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公开(公告)号：CN104894161A
公开(公告)日：2015-09-09
申请号：CN201510329462.2
申请日：2015-06-15
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 双基因表达载体及其构建和应用方法。本发明是以根据两个目的基因MtDREB1C和RcXET同时表达设计引物对，对目的基因及中间插入的终止子启动子序列-nos-35S-进行PCR扩增，仅用一个PCR快速将两个目的基因、中间插入的终止子启动子序列连接成一个整体MtDREB1C-nos-35S-RcXET结构序列。将该序列插入pBin438表达载体并转化农杆菌GV3101，进一步转化中国月季，获得了再生植株。有6株再生植株获得PCR验证，其中5株获Southern杂交的验证。生理检测结果表明，部分转化植株的耐寒性、耐旱性优于非转化植株(MtDREB1C表达结果)，生长速率也明显增强(RcXET表达结果)。该方法可用于需要两个以上基因同时表达的表达载体快速构建。
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公开(公告)号：CN116636459B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202310463629.9
申请日：2023-04-26
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种大花绣球杂种胚直接成苗培养方法，包括以下步骤：步骤1：花粉生活力测定；步骤2：杂交授粉，在母本植株不育花萼片开始展开时，剪除所有的不孕花，同时去除发育状况不良的可育花；当花蕾膨大呈淡紫时，用镊子轻压花蕾，去除花瓣和雄蕊，此时柱头湿润呈Y”型，可以进行授粉，授粉完成后套袋，1周后去除；步骤3：受精胚珠培养，包括外植体处理及培养条件的选择、诱导培养、壮苗与生根培养和炼苗移栽。本发明通过花粉生活力测定、杂交授粉、受精胚珠培养等培养步骤的设置，可以快速有效的使大花绣球杂种胚直接成苗，从而有效提升了大花绣球的成苗效率，同时很好的节约了大花绣
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公开(公告)号：CN102884984A
公开(公告)日：2013-01-23
申请号：CN201210434709.3
申请日：2012-11-05
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 一种月月红体细胞胚胎发生及植株再生方法，该方法是以带叶柄的月月红（Rosa chinensis Jacq.）无菌芽嫩叶为材料通过添加有2,4-D、TDZ和L-脯氨酸的SH培养基共同作用，诱导出愈伤组织，然后在红光作用下诱导出体细胞胚，进一步获得再生植株的过程。该方法用不同的培养基，分别在暗培养、红光培养和普通白光的条件下，获得高频发生的体细胞胚胎，正常植株再生率达到50%左右。高频发生的体细胞胚胎发生及植株再生方法在基因转化、基因功能验证、快速繁殖、树龄幼化、人工种子创制、种质改良与创新方面具有极广泛的用途。
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公开(公告)号：CN105638195A
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201511023068.2
申请日：2015-12-30
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01G1/00
CPC classification number: A01G22/00
Abstract: 本发明公开了一种山茶或西洋杜鹃扦插育苗的方法。主要包括：(1)选取山茶当年生半木质化枝条5‐10厘米或者西洋杜鹃当年生半木质化枝条3‐5厘米，去掉插条底端2/3的叶片；(2)剪取薄无纺布包裹椰糠粉形成直径为3厘米，高为5厘米的圆柱形的育苗块；(3)将步骤(1)中准备的插条插入步骤(2)中准备好的圆柱形育苗块；(4)统一将带插穗的育苗块放入育苗盒的穴槽中，并浇透水；(5)合上育苗盒盖子，置于大棚中培养，大棚的培养温度不超过35℃，遮阴率在50％，山茶40‐50天生根，西洋杜鹃30‐40天生根。本发明方法操作简单易行，无需激素处理且生根时间短，特别适合于面对互联网销售的大规模的工厂化育苗，具有广谱的适应性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102911930A
公开(公告)日：2013-02-06
申请号：CN201210346673.3
申请日：2012-09-18
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明公开了一种红花檵木叶片总RNA的提取方法。采用本发明的提取方法提取的红花檵木RNA纯度高，杂质少，以α-tubulin、β-actin、18S rRNA、GAPDH等几个常用的内参基因特异引物序列进行RT-PCR检测，能够得到比较亮的与引物设计的预期片段大小一致的特异条带（见图2）,即本试验所用的方法得到总RNA完整性好，能用于后续的RT-PCR扩增，进行相关基因的表达分析。
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公开(公告)号：CN102154269A
公开(公告)日：2011-08-17
申请号：CN201110001641.5
申请日：2011-01-06
Applicant: 湖南农业大学
IPC: C12N15/11 , C12N15/10 , C12N15/113
Abstract: 一种基于PCR的串联重复序列快速构建法和专用引物对及应用，该方法是以根据目的顺式作用元件设计的引物对对目的顺式作用元件进行PCR扩增，得到方向相同的目的顺式作用元件的低拷贝串联重复序列，该方法仅用一个PCR快速构建3个以上同向串联子，阳性克隆率达到18％，用两个PCR和一个亚克隆，可以获得200个同向串联子。低拷贝串联子在酵母杂交中用于重复顺式元件的构建快速有效，而获得的高拷贝串联在高分子重复蛋白质的生产具有极广泛的用途。
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公开(公告)号：CN118745435A
公开(公告)日：2024-10-08
申请号：CN202411026309.8
申请日：2024-07-30
Applicant: 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了月季‘月月红’RcTPS1a基因在调控植物开花时间中的应用，属于植物基因工程技术领域。本发明公开的月季‘月月红’RcTPS1a基因在调控植物开花时间中的应用，RcTPS1a基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。通过过表达RcTPS1a基因可以促进拟南芥的开花时间，在‘月月红’中瞬时沉默该基因则延迟开花，过表达该基因能够促进开花，该基因有促进开花的功能。
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公开(公告)号：CN105432314A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201610003651.5
申请日：2016-01-05
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01G1/00
CPC classification number: A01G22/00
Abstract: 本发明提供了一种利用干苔藓覆盖的杜鹃花播种育苗方法。杜鹃花扦插繁殖方法，主要包括：(1)播种苗床准备：在播种容器或者苗床上垫上10-15厘米的草炭土园土混合物(8:1-10:1)；(2)播种：将杜鹃花种子均匀的撒播在准备好的播种苗床上；(4)干苔藓覆盖：在撒播杜鹃花种子的苗床上覆盖0.5-1厘米左右的干苔藓；(5)浇水：覆盖完干苔藓后浇透水，放入大棚内常温培养。本发明方法操作简单易行，集中育苗，无需激素处理且出苗时间短，出苗率高，后期移栽方便，适合大规模的杜鹃花工厂化育苗。
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公开(公告)号：CN103583358B
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201310504177.0
申请日：2013-10-24
Applicant: 湖南农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种铁皮石斛兰离体培养再生植株的方法，包括如下步骤：1)、材料预处理，将铁皮石斛兰组培苗暗培养48h，获得幼嫩茎尖。2)、诱导愈伤组织，剥离茎尖接种于愈伤组织诱导培养基上进行培养。3)、诱导不定芽，取生长良好的石解兰愈伤组织，转移到不定芽诱导培养基中培养得到丛生不定芽。4)、继代培养，将丛生不定芽接种到继代培养基上进行继代培养，培养条件为：25℃恒温培养30天，每日光照培养16h，光照强度2000lx，暗培养8h。本发明的技术方案是一种高效、安全的育种途径。通过组织培养技术诱导产生不定芽并进行增殖培养，能够解决石斛兰的快速繁殖问题。
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