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公开(公告)号：CN116465817A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310602515.8
申请日：2023-05-25
Abstract: 本发明涉及倍性遗传育种技术领域，具体提供一种三倍体石斑鱼的倍性鉴定方法，包括：收集原肠早期的石斑鱼胚胎样品，放到固定液中固定；取出、压碎细胞，裂解、染色、过滤，用流式细胞仪分析样品，确定检测样本的倍性大小；收集原肠早/中期的石斑鱼胚胎，在秋水仙素中浸泡；将胚胎压碎，分散细胞制成细胞悬液，静置沉淀，弃下层组织块，低速离心、弃上层细胞碎片；置换低渗溶液，重悬细胞，低渗处理；离心，保留沉淀，重悬细胞；加固定液，室温静置；离心、收集沉淀，重悬，制片、染色、恒温培养，在显微镜下观察，根据染色体数量确定倍性水平；优点在于：可以判断出石斑鱼胚胎的三倍体率，更早确定石斑鱼胚胎群体中三倍体个体的诱导率。
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公开(公告)号：CN114467920B
公开(公告)日：2022-11-29
申请号：CN202210107918.0
申请日：2022-01-28
Applicant: 海南大学 , 海南大学三亚南繁研究院
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈精液低温保存稀释液、保存方法及应用，属于豹纹鳃棘鲈人工繁育领域。所述稀释液包括如下重量份的组分：氯化钠3.5份，碳酸氢钠1.68份，氯化钾2份，还原性谷胱甘肽2份，葡萄糖0.44份以及胎牛血清10份。将所述豹纹鳃棘鲈精液与所述稀释液按照稀释比例为1:9～1:99稀释后，于0～4℃保存。本发明首次确认并提出了豹纹鳃棘鲈精液0～4℃低温保存的新型配方，对精子无毒害作用，精子保存时间最长可达72h，保存24h时受精率和孵化率仍旧具有71.54％和61.84％，与鲜精相比，有效延长了精子保存时间，保证精子活率，可满足豹纹鳃棘鲈人工良种选育时精子低温短期储存的要求。
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公开(公告)号：CN115305260B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202111446242.X
申请日：2021-11-30
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/89
Abstract: 本发明涉及水产动物技术领域，尤其涉及一种金鲳鱼受精卵的显微注射方法及应用。本发明对金鲳受精后10分钟内的受精卵进行酶处理，处理后5分钟内向处于1细胞期的受精卵胚盘附近注射含目的基因的质粒，能同时保证显微注射的成功率在90％以上，以及受体金鲳胚胎的成活率在85％以上。利用该方法对金鲳受精卵进行显微注射，本发明能够获得较高的注射成功率和胚胎存活率。为在金鲳上开展基因功能研究和分子育种提供了强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN109717107A
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201910207746.2
申请日：2019-03-19
Applicant: 海南大学
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明公开了一种批量制备人工诱导雌核发育石斑鱼的方法，将批量紫外照射处理的鞍带石斑鱼稀释精液作为刺激源，与棕点石斑鱼卵子进行授精；激活后7分钟转入预先装有(4℃±0.5℃)海水的冷休克处理箱中，低温休克处理10分钟，使用多个冷休克处理箱可实现更大量的卵子休克处理；进行复温至常温处理，然后经孵化桶孵化；制备过程中使用对照组倍性分析数据对获得的胚胎进行检测，实现质量控制。通过本发明的方法，能够实现批量高效制备雌核发育石斑鱼纯系群体，为培育优良石斑鱼品种奠定基础。
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公开(公告)号：CN115299385B
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202111533718.3
申请日：2021-12-15
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明涉及水产养殖技术领域，尤其涉及一种金鲳鱼后备亲本和繁殖亲本的筛选方法。该方法明显提高了中期后备亲本性别鉴定准确性，提高了留种效率，可将后备亲本及繁殖亲本的选留量降低70‑80％，繁殖生产效率提高30‑40％，不仅大大降低养殖成本和亲本培育成本，并明显提升了繁殖后代的抗逆性能和生长性能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113197132B
公开(公告)日：2022-12-27
申请号：CN202110690653.7
申请日：2021-06-22
Applicant: 海南大学
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明涉及鱼类遗传育种领域，特别涉及一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法。该方法包括如下步骤：将精子和卵子混合，进行人工受精；受精4.5～5.5min后，将受精卵置于预冷的海水中进行冷休克处理；冷休克处理的温度为0～10℃，时间为10～20min。本发明制备人工诱导三倍体石斑鱼的方法实现了石斑鱼冷休克诱导石斑鱼卵子，可培育出人工三倍体鱼苗，可实现获取多倍体鱼苗，提高了多倍体育苗效率。本技术操作方便、高效实用。
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公开(公告)号：CN114467920A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210107918.0
申请日：2022-01-28
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明公开了一种豹纹鳃棘鲈精液低温保存稀释液、保存方法及应用，属于豹纹鳃棘鲈人工繁育领域。所述稀释液包括如下重量份的组分：氯化钠3.5份，碳酸氢钠1.68份，氯化钾2份，还原性谷胱甘肽2份，葡萄糖0.44份以及胎牛血清10份。将所述豹纹鳃棘鲈精液与所述稀释液按照稀释比例为1:9～1:99稀释后，于0～4℃保存。本发明首次确认并提出了豹纹鳃棘鲈精液0～4℃低温保存的新型配方，对精子无毒害作用，精子保存时间最长可达72h，保存24h时受精率和孵化率仍旧具有71.54％和61.84％，与鲜精相比，有效延长了精子保存时间，保证精子活率，可满足豹纹鳃棘鲈人工良种选育时精子低温短期储存的要求。
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公开(公告)号：CN115305260A
公开(公告)日：2022-11-08
申请号：CN202111446242.X
申请日：2021-11-30
Applicant: 海南大学
IPC: C12N15/89
Abstract: 本发明涉及水产动物技术领域，尤其涉及一种金鲳鱼受精卵的显微注射方法及应用。本发明对金鲳受精后10分钟内的受精卵进行酶处理，处理后5分钟内向处于1细胞期的受精卵胚盘附近注射含目的基因的质粒，能同时保证显微注射的成功率在90％以上，以及受体金鲳胚胎的成活率在85％以上。利用该方法对金鲳受精卵进行显微注射，本发明能够获得较高的注射成功率和胚胎存活率。为在金鲳上开展基因功能研究和分子育种提供了强有力的技术支持。
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公开(公告)号：CN115299385A
公开(公告)日：2022-11-08
申请号：CN202111533718.3
申请日：2021-12-15
Applicant: 海南大学
Abstract: 本发明涉及水产养殖技术领域，尤其涉及一种金鲳鱼后备亲本和繁殖亲本的筛选方法。该方法明显提高了中期后备亲本性别鉴定准确性，提高了留种效率，可将后备亲本及繁殖亲本的选留量降低70‑80％，繁殖生产效率提高30‑40％，不仅大大降低养殖成本和亲本培育成本，并明显提升了繁殖后代的抗逆性能和生长性能。
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公开(公告)号：CN113197132A
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN202110690653.7
申请日：2021-06-22
Applicant: 海南大学
IPC: A01K61/10
Abstract: 本发明涉及鱼类遗传育种领域，特别涉及一种人工诱导石斑鱼三倍体的方法。该方法包括如下步骤：将精子和卵子混合，进行人工受精；受精4.5～5.5min后，将受精卵置于预冷的海水中进行冷休克处理；冷休克处理的温度为0～10℃，时间为10～20min。本发明制备人工诱导三倍体石斑鱼的方法实现了石斑鱼冷休克诱导石斑鱼卵子，可培育出人工三倍体鱼苗，可实现获取多倍体鱼苗，提高了多倍体育苗效率。本技术操作方便、高效实用。
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