测交和基因突变个体的筛选；（S3）1龄雌性黄鳍鲷的生产和鉴定。该方法以黄鳍鲷雌雄同体生殖特性为基础，结合性别功能基因nanos2利用和CRISPR/Cas9基因编辑技术，为黄鳍鲷养殖提供遗传改良的新品系或新品种。

公开(公告)号：CN114592076A

公开(公告)日：2022-06-07

申请号：CN202210502134.8

申请日：2022-05-10

Applicant: 中山大学 ,  广东梁氏水产种业有限公司

Inventor： 张勇 ,  韩崇 ,  李桂峰 ,  李水生 ,  韩林强 ,  梁健辉 ,  林浩然

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6879 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种斑鳜雄性分子标记引物，所述引物为引物对N1或引物对N2，所述引物对N1包括Contig‑1上游引物和Contig‑1下游引物，所述引物对N2包括Contig‑2上游引物和Contig‑2下游引物，所述Contig‑1上游引物、Contig‑1下游引物、Contig‑2上游引物和Contig‑2下游引物的核苷酸序列分别如SEQ ID NO：1~SEQ ID NO：4所示。该引物可对斑鳜的性别进行快速准确地鉴定。还公开了一种鉴别斑鳜性别的方法，该方法耗时短，效率高。本发明还进一步公开了上述斑鳜雄性分子标记引物、方法在斑鳜全雌性育种以及全雌杂交鳜育种方面的应用。

公开(公告)号：CN111593055A

公开(公告)日：2020-08-28

申请号：CN202010293545.1

申请日：2020-04-15

Applicant: 中山大学 ,  广东梁氏水产种业有限公司

Inventor： 张勇 ,  韩崇 ,  朱巧莹 ,  李水生 ,  韩林强 ,  李桂峰

IPC: C12N15/12 ,  C07K14/46 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/6879 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种翘嘴鳜雄性特异抗缪勒氏管激素AMHY基因组序列及其构建方法，以及翘嘴鳜雄性特异抗缪勒氏管激素AMHY基因及其编码蛋白。其中AMHY基因组序列如SEQ ID NO：1所示，AMHY基因序列如SEQ ID NO：4所示，其编码蛋白序列如SEQ ID NO：5所示，还公开了基于翘嘴鳜AMHY基因的雄性分子标记引物以及翘嘴鳜鱼性别鉴定的方法和上述AMHY基因、编码蛋白以及雄性分子标记引物在翘嘴鳜鱼全雌性育种方面的应用，其中雄性分子标记引物的序列如SEQ ID NO：6所示和SEQ ID NO：7所示，该雄性分子标记引物可实现翘嘴鳜性别的快速准确鉴定。该性别鉴定方法简短，效率高。

公开(公告)号：CN108377936A

公开(公告)日：2018-08-10

申请号：CN201710183213.6

申请日：2017-03-24

Applicant: 佛山市南海百容水产良种有限公司 ,  中山大学 ,  广东海大集团股份有限公司

Inventor： 卢薛 ,  李桂峰 ,  古勇明 ,  胥鹏 ,  韩林强 ,  江谢武

IPC: A01K61/10 ,  A01K61/95 ,  A23K50/80 ,  A23K20/184

Abstract: 本发明公开了一种全雌鳜鱼的规模化生产方法，包括如下步骤：S1.鱖性逆转的饲养处理：在鳜鱼苗开口后10天以内，性腺分化之前，采用17α-甲基睾丸酮激素混合饲料经饵料鱼被鳜鱼摄食的方式进行鳜鱼性逆转；S2.性逆转个体性腺鉴定：S3.性逆转个体的测交；S4.全雌鳜鱼苗的生产。本发明采用激素混合饲料经饵料鱼被鳜鱼摄食的方式进行鳜鱼性逆转，建立了一套高效率诱导鳜鱼性逆转的技术，并配套相应的生理性别性腺显微鉴定、遗传性别测交鉴定技术，为鱖性别控制和全雌育种研究提供技术支撑。本发明提供的方法能够实现鳜鱼雌鱼的99%的雄性化性逆转，生产出全雌鳜鱼雌性比例可达100%，与普通养殖鳜鱼相比全雌鱼具有明显的生长优势，具有极佳的应用前景。

公开(公告)号：CN102077823A

公开(公告)日：2011-06-01

申请号：CN201010546568.5

申请日：2010-11-16

Applicant: 佛山市生生水产股份有限公司 ,  中山大学

Inventor： 李桂峰 ,  何建国 ,  洪锡标 ,  王小林 ,  孙际佳 ,  王海芳 ,  罗渡

IPC: A01N1/02 ,  A61D19/02 ,  A01K61/00

CPC classification number: Y02A40/81

Abstract: 本发明属于鱼类繁殖技术领域，涉及斑鳜鱼精液超低温冷冻保存及杂交人工授精方法，可广泛应用于家庭、集体鳜鱼养殖，特别是规模化养殖繁育。本发明包括精液采集、稀释液配制、精液稀释、精液冷冻、精液解冻、人工授精等步骤，人工授精时，通过不同的精卵比实验确定1000000∶1为最佳冻精与鲜卵比。本发明设备要求低，操作易于实现，可用于一般的鱼类繁殖场地，能实现对斑鳜资源的储存，解决了鳜杂交育种中鳜和斑鳜性腺发育不同步的问题并提高斑鳜精子利用率的方法，在繁殖过程中可以根据育种需求、生产需要和亲鱼资源量进行精卵比的灵活调整。

公开(公告)号：CN115896298A

公开(公告)日：2023-04-04

申请号：CN202210919697.7

申请日：2022-08-02

Applicant: 中山大学 ,  广东梁氏水产种业有限公司

Inventor： 张勇 ,  刘士琰 ,  韩崇 ,  李水生 ,  李桂峰 ,  韩林强 ,  梁健辉 ,  林浩然

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6879 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种翘嘴鳜X染色体分子标记引物，其特征是：所述引物为引物对1或引物对2，所述引物对1包括Contig‑1上游引物和Contig‑1下游引物，所述引物对2包括Contig‑2上游引物和Contig‑2下游引物，其中Contig‑1上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，Contig‑1下游引物的核苷酸序列如SEQID NO：2所示，Contig‑2上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示，Contig‑2下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。还公开了一种翘嘴鳜鱼YY超雄鱼鉴定的方法以及上述引物或方法在翘嘴鳜鱼全雄性育种中的应用。

公开(公告)号：CN115500286A

公开(公告)日：2022-12-23

申请号：CN202211135425.4

申请日：2022-09-19

Applicant: 中山大学 ,  广东梁氏水产种业有限公司

Inventor： 张勇 ,  刘士琰 ,  黄景军 ,  李水生 ,  李桂峰 ,  韩林强 ,  梁健辉 ,  林浩然

IPC: A01K61/10 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q1/6879 ,  C12Q1/6888

Abstract: 本发明公开了一种人工诱导获得伪雌翘嘴鳜鱼的方法，其特征在于：在翘嘴鳜孵化后20~25天开始，向其投喂经17‑β雌二醇处理的麦鲮，连续投喂8~12天后，转为投喂正常饵料，养至第二年性成熟，然后从性成熟的翘嘴鳜中筛选得到伪雌翘嘴鳜鱼。该方法通过在翘嘴鳜决定性别的关键时期，短时间内间接向其投喂17‑β雌二醇（E2），实现高效人工诱导雄性翘嘴鳜性逆转，从而获得可产生卵子的伪雌鱼（XY♀）。

公开(公告)号：CN114634951B

公开(公告)日：2022-08-16

申请号：CN202210506203.2

申请日：2022-05-11

Applicant: 中山大学

Inventor： 张勇 ,  韩崇 ,  李桂峰 ,  李水生 ,  卢丹琪

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113 ,  C12N15/16 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种翘嘴鳜CRISPR/Cas9基因编辑方法，将Cas9 mRNA和靶序列gRNA混合后，在翘嘴鳜卵受精后的45分钟内，利用显微注射的方式对1细胞期受精卵动物极进行注射。本发明还公开了上述编辑方法在翘嘴鳜XY型生理雌鱼育种方面的应用，利用本发明得到的amhy基因突变F0代雄鱼进行传代得到的F1代中含有移码突变的雄鱼个体会发育为雌性。本发明第一次建立翘嘴鳜胚胎显微注射操作技术，并首次实现翘嘴鳜内源性基因的编辑操作，为开展翘嘴鳜基因功能研究及翘嘴鳜养殖品种的遗传改良提供强有力的技术手段。