检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法

    公开(公告)号:CN116121429A

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202211455164.4

    申请日:2022-11-21

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明涉及检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法,属于刺激隐核虫检测技术领域。本发明要解决的技术问题是提供检测刺激隐核虫的RPA引物、试剂盒以及检测方法。本发明的快速检测刺激隐核虫的RPA引物,具有特定的核苷酸序列。以样品总DNA为模板,利用该引物对进行RPA扩增,然后用琼脂凝胶电泳检测,若能检测出232bp的电泳条带,则判断为刺激隐核虫阳性,反之为阴性。本发明方法,其最低可检出的4个刺激隐核虫幼虫总DNA。本发明所述刺激隐核虫检测的方法操作简便、所需时间短(90分钟完成检测)、检测结果准确、特异性好、稳定性强、灵敏度高,适用于刺激隐核虫的快速检测和刺激隐核虫病的早期诊断。

    一种驼背鲈鳃细胞系、构建及其应用方法

    公开(公告)号:CN113957037A

    公开(公告)日:2022-01-21

    申请号:CN202111382035.2

    申请日:2021-11-22

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明涉及一种驼背鲈鳃细胞系、构建及其应用方法,属于细胞生物学技术领域,所述细胞系于2021年10月22日保藏在中国武汉武汉大学的中国普通微生物菌种保藏管理中心,保藏编号为CGMCC No.23097。本发明还提供了驼背鲈鳃细胞系的制备方法,经传代15次后,该细胞系可稳定培养,目前已稳定传35代;该方法制备的细胞系可放置于液氮中长期保存,复苏后可继续正常培养。驼背鲈鳃细胞系可用于神经坏死病毒检测及相关病理学研究、以及外源质粒转染相关实验。

    一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法

    公开(公告)号:CN115418342B

    公开(公告)日:2025-04-22

    申请号:CN202211236230.9

    申请日:2022-10-10

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本公开提供了一种鱼组织单细胞悬液及其制备方法,所述方法包括:将鱼体的目的组织预处理为组织碎片,并置于装有缓冲液的离心管内;将离心管离心,除去上清液,加入BSA‑DPBS溶液,吹打以重悬组织碎片;除去离心管内上层清液,加入酶解离试剂消化组织碎片;除去离心管内上层清液,加入BSA‑DPBS溶液,吹打以重悬消化后的组织碎片,得到细胞混合物;将细胞混合物通过细胞过滤筛过滤,收集滤液;滤液中加入DNase I,室温孵育;孵育后的混合物离心,除去上清液,重悬于DPBS中,吹打分散细胞,得到目的组织单细胞悬液。通过本发明的制备方法,能够实现快速、高效获得鱼类组织单细胞悬液,并保证解离的细胞活力,单细胞悬液质量满足单细胞测序要求。

    三重MIRA引物、检测方法以及试剂盒

    公开(公告)号:CN118726549A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202410981526.6

    申请日:2024-07-22

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明涉及三重MIRA引物、检测方法以及试剂盒,属于弧菌检测技术领域。本发明解决的技术问题是提供检测哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血性弧菌的三重MIRA引物、MIRA检测方法、试剂盒以及结合测流层析试纸条的检测方法。本发明三重MIRA引物的核苷酸序列包括哈维氏弧菌正向引物V.h‑F5和反向引物V.h‑R4;溶藻弧菌正向引物V.a‑F3和反向引物V.a‑R2;副溶血性弧菌正向引物V.p‑F4和反向引物V.p‑R1。采用该引物,可同时定性哈维氏弧菌、溶藻弧菌和副溶血性弧菌。本发明三重MIRA检测方法同时检测多目标,且不依赖于昂贵仪器设备,在37℃恒温设备甚至将样品握在手里维持稳定温度即可完成对目的基因的扩增;方法操作简便、90min内即可完成检测、检测结果准确、特异性好、稳定性强、灵敏度高。

    石斑鱼虹彩病毒实时定量PCR检测引物及检测试剂盒

    公开(公告)号:CN116287465A

    公开(公告)日:2023-06-23

    申请号:CN202310283667.6

    申请日:2023-03-22

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明涉及石斑鱼虹彩病毒实时定量PCR检测引物及检测试剂盒,属于石斑鱼虹彩病毒检测技术领域。本发明解决的技术问题是提供石斑鱼虹彩病毒实时定量PCR检测引物和检测试剂盒。该PCR检测引物的核苷酸序列为:正向引物075R 241‑F的核苷酸序列为SEQ ID No.1所示,反向引物075R 241‑R的核苷酸序列为SEQ ID No.2所示。本发明基于对不同种类石斑鱼中SGIV的检测,筛选出适用于不同种类石斑鱼的最佳特异性引物,该引物具有更良好的特异性,可以避免检测SGIV过程中不同种类石斑鱼和其他病原的交叉反应的可能,提高SGIV实时定量PCR检测的准确性和高效性。

    对虾条形码的引物以及同时鉴定多种对虾的多重PCR引物组合、试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN118995957A

    公开(公告)日:2024-11-22

    申请号:CN202411412967.0

    申请日:2024-10-11

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明涉及一种对虾条形码的引物以及同时鉴定多种对虾的多重PCR引物组合、试剂盒及应用,属于分子生物学领域。所述的引物为SEQ ID NO.13‑14所示,所述引物扩增的目标片段长度为900bp,本发明还同时鉴定多种对虾的多重PCR引物组合,所述的引物组合如SEQ ID NO.1‑10,所述的多种对虾为刀额新对虾、南美白对虾、日本囊对虾、短沟对虾和斑节对虾;本发明还提供包含所述引物组的同时鉴定多种对虾的试剂盒及其应用,本发明所述多重PCR引物组合能够对刀额新对虾、南美白对虾、日本囊对虾、短沟对虾和斑节对虾进行快速并且准确的鉴定,可以对于缺乏必要的外部特征的胚胎、生殖细胞(卵子)、对虾加工的食品或半成品等进行鉴定。

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