公开(公告)号：CN116254327A

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN202310236698.6

申请日：2023-03-13

Applicant: 海南大学 ,  海南大学三亚研究院

Inventor： 周非凡 ,  黄茹 ,  张凡 ,  吴玲轶

IPC: C12Q1/6844 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明提供一种Argonaute介导链置换指数扩增方法及应用，首先在gDNA引导下TtAgo酶特异性识别并剪切，剪切位点位于gDNA与目标基因或DNA片段形成的互补片段内，通过一对扩增引物在聚合酶的作用下延伸形成双链，该双链存在剪切位点可继续被蛋白识别剪切，而被置换下的单链可作为循环二的底物；在循环一延伸过程中被置换下的序列可与扩增引物互补结合并在聚合酶的作用下延伸，延伸出的产物同样具有剪切位点，在TtAgo酶剪切作用下形成单链可继续作为循环二的底物参与循环，本发明在实现高效扩增的同时，显著缩短了扩增反应所需的时间，在扩增过程中逐步自检，实现了DNA上单碱基差异的显著区分。

公开(公告)号：CN118360373A

公开(公告)日：2024-07-19

申请号：CN202410600170.7

申请日：2024-05-15

Applicant: 海南大学 ,  海南大学三亚研究院

Inventor： 周非凡 ,  黄茹 ,  陈斌 ,  张凡 ,  魏嘉诚

IPC: C12Q1/6858

Abstract: 本发明涉及核酸检测探针技术领域，尤其涉及一种基于Argonaute蛋白的核酸检测探针及其应用。制备方法包括：在金纳米颗粒分散液中加入浓度为1～3mg/mL的牛血清白蛋白溶液和浓度为1μM的TtAgo蛋白溶液，混匀，形成混合液；将所述混合液置于‑70℃以下冷冻5～15min；解冻后，再以6000～10000rpm/min的转速离心10～20min；去上清、保留沉淀，将所述沉淀用缓冲溶液进行重悬，得到金纳米‑TtAgo蛋白核酸检测探针。优点在于：本发明探针通过结合不同的gDNA靶向不同目的基因，无需针对不同基因构建不同的金基核酸探针，更加简便；提高试纸条检测的灵敏度，并实现突变基因的检测。