公开(公告)号：CN115261360A

公开(公告)日：2022-11-01

申请号：CN202210940816.7

申请日：2022-08-02

Applicant: 温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)

Inventor： 文斌 ,  褚茂平 ,  陈慧巧 ,  吴浩然 ,  吴含

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/02 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种gata6基因敲除斑马鱼模型的构建方法，包括如下步骤通过生物信息学软件设计和RNA体外转录获得针对斑马鱼gata6基因的第3号外显子的gRNA；使用gRNA和Cas蛋白组成的核糖核蛋白复合物对gata6基因第3号外显子上的特异位点进行切割，产生DNA双链断裂；受精卵细胞启动非同源末端连接修复DNA，以获得突变DNA；培育获得gata6基因敲除纯合子模型。本发明能够能够产生稳定的基因敲除斑马鱼基因突变模型，可用于心脏和胰腺发育与疾病相关的基础研究、先天性心脏和胰腺缺陷病人基因突变的分子病理诊断和治疗药物开发的小分子药物筛选。

公开(公告)号：CN113599531B

公开(公告)日：2024-05-10

申请号：CN202110747059.7

申请日：2021-07-01

Applicant: 温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)

Inventor： 陈一杰 ,  陈梦纯 ,  姜琦 ,  诸海燕 ,  诸葛德力 ,  王乐丹 ,  颜林志 ,  陈钢 ,  褚茂平 ,  文斌

IPC: A61K47/64 ,  A61K47/51 ,  A61K38/16 ,  A61P9/00 ,  B82Y5/00 ,  B82Y40/00

Abstract: 本发明公开了一种PCM多肽组合KALA多肽的红细胞仿生纳米材料在治疗心血管疾病中的应用，还公开了该红细胞仿生纳米材料的制备方法，该方法如下：获取适量PCM结合KALA并融合成一条融合肽；将该融合肽进行保护氨基酸操作处理，获得PCM/KALA多肽；将PCM/KALA多肽结合在红细胞膜(RBCM)表面；将结合红细胞膜的PCM/KALA多肽利用Extrusion方法通过400nm孔径的聚碳酸酯膜，构建RBCM‑PCM/KALA红细胞仿生纳米颗粒。通过本发明的方法制得的红细胞仿生纳米材料能够不依赖浓度的方式高效且快速的导入到细胞内，相比现有技术还具备心脏富集功能。

公开(公告)号：CN113599531A

公开(公告)日：2021-11-05

申请号：CN202110747059.7

申请日：2021-07-01

Applicant: 温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)

Inventor： 陈一杰 ,  陈梦纯 ,  姜琦 ,  诸海燕 ,  诸葛德力 ,  王乐丹 ,  颜林志 ,  陈钢 ,  褚茂平 ,  文斌

IPC: A61K47/64 ,  A61K47/51 ,  A61K38/16 ,  A61P9/00 ,  B82Y5/00 ,  B82Y40/00

Abstract: 本发明公开了一种PCM多肽组合KALA多肽的红细胞仿生纳米材料在治疗心血管疾病中的应用，还公开了该红细胞仿生纳米材料的制备方法，该方法如下：获取适量PCM结合KALA并融合成一条融合肽；将该融合肽进行保护氨基酸操作处理，获得PCM/KALA多肽；将PCM/KALA多肽结合在红细胞膜(RBCM)表面；将结合红细胞膜的PCM/KALA多肽利用Extrusion方法通过400nm孔径的聚碳酸酯膜，构建RBCM‑PCM/KALA红细胞仿生纳米颗粒。通过本发明的方法制得的红细胞仿生纳米材料能够不依赖浓度的方式高效且快速的导入到细胞内，相比现有技术还具备心脏富集功能。

公开(公告)号：CN114107382A

公开(公告)日：2022-03-01

申请号：CN202111359666.2

申请日：2021-11-16

Applicant: 温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)

Inventor： 文斌 ,  褚茂平 ,  荣星 ,  孙伟越 ,  吴浩然 ,  何雨茜

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种G3bp1条件性基因敲除小鼠模型，该模型由以下步骤构建：构建同源重组DNA载体；通过体外转录获得Cas9 mRNA和针对G3bp1基因2号内含子和3号内含子的gRNA；将同源重组DNA载体、Cas9 mRNA和gRNA注射到小鼠的受精卵中；培育获得条件性基因敲除小鼠。能够克服现有技术中G3bp1全身基因敲除小鼠胚胎致死，无法构建小鼠模型的困难，辅助G3BP1在心血管疾病中的研究。

公开(公告)号：CN113546056A

公开(公告)日：2021-10-26

申请号：CN202110746762.6

申请日：2021-07-01

Applicant: 温州医科大学附属第二医院(温州医科大学附属育英儿童医院)

Inventor： 陈一杰 ,  陈梦纯 ,  诸海燕 ,  姜琦 ,  诸葛德力 ,  陈钢 ,  褚茂平 ,  文斌

IPC: A61K9/50 ,  A61K47/46 ,  A61K47/64 ,  A61K31/704 ,  A61K47/69 ,  A61P9/00 ,  A61P35/00 ,  A61K9/51 ,  A61K47/42 ,  A61K47/26

Abstract: 本发明公开了一种针对阿霉素心脏及系统毒性解毒的仿生纳米保护剂制备方法及应用，该制备方法包括如下步骤：获取DNA与鱼精蛋白Protamine并混合制备获得DNA⪻纳米颗粒；将异官能团聚乙二醇DSPE‑PEG2000‑MAL与PCM/KALA反应制备获得DSPE‑PEG2000‑PCM/KALA；将DSPE‑PEG2000‑PCM/KALA插入到红细胞膜RBCM表面制备获得PCM/KALA‑RBCM；将RBCM‑PCM/KALA和DNA⪻纳米颗粒混合后制备获得DNA⪻@RBCM‑PCM/KALA仿生纳米保护剂。并将上述制备获得的放生纳米保护剂应用在阿霉素解读中。本发明能够克服现有技术中在针对癌症治疗过程中对心肌和/或肝脏留下伤害的问题，能够减少病人的身体负担。