公开(公告)号：CN117844859A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202311555432.4

申请日：2023-11-21

Applicant: 海南大学

Inventor： 钮俊 ,  孙晓钒 ,  王佳 ,  傅钇钧 ,  欧琼键 ,  游慧燕

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/56

Abstract: 本发明提供了一种建立农杆菌介导罗勒瞬时转化体系的方法，选取罗勒叶片为材料，β‑葡糖醛酸酶基因(GUS)为报告基因，采用正交实验对农杆菌菌液浓度、乙酰丁香酮浓度、暗处理时间等因素进行分析，结合图像处理快速鉴定GUS蛋白显色技术，建立由农杆菌介导的罗勒瞬时表达体系。结果表明，当农杆菌菌液浓度OD600＝0.8，暗处理时间＝24小时，乙酰丁香酮浓度＝0μmol/L，共培养4天后，外源GUS蛋白表达程度最高。该方法简单易行，可为快速分析罗勒功能基因启动子活性、亚细胞定位等提供支持，在罗勒基因功能的研究方面有良好的应用价值。

公开(公告)号：CN118620956A

公开(公告)日：2024-09-10

申请号：CN202410775974.0

申请日：2024-06-17

Applicant: 海南大学

Inventor： 钮俊 ,  欧琼键 ,  游慧燕 ,  王佳

IPC: C12N15/84 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/50

Abstract: 本发明提供了一种建立疏柔毛罗勒的快速遗传转化体系的方法，选取生长期的疏柔毛罗勒叶片为材料，采用正交实验对NAA、6‑BA和蔗糖用量等因素进行分析，结合疏柔毛罗勒叶片不定芽诱导萌发率结果为参考，并设置择优方案实验设计验证，建立了一种高效培养基诱导疏柔毛罗勒叶片不定芽萌发的方法，随即进行农杆菌转化与鉴定，进行疏柔毛罗勒叶片遗传转化。该遗传体系实用高效，可为快速诱导疏柔毛罗勒叶片不定芽萌发，建立疏柔毛罗勒遗传转化体系等研究提供了支持，在疏柔毛罗勒基因功能的研究方面有良好的应用价值。

公开(公告)号：CN117388415A

公开(公告)日：2024-01-12

申请号：CN202311288161.0

申请日：2023-10-08

Applicant: 海南大学

Inventor： 钮俊 ,  傅钇钧 ,  王佳 ,  欧琼键 ,  游慧燕

IPC: G01N30/06 ,  G01N30/88

Abstract: 本发明提供了微量样品油脂脂肪酸组分提取检测方法，包括：称取样品置于试管中，依次加入硅胶珠和/或不锈钢珠、5％硫酸甲醇溶液、BHT和C17:0，激烈震荡10～15min，将试管密封后超声处理5～10min；将试管转移至水浴锅中，80～90℃水浴加热1～1.5h；将试管冷却至室温后，加入9％NaCl溶液和正己烷，充分混匀后，低速离心，得到分层溶液；取上清转移至离心管，抽滤挥干溶剂，再加入乙酸乙酯重新溶解，完成样品制备，采用气质联用上机检测。本发明能够将微量、稀缺样品中脂肪酸各组分充分提取，脂肪酸各组分含量准确；实验过程安全、减少了有机溶剂的使用量、节约了提取时间，加快了样品制备。