公开(公告)号：CN119876219A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202411822249.0

申请日：2024-12-11

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 熊立瑰 ,  黄芳芳 ,  谢玉欢 ,  张灵枝 ,  李娟 ,  黄建安 ,  刘仲华

IPC: C12N15/80 ,  C12N15/65 ,  C12N1/14 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及微生物遗传转化技术领域，具体公开了一种PEG介导山茶炭疽菌原生质体遗传转化的方法，包括以下步骤：获取山茶炭疽菌幼嫩菌丝体，双层擦镜纸过滤收集原生质体，获得原生质体沉淀，STC溶液纯化原生质体，STC重悬原生质体，将质粒加入山茶炭疽菌原生质体，轻轻混匀后室温静置，加入PTC溶液混匀后室温静置，再加入PTC溶液混匀后室温静置，然后倒入TB3固体培养基混匀后倒板，过夜培养后覆盖含有遗传霉素的马铃薯葡萄糖琼脂培养基，将转化子接种至含有遗传霉素的马铃薯葡萄糖琼脂培养基，筛选性状稳定的转化子，即为遗传转化所得菌株，本发明实现了山茶炭疽菌遗传转化的构建，缩短了遗传转化所需要的时间，获得了表达红色荧光且稳定遗传的转化子。