公开(公告)号：CN114410816A

公开(公告)日：2022-04-29

申请号：CN202210006997.6

申请日：2022-01-05

Applicant: 海南大学

Inventor： 陈银华 ,  向黎 ,  牛晓磊 ,  夏薇 ,  耿梦婷 ,  王红刚 ,  朱寿松 ,  黄思源

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种适用木薯抗病研究的稳定内参基因的筛选方法及应用，包括：1)选取木薯候选内参基因，进行内参引物设计；2)木薯组培苗进行外源激素诱导处理、鞭毛蛋白处理，及不同品种的不同组织部位取样，RNA提取，合成cDNA样本；3)对候选内参基因引物采用cDNA样本进行qRT‑PCR反应，采用geNorm法、NormFinder法和BestKeeper法和ΔCT法，对候选内参基因在外源激素诱导处理、鞭毛蛋白处理后和不同木薯组织部位的表达稳定性分析，筛选出特定条件下木薯内参基因Manes.05G133600表达最稳定，可用作实时荧光定量PCR的稳定内参，为木薯的抗病分子生物学研究奠定方法学基础。

公开(公告)号：CN114410816B

公开(公告)日：2023-09-19

申请号：CN202210006997.6

申请日：2022-01-05

Applicant: 海南大学

Inventor： 陈银华 ,  向黎 ,  牛晓磊 ,  夏薇 ,  耿梦婷 ,  王红刚 ,  朱寿松 ,  黄思源

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明提供一种适用木薯抗病研究的稳定内参基因的筛选方法及应用，包括：1)选取木薯候选内参基因，进行内参引物设计；2)木薯组培苗进行外源激素诱导处理、鞭毛蛋白处理，及不同品种的不同组织部位取样，RNA提取，合成cDNA样本；3)对候选内参基因引物采用cDNA样本进行qRT‑PCR反应，采用geNorm法、NormFinder法和BestKeeper法和ΔCT法，对候选内参基因在外源激素诱导处理、鞭毛蛋白处理后和不同木薯组织部位的表达稳定性分析，筛选出特定条件下木薯内参基因Manes.05G133600表达最稳定，可用作实时荧光定量PCR的稳定内参，为木薯的抗病分子生物学研究奠定方法学基础。