用于内源性RNA成像的遗传编码传感器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113621647B

    公开(公告)日:2023-10-13

    申请号:CN202110972941.1

    申请日:2021-08-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于内源性RNA成像的遗传编码传感器,包括RNA传感模块和荧光蛋白报告模块,RNA传感模块为具有茎环构象的degApt,荧光蛋白报告模块为融合了荧光蛋白tDeg。靶标RNA可以在RNA传感模块中恢复degApt的活性构象,使荧光蛋白稳定化,从而对靶标RNA进行成像,可在活的哺乳动物细胞中对survivin mRNA和lncRNA MALAT‑1的表达和动态进行成像。本发明的用于内源性RNA成像的遗传编码传感器可以广泛应用于生物医学研究和临床治疗中活细胞和动物的RNA成像。

    用于内源性RNA成像的遗传编码传感器及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113621647A

    公开(公告)日:2021-11-09

    申请号:CN202110972941.1

    申请日:2021-08-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于内源性RNA成像的遗传编码传感器,包括RNA传感模块和荧光蛋白报告模块,RNA传感模块为具有茎环构象的degApt,荧光蛋白报告模块为融合了荧光蛋白tDeg。靶标RNA可以在RNA传感模块中恢复degApt的活性构象,使荧光蛋白稳定化,从而对靶标RNA进行成像,可在活的哺乳动物细胞中对survivin mRNA和lncRNA MALAT‑1的表达和动态进行成像。本发明的用于内源性RNA成像的遗传编码传感器可以广泛应用于生物医学研究和临床治疗中活细胞和动物的RNA成像。

    一种Rhodol衍生物染料及其应用

    公开(公告)号:CN110423487B

    公开(公告)日:2021-01-22

    申请号:CN201910706458.1

    申请日:2019-08-01

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明涉及一种Rhodol衍生物染料和一种光声成像PA探针,尤其涉及Rhodol衍生物染料和一种光声成像PA探针的制备及其应用。本发明设计合成的新的Rhodol衍生物染料Rhodol‑NIR,具有大摩尔消光系数,优异光稳定性和理想量子产率的新型Rhodol‑NIR发色团,在设计高对比度激活式PA探针时表现出优异的光物理性质。本发明设计合成的Rhodol‑PA探针被证明在体外通过PA吸收和荧光测量显示对hNQO1的高灵敏度和高选择性检测。本发明是国内外第一次利用螺内酯开环转换策略开发高对比度可激活PA探针。本发明的开关策略是一种普遍适用的设计,可为开发高对比度可激活PA探针提供新平台。

    基于四苯乙烯的亚细胞器粘度探针及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN108516950B

    公开(公告)日:2021-01-05

    申请号:CN201810463429.2

    申请日:2018-05-15

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明提供了基于四苯乙烯的亚细胞器粘度探针及其制备方法与应用,所述亚细胞器粘度探针包括线粒体粘度探针和溶酶体粘度探针,其制备方法主要包括(1)化合物TPE‑Br的合成、(2)化合物TPE‑CHO的合成、(3)线粒体粘度探针的合成、(4)溶酶体粘度探针的合成;所合成的粘度探针可用于检测亚细胞器的粘度。本发明所述的基于四苯乙烯的亚细胞器粘度探针的制备方法简单,所合成的粘度探针具有良好的水溶性,在工作浓度范围内对所研究的细胞的状态没有影响,粘度探针自身荧光背景弱,提高了亚细胞器粘度监测的成像对比度,并且粘度探针对黏度的反应敏感,具有极强的抗干扰性,对亚细胞器具有良好的靶向特异性。

    一种Rhodol衍生物染料及其应用

    公开(公告)号:CN110423487A

    公开(公告)日:2019-11-08

    申请号:CN201910706458.1

    申请日:2019-08-01

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明涉及一种Rhodol衍生物染料和一种光声成像PA探针,尤其涉及Rhodol衍生物染料和一种光声成像PA探针的制备及其应用。本发明设计合成的新的Rhodol衍生物染料Rhodol-NIR,具有大摩尔消光系数,优异光稳定性和理想量子产率的新型Rhodol-NIR发色团,在设计高对比度激活式PA探针时表现出优异的光物理性质。本发明设计合成的Rhodol-PA探针被证明在体外通过PA吸收和荧光测量显示对hNQO1的高灵敏度和高选择性检测。本发明是国内外第一次利用螺内酯开环转换策略开发高对比度可激活PA探针。本发明的开关策略是一种普遍适用的设计,可为开发高对比度可激活PA探针提供新平台。

    基于单粒子脂质体计数的数字核酸杂交分析方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN106282317A

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201510249544.6

    申请日:2015-05-15

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明涉及一种基于单粒子脂质体计数的数字核酸杂交分析方法及试剂盒。该方法包括如下步骤:将脂质体与目标链混合,充分反应后,得到捕获液,脂质体包括纳米金及包覆于纳米金上的脂质膜,脂质体与目标链的摩尔比满足,充分反应后,部分脂质体上有且只有一条目标链,部分脂质体上没有目标链,连接有目标链的脂质体为目标对象,没有连接上目标链的脂质体为非目标对象;分离目标对象与非目标对象得到含目标对象的目标液;使目标链从脂质体上脱离得到中间液;使目标链及脂质体分离,得到含脂质体的检测溶液;采用生物质谱检测检测溶液,且单个脂质体线性通过质谱离子传输管。上述方法对于检测目标链具有较高的灵敏度与准确性。

    基于拉曼活性纳米颗粒混合组装的循环肿瘤细胞的耦合增强SERS高通量生物传感方法

    公开(公告)号:CN102661941B

    公开(公告)日:2015-04-22

    申请号:CN201210116225.4

    申请日:2012-04-19

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于拉曼活性纳米颗粒混合组装的循环肿瘤细胞的耦合增强SERS高通量生物传感方法,制备了能与CTC特异性结合的拉曼染料修饰的金纳米棒探针和核酸功能化的金纳米颗粒探针,分别修饰有不同aptamer的金纳米棒探针各自与其相对应的CTC结合,通过离心去除多余的金纳米棒探针,再加入能与金纳米棒探针杂交的金纳米颗粒探针,纳米颗粒发生团聚,产生电磁场耦合增强。同时,结合拉曼光谱自身所具有的特点,即谱图信息丰富且具有唯一性,实现了循环肿瘤细胞的高通量SERS检测。该方法操作过程简单、快速,无需对样品进行分离和富集,灵敏度高,特异性好,有望成为研究肿瘤的化疗药物的疗效评估以及筛选的一种新方法。

    基于纳米颗粒团聚的DNA去甲基化酶的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102586463B

    公开(公告)日:2014-12-10

    申请号:CN201210073843.5

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于纳米颗粒团聚的DNA去甲基化酶的生物传感方法。制备了核酸功能化的纳米颗粒探针,特定的核酸序列中包含了限制性内切酶的切割位点并进行了甲基化处理,激活的DNA去甲基化酶使甲基化的DNA发生去甲基化作用,从而对甲基化敏感的限制性内切酶和核酸外切酶同时消化降解DNA,导致纳米颗粒团聚,产生耦合增强,实现了高灵敏度的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。操作步骤简单、快速,灵敏度高、特异性强,有望成为研究全基因组范围内的DNA去甲基化问题以及表观遗传重编排过程的新方法之一,对于生物大分子的功能研究、活性分析和抑制剂考察也提供了技术手段。

    基于磷脂修饰的纳米颗粒团聚的磷脂酶A2的生物传感方法

    公开(公告)号:CN102661926B

    公开(公告)日:2014-09-17

    申请号:CN201210075069.1

    申请日:2012-03-20

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明制备了拉曼染料修饰的磷脂双层膜包裹的金纳米颗粒探针,激活的PLA2水解甘油磷脂sn-2位的脂酰键,使磷脂双层膜结构的稳定性受到破坏,导致纳米颗粒团聚,导致纳米颗粒团聚,表面等离子体发生耦合作用,在颗粒之间产生了巨大的电磁场,显著增强了颗粒表面吸附分子的拉曼信号,实现了高灵敏度的SERS检测。同时,该方法会产生光吸收性质的变化,也可以通过比色法进行检测。该方法不需要对酶底物进行标记,操作步骤简单、快速,成本低,灵敏度高,特异性强,重现性好。有望成为一种有用的PLA2定量分析方法,对于研究抗菌、抗炎症以及细胞毒性、药理毒理作用、代谢稳定性及其机制具有重要的意义。

    基于表面等离子体耦合效应的均相多组分免疫分析方法

    公开(公告)号:CN102914646B

    公开(公告)日:2014-08-20

    申请号:CN201210463931.6

    申请日:2012-11-16

    Applicant: 湖南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于表面等离子体耦合效应的均相多组分免疫分析方法,分别制备了表面修饰有拉曼活性染料和捕获抗体的金纳米球探针和表面修饰有拉曼活性染料和检测抗体的金纳米棒探针,拉曼活性染料自身带有巯基且无荧光背景,抗体经TCEP还原处理。待测物抗原与抗体发生免疫夹心反应,生成免疫复合物,拉近纳米颗粒之间的距离,产生表面等离子体耦合效应,显著增强了纳米颗粒表面修饰染料的拉曼信号,利用耦合增强效应实现了对抗原的SERS定量分析。该方法简单、快速,检测过程只需要一步操作,不需要反复洗脱,无需对样品进行分离,实现了样品中含有多个组分的同步定量分析,灵敏度高,特异性好,有望成为蛋白组学研究和药物疗效评估的一种新方法。

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