-
公开(公告)号：CN117625850A
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311664366.4
申请日：2023-12-06
Applicant: 海南大学 , 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，特别涉及用于田间快速检测马铃薯Y病毒属的引物、探针及试剂盒。本发明提供了序列分别如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的正向引物、反向引物及探针，以及用于检测甘薯马铃薯Y病毒属的试剂盒。本发明以甘薯马铃薯Y病毒属的CP基因为基础，设计特定引物和探针。采用本发明的引物和探针进行检测甘薯马铃薯Y病毒属，仅需以甘薯病叶RNA为模板，进行等温扩增，不需要精密仪器，操作简单，结果可视化，结果可在测流层析试纸条上清晰显示，敏感性高，特异性强，诊断准确，整个检测过程只需25分钟，结果的判定极其简便，适用于甘薯马铃薯Y病毒属的田间快速检测。
-
公开(公告)号：CN119351463B
公开(公告)日：2025-04-15
申请号：CN202411899141.1
申请日：2024-12-23
Applicant: 中国热带农业科学院三亚研究院 , 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及基于CsCMV介导的基因载体及其制备方法和应用。本发明在pCsCMV‑CM载体的基础上，通过In‑Fusion无缝克隆的方法成功将Bsm BI位点插入到CsCMV CP 3'端的终止密码子（TAG）之后的非编码区（UTR），构建基于了Golden gate Cloning策略的侵染性克隆pCsCMV‑Bs载体，可快速、高通量的将靶标基因片段克隆到病毒基因组中，应用于木薯基因沉默和基因编辑稳定性更高，表型持续时间更久，为木薯快速高效的基因功能验证和定向改良性状提供了提供一种新的遗传工具。
-
公开(公告)号：CN106906232B
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN201710222909.5
申请日：2017-04-07
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种DNA分子克隆方法及其应用，所述方法包括以下步骤：获得入门载体含有ccdB基因，ccdB基因两端分别依次连接XcmI酶切位点、接头序列和SfiI酶切位点；获得表达载体含有ccdB基因，ccdB基因两端分别依次连接SfiI酶切位点和接头序列；通过PCR获得目标DNA，通过TA克隆插入到所述入门载体，获得入门克隆；或在PCR过程中通过引物加入相应的接头序列，获得线性PCR产物；将上述入门克隆或线性PCR产物与表达载体混合，在克隆反应液作用下完成克隆。本发明改进了克隆反应液以及入门载体和表达载体的结构，实现单个或多个线性PCR产物或环状质粒上的DNA在克隆反应液作用下直接克隆到环状目标载体的一个或多个部位，提高了克隆效率，可广泛用于各种类型的DNA分子克隆。
-
公开(公告)号：CN110951763B
公开(公告)日：2021-11-30
申请号：CN201911166008.4
申请日：2019-11-25
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，公开了一种以番木瓜畸形花叶病毒(PLDMV)为病毒载体的马铃薯Y病毒属病毒基因沉默系统。该系统是将目的基因插入到番木瓜畸形花叶病毒PLDMV的NIb与外壳蛋白CP之间，并在目的基因与CP之间引入NIa‑Pro酶切位点。利用Gibson拼接或In‑Fusion克隆等体外拼接方法将目的基因片段无缝克隆插入到NIb与CP之间构建成含有植物目的基因的重组病毒沉默载体。该重组病毒沉默载体通过农杆菌注射接种植物，诱导沉默植物的目的基因后观察植物的表型变化。本发明为利用PLDMV沉默载体进行番木瓜的基因功能研究提供了强有力的工具，具有重大的科学意义和应用前景。
-
公开(公告)号：CN110184386A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910387290.2
申请日：2019-05-10
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/94
Abstract: 本发明涉及生物技术及微生物检测技术领域，特别涉及用于检测ANRSV的RT-LAMP检测引物及其应用、检测试剂和检测方法。该检测引物的序列如下：外引物ANRSV-F3、外引物ANRSV-B3、内引物ANRSV-FIP、内引物ANRSV-BIP。本发明的槟榔坏死环斑病毒(ANRSV)RT-LAMP检测体系和检测方法针对病毒基因的6个区域设计特异性和灵敏度高的4条引物，且一步完成逆转录和扩增步骤，假阳性率低、快速、高效，且通过肉眼观察颜色变化即可判定结果，无需电泳和紫外观察等步骤，无需使用热循环仪等仪器，成本低、操作简单、鉴定简便，适用于基础实验室和田间检测。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105177041A
公开(公告)日：2015-12-23
申请号：CN201510739878.1
申请日：2015-11-04
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明构建了一套新的用于双分子荧光互补(BiFC)研究的表达载体，载体上整合有荧光蛋白2个片段的表达框架，2个目标蛋白的基因序列能通过一步反应(Golden Gate克隆或闭环Gibson拼接法)同时克隆到载体，分别与荧光蛋白的2个片段融合表达。因此，利用此载体进行BiFC研究时只需构建和向细胞内导入一个载体，极大地方便了植物双分子荧光互补实验的操作。该载体能兼容Golden Gate克隆和闭环Gibson拼接法两种高效的新克隆方法，并且该载体为高拷贝的含T-DNA序列的植物表达载体，可同时用于植物的瞬时和稳定表达。
-
公开(公告)号：CN104911199A
公开(公告)日：2015-09-16
申请号：CN201510355929.0
申请日：2015-06-25
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种DNA分子克隆方法，其包括：获得含有ccdB基因的目标载体，所述ccdB基因两端带有SfiI酶切位点、第一接头序列及第二接头序列，所述接头序列为15-30bp，所述接头序列在SfiI酶切位点外围；获得目标基因，所述目标基因经PCR扩增使其两端同样带有接头序列，其序列与上述第一接头序列和第二接头序列分别一致；将所述含有ccdB基因的目标载体与所述目标基因，SfiI酶和Gibson克隆反应液混合反应，再经转化大肠杆菌获得重组克隆。通过本发明的方法可将DNA通过一步反应直接克隆到环状的目标载体，不受目标DNA序列限制，并且零背景。
-
公开(公告)号：CN119351463A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411899141.1
申请日：2024-12-23
Applicant: 中国热带农业科学院三亚研究院 , 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及基于CsCMV介导的基因载体及其制备方法和应用。本发明在pCsCMV‑CM载体的基础上，通过In‑Fusion无缝克隆的方法成功将Bsm BI位点插入到CsCMV CP 3'端的终止密码子（TAG）之后的非编码区（UTR），构建基于了Golden gate Cloning策略的侵染性克隆pCsCMV‑Bs载体，可快速、高通量的将靶标基因片段克隆到病毒基因组中，应用于木薯基因沉默和基因编辑稳定性更高，表型持续时间更久，为木薯快速高效的基因功能验证和定向改良性状提供了提供一种新的遗传工具。
-
公开(公告)号：CN116064647A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211328434.5
申请日：2022-10-27
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明提供一种植物病毒载体的结构、序列、构建方法及其在植物基因表达中的应用。其要点是该植物病毒载体含有35S启动子‑烟草脆裂病毒TRV2基因组5＇端560bp序列‑NC克隆框‑烟草脆裂病毒TRV2基因组3＇端395bp序列‑Nos终止子的结构，目标基因通过Nimble cloning(NC克隆)一步连接反应，快速克隆到该载体，并在植物中进行高效基因表达和基因编辑。本发明提供的载体能简单、快速、高效地克隆植物基因，方便植物基因表达、沉默或编辑研究。
-
公开(公告)号：CN113881691A
公开(公告)日：2022-01-04
申请号：CN202111250618.X
申请日：2021-10-26
Applicant: 中国热带农业科学院热带生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及植物保护技术领域，尤其涉及兼抗番木瓜畸形花叶病毒和番木瓜环斑病毒的双价弱毒疫苗。本发明通过对PRSV病毒片段的筛选和优化，将其与PLDMV弱毒株进行配合，形成的载体制备获得疫苗能够兼抗PRSV和PLDMV，实现对PRSV和PLDMV的交叉保护。相对于单独抗PRSV或单独抗PLDMV病毒的疫苗而言，本发明提供的双价弱毒疫苗抗病效果显著，为田间通过交叉保护防控PRSV和PLDMV提供了新的材料和途径。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
30
records
(took 0.038 seconds)
