公开(公告)号：CN109824772B

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN201910143665.0

申请日：2019-02-28

Applicant: 海南大学

Inventor： 王大勇 ,  武新丽

IPC: C07K14/695 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明涉及四种具有提高血清中糖皮质激素水平作用的基因重组人促皮质素（ACTH）前体蛋白：ProACTH113、ProACTH72、ProACTH80、ProACTH141，以及这四种前体蛋白的制备方法。ProACTH113包含阿黑皮素原（Pro‑opiomelanocortin，POMC）的第105‑217位氨基酸多肽链，ProACTH72包含POMC的第105‑176位氨基酸多肽链，ProACTH80包含POMC的第138‑217位氨基酸多肽链，ProACTH141包含POMC的第77‑217位氨基酸多肽链；这四种ACTH前体蛋白中均包含ACTH多肽第1至39位氨基酸序列。为便于纯化，ProACTH113、ProACTH72、ProACTH80、ProACTH141等四种前体蛋白的N端与肠激酶底物序列（EKst）相连接，利用连有组蛋白标签的肠激酶体外切除这四种前体蛋白N端连有的多余肽段，产生游离的ProACTH113、ProACTH72、ProACTH80、ProACTH141，再利用镍柱除去连有组蛋白标签的肠激酶。

公开(公告)号：CN109824772A

公开(公告)日：2019-05-31

申请号：CN201910143665.0

申请日：2019-02-28

Applicant: 海南大学

Inventor： 王大勇 ,  武新丽

IPC: C07K14/695 ,  C12N15/70 ,  C07K19/00 ,  C12N15/62

Abstract: 本发明涉及四种具有提高血清中糖皮质激素水平作用的基因重组人促皮质素（ACTH）前体蛋白：ProACTH113、ProACTH72、ProACTH80、ProACTH141，以及这四种前体蛋白的制备方法。ProACTH113包含阿黑皮素原（Pro-opiomelanocortin，POMC）的第105-217位氨基酸多肽链，ProACTH72包含POMC的第105-176位氨基酸多肽链，ProACTH80包含POMC的第138-217位氨基酸多肽链，ProACTH141包含POMC的第77-217位氨基酸多肽链；这四种ACTH前体蛋白中均包含ACTH多肽第1至39位氨基酸序列。为便于纯化，ProACTH113、ProACTH72、ProACTH80、ProACTH141等四种前体蛋白的N端与肠激酶底物序列（EKst）相连接，利用连有组蛋白标签的肠激酶体外切除这四种前体蛋白N端连有的多余肽段，产生游离的ProACTH113、ProACTH72、ProACTH80、ProACTH141，再利用镍柱除去连有组蛋白标签的肠激酶。