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公开(公告)号：CN118652836B
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202410820667.X
申请日：2024-06-24
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了三丁酸甘油酯作为胚胎体外发育培养液添加剂的用途，属于动物生殖生物学技术领域。本发明首次将三丁酸甘油酯作为添加剂应用于鼠胚胎体外发育培养液，该三丁酸甘油酯能显著提高囊胚率，并且减少胚胎内ROS含量、改善胚胎内线粒体膜电位、提高胚胎内ATP水平及抗氧化基因的表达，改善胚胎内DNA甲基化和组蛋白修饰水平，促进胚胎体外发育；并且三丁酸甘油酯作为天然抗氧化剂和表观药物，安全无毒副作用、价格便宜易获取，在整个发育培养过程中无需更换培养液，操作简单；该三丁酸甘油酯为人类辅助生殖技术的胚胎高效发育、哺乳动物受精胚胎、孤雌胚胎和体细胞克隆胚胎等体外胚胎工程技术均提供了有力支持，应用前景良好。
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公开(公告)号：CN116287004A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310436265.5
申请日：2023-04-21
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种成纤维细胞基因转染方法，所述方法包括：获得细胞浓度为1～2个/uL的成纤维细胞悬液，将所述成纤维细胞悬液于细胞培养皿中制备细胞悬液微滴，每个所述细胞悬液微滴由体积为10±0.5uL的所述成纤维细胞悬液形成；将所述含有细胞悬液微滴的细胞培养皿于套皿微环境中孵育，细胞贴壁后加入细胞培养基培养；获得浓度为150～200ng/uL的含有线性化目的基因的质粒溶液；将所述质粒溶液吸入注射针中，调整所述注射针与水平面所成夹角的角度为30～60°，依次向每个所述细胞注射；注射后进行单细胞培养，获得稳定转染的转基因细胞克隆。获得不带筛选标记细胞系的目的，同时能够实现高效率的稳转。
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公开(公告)号：CN118956911A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411128147.9
申请日：2024-08-16
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了一种提高猪细胞多不饱和脂肪酸含量的方法，通过在猪细胞中过表达FADS2基因实现，具体为：采用本发明提供的FADS2基因过表达载体，利用电转法将其转染至猪细胞（如猪肾成纤维细胞），使用G418药物进行筛选，获得稳定高表达FADS2的单克隆细胞系。实验数据表明，本发明获得的猪单克隆细胞系，甘油三酯含量极显著下调，总脂肪酸含量极显著升高，多不饱和脂肪酸中ω‑3 PUFA、ω‑6 PUFA含量均极显著升高，ω‑3/ω‑6比值极显著提高，并显著上调了EPA、DHA、DPA、DGLA等的表达。本发明首次明确了FADS2基因在猪中的应用，为通过FADS2改良猪肉脂肪酸组成提供了理论基础和数据支撑。
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公开(公告)号：CN117050996A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202311037673.X
申请日：2023-08-16
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , G01N33/68 , C12Q1/6876
Abstract: 本发明提供了一种干扰PLIN2表达的siRNA与应用，属于基因工程技术领域。所述siRNA包括siRNA‑1、siRNA‑2或siRNA‑3，为了检测siRNA干扰CPT1C是否会影响到PLIN2的表达，利用上述siRNA分别检测CPT1C和PLIN2的表达情况，结果发现PLIN2的表达随着siRNA干扰CPT1C干扰效率的降低而升高。本发明利用上述siRNA，首次发现了PLIN2与CPT1C之间的相互作用关系—PLIN2与CPT1C互作调控脂滴的大小。本发明为在个体水平揭示PLIN2调控脂滴大小的分子机制提供素材，并为改良猪的产肉性状提供理论依据。
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公开(公告)号：CN118652836A
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202410820667.X
申请日：2024-06-24
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N5/073
Abstract: 本发明公开了三丁酸甘油酯作为胚胎体外发育培养液添加剂的用途，属于动物生殖生物学技术领域。本发明首次将三丁酸甘油酯作为添加剂应用于鼠胚胎体外发育培养液，该三丁酸甘油酯能显著提高囊胚率，并且减少胚胎内ROS含量、改善胚胎内线粒体膜电位、提高胚胎内ATP水平及抗氧化基因的表达，改善胚胎内DNA甲基化和组蛋白修饰水平，促进胚胎体外发育；并且三丁酸甘油酯作为天然抗氧化剂和表观药物，安全无毒副作用、价格便宜易获取，在整个发育培养过程中无需更换培养液，操作简单；该三丁酸甘油酯为人类辅助生殖技术的胚胎高效发育、哺乳动物受精胚胎、孤雌胚胎和体细胞克隆胚胎等体外胚胎工程技术均提供了有力支持，应用前景良好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117025598A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202310893929.0
申请日：2023-07-18
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N15/67
Abstract: 本发明提供了一种猪精子特异性高效表达的启动子及其应用，属于分子生物学和基因工程技术领域。本发明提供了一种猪精子特异性高效表达启动子SP‑10，所述启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。通过双荧光素酶报告系统和红色荧光蛋白表达系统检测发现SP‑10启动子在猪睾丸支持细胞和成纤维细胞、猪肾细胞中无活性，但在猪精子中表达活性与CMV启动子相当。启动子SP‑10在猪精子中表达具有特异性，且特异性较高。进一步，所述启动子SP‑10可显著提高外源基因在猪精子中的表达效率，对基因工程的应用具有重要意义。
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公开(公告)号：CN116162653A
公开(公告)日：2023-05-26
申请号：CN202310331335.0
申请日：2023-03-30
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N5/071
Abstract: 本发明涉及生物技术和基因工程的技术领域，具体涉及一种靶向切除猪SlamF1基因编码区DNA的成对编辑位点、使用方法及其应用，所述猪SlamF1基因编辑位点包括T1和T2两个编辑位点，该两个编辑位点位于猪4号染色体SlamF1基因编码区的第1外显子区域。本发明提供的两个能基于CRISPR技术有效编辑猪SlamF1基因的靶位点，该靶位点可用于Cas9介导的猪SlamF1基因打靶，并能够将SlamF1基因功能失活，为研究SlamF1基因在猪抗病育种中的功能验证、在猪疾病抗性中的作用机制提供实验材料。
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公开(公告)号：CN119570784A
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202411665414.6
申请日：2024-11-20
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种靶向敲除猪ATP11C基因的sgRNA、sgRNA组合物、载体及应用，属于生物技术领域。该sgRNA为sgRNA1、sgRNA2、sgRNA3、sgRNA4、sgRNA5、sgRNA6中的任一种。本发明针对猪ATP11C基因靶点，设计特异性靶向敲除猪ATP11C基因的sgRNA，从而高效、精准对猪ATP11C基因进行特异性敲除，并且得到稳定敲除ATP11C基因的猪肾成纤维细胞，并且，敲除ATP11C基因后显著抑制猪肾成纤维细胞的增殖，这为通过体细胞克隆技术生产具有相关疾病模型特征的克隆猪奠定了坚实基础，进而为与ATP11C相关的疾病治疗等研究提供了有利的实验材料。
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公开(公告)号：CN119432850A
公开(公告)日：2025-02-14
申请号：CN202411532090.9
申请日：2024-10-30
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/85 , C12N15/12 , C12N5/10 , C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9系统敲除猪E4F1基因的方法，属于基因编辑技术领域；该方法利用特异性靶向猪E4F1基因的sgRNA组合物(一对sgRNA)，构建包含上述sgRNA的CRISPR/Cas9基因敲除载体，再利用上述载体进行猪E4F1基因敲除。本发明方法能够实现猪E4F1基因的高效率敲除，进而显著提高E4F1基因敲除细胞和E4F1基因敲除猪的构建效率，为猪E4F1基因的功能研究及其应用提供了有效方法和基础。
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公开(公告)号：CN118240823A
公开(公告)日：2024-06-25
申请号：CN202410322073.6
申请日：2024-03-20
Applicant: 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 , 湖南楚沩香农牧股份有限公司
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12N15/85 , C12N5/10
Abstract: 本发明公开了一种用于敲除猪CD163、MSTN基因的sgRNA组合物、载体及其应用，属于生物医学技术领域。本发明通过分别对猪CD163、MSTN基因设计基因编辑双靶位点，该靶位点均能被Cas9核酸内切酶特异性识别，从而介导双链断裂，在自我修复系统的作用下通过非同源末端连接的方式使基因发生突变，然后设计sgRNA组合物，并且以tRNA‑sgRNA‑sgRNA scaffold为最小重复单元，利用PTG/Cas9策略构建Cas9‑CD163‑MSTN多顺反子载体，从而实现了高效、精准地敲除靶基因，因此，在猪种质改良中具有较好的应用前景。
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