公开(公告)号：CN105755178A

公开(公告)日：2016-07-13

申请号：CN201610316545.2

申请日：2016-05-12

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 戴素明 ,  李芳 ,  邓子牛 ,  李大志 ,  程鹏

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/94

CPC classification number: C12Q1/701

Abstract: 一种柑橘衰退病的q?PCR引物，所述引物序列为：p23?F:5’?CGTGGATTGYGGTAGAAA?3’,p23?R:5’?CTGAGAYTGYGT ATTGTT?3’，上、下游引物序列均为18bp。本发明引物根据NCBI已经公布的柑橘衰退病毒p23基因序列，与自主分离的多个p23基因序列同源比对分析后设计，通用型强，不受柑橘衰退病基因型的限制；检测灵敏度高（最低可以检测的浓度是8.2×10?6 ng/μL的cDNA），可用于低含量病毒的检测，避免因病毒浓度低而检测失败；能够适合多种柑橘组织检测，结果稳定，提高柑橘衰退病检测效率。

公开(公告)号：CN102337291A

公开(公告)日：2012-02-01

申请号：CN201110211961.3

申请日：2011-07-27

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 戴素明 ,  李芳 ,  李大志 ,  邓子牛

IPC: C12N15/82

Abstract: 一种柑橘的基因瞬时表达方法，包括以下步骤：（1）将公知的含有外源基因的植物表达载体导入农杆菌EHA105中，再将含有植物表达载体的农杆菌EHA105接种于YEB培养基中，振荡培育16小时，使农杆菌EHA105生长达到对数生长期；（2）离心收集菌体并悬浮于缓冲液中，调整农杆菌EHA105菌液浓度OD值为0.1～1.2，28℃静置2小时，取1mL一次性注射器，去掉针头吸取农杆菌菌液待用；（3）在柑橘植株上选取刚转绿的成熟叶片，用针头将叶片背面表皮刺破，将注射器管口顶住叶片刺破处并推动，将菌液从破损处渗入叶片并扩展到全叶片。本发明操作方便，无需组织培育过程而不受再生效率、转化效率低的限制，能快速使外源基因在柑橘体内表达。

公开(公告)号：CN106442070B

公开(公告)日：2019-04-12

申请号：CN201611077314.7

申请日：2016-11-30

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 邓子牛 ,  赵亚 ,  马先锋 ,  戴素明 ,  符红艳 ,  李芳

IPC: G01N1/28

Abstract: 一种植物叶片切片的制作方法，在制片过程中，添加非离子表面活性剂吐温‑20的水溶液。制片所使用的非离子表面活性剂吐温‑20的水溶液，吐温‑20的体积浓度＜0.1%，用量为50μl～100μl。本发明通过添加非离子表面活性剂‑‑吐温‑20的水溶液，能保持材料的活性，以最大限度的减少材料的脱水萎缩；利用激光共聚焦显微镜或其他显微镜观察材料时，能使带标记的荧光菌制成的压片有效观察时间长达18h，并保持2天的荧光，且所观察到的图像中几乎没有植物叶片的自发荧光。本发明的植物叶片切片的制作方法，只需在制片时添加吐温‑20水溶液，特别适于柑橘叶片的切片制作，并且操作方便。

公开(公告)号：CN106442070A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201611077314.7

申请日：2016-11-30

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 邓子牛 ,  赵亚 ,  马先锋 ,  戴素明 ,  符红艳 ,  李芳

IPC: G01N1/28

CPC classification number: G01N1/28

Abstract: 一种植物叶片切片的制作方法，在制片过程中，添加非离子表面活性剂吐温-20的水溶液。制片所使用的非离子表面活性剂吐温-20的水溶液，吐温-20的体积浓度＜0.1%，用量为50μl～100μl。本发明通过添加非离子表面活性剂--吐温-20的水溶液，能保持材料的活性，以最大限度的减少材料的脱水萎缩；利用激光共聚焦显微镜或其他显微镜观察材料时，能使带标记的荧光菌制成的压片有效观察时间长达18h，并保持2天的荧光，且所观察到的图像中几乎没有植物叶片的自发荧光。本发明的植物叶片切片的制作方法，只需在制片时添加吐温-20水溶液，特别适于柑橘叶片的切片制作，并且操作方便。

公开(公告)号：CN204509333U

公开(公告)日：2015-07-29

申请号：CN201520161730.X

申请日：2015-03-23

Applicant: 湖南农业大学

Inventor： 戴素明 ,  邓子牛 ,  李芳 ,  李大志

IPC: C12M1/26

Abstract: 一种柑橘病毒样品采样器，包括样品盒，样品盒两侧的盒壁上均设有扣手位凹槽，样品盒的盒壁内表面设有卡扣位，样品盒内底面放置有硝酸纤维素膜，硝酸纤维素膜上放置有网格板，网格板内部设有网格，网格板底部紧密接触硝酸纤维素膜，网格板四周设有向外延伸的边沿，网格板外侧设有与卡扣位配合使用的卡扣脚，网格板与样品盒卡合。本实用新型的网格板在硝酸纤维素膜上产生网格状的压痕，形成样品分界线，在网格下的每一块硝酸纤维素膜上采样即可，植物组织能够均匀地压印于硝酸纤维素膜上，采样效果好；且避免手直接与硝酸纤维素膜接触，洁净无菌，避免样品被污染。