一种用于检测长棘海星环境DNA的引物组合物及其应用

    公开(公告)号:CN116179719B

    公开(公告)日:2024-11-01

    申请号:CN202211703337.X

    申请日:2022-12-29

    Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体提供了一种用于检测长棘海星环境DNA的引物组合物,包括上游引物和下游引物;所述上游引物的序列为5’‑CTTGAACAATGTACGCTACCGACAATTCG‑3’;所述下游引物的序列为5’‑CATCAATGCTTTATGGCCTCTGCGTGAAGTC‑3’。还包括探针5’‑FAM‑AGCTGTAGCCCTGCCTTGTAGCGAATGCGTTCTTG‑THF‑ATGC TGAAGCCTTG‑SpC3‑3’。本发明还提供了利用上述引物组合物检测长棘海星环境DNA的方法。突破了传统PCR检测手段的局限,实现了常温条件下长棘海星环境DNA的快速检测,在长棘海星种群动态监测和暴发成灾预警中拥有广阔的应用前景。

    一种同时检测造礁石珊瑚中多种抗生素残留的方法

    公开(公告)号:CN117471010A

    公开(公告)日:2024-01-30

    申请号:CN202311447084.9

    申请日:2023-11-01

    Abstract: 本发明涉及抗生素测定技术领域,尤其涉及一种同时检测造礁石珊瑚中多种抗生素残留的方法。包括:分别配置多种抗生素的标准工作液,采用高效液相色谱串联质谱法检测各个抗生素的浓度,然后绘制标准曲线;造礁石珊瑚样品预处理,得到待测提取液;活化固相萃取小柱;样品进行过柱处理,样品过柱后,用甲醇洗脱;氮吹浓缩洗脱液,用流动相复溶,过0.22μm尼龙滤膜,待测;流动相由95%甲酸‑甲酸铵混合溶液和5%甲醇组成;采用HPLC‑MS/MS方法结合标准曲线检测待测样中各抗生素的浓度;洗脱程序中流动相由0.1%甲酸水溶液和甲醇组成。优点在于:同时对造礁石珊瑚中多种抗生素精准检测,降低检测成本、提高检测效率。

    一种用于检测长棘海星环境DNA的引物组合物及其应用

    公开(公告)号:CN116179719A

    公开(公告)日:2023-05-30

    申请号:CN202211703337.X

    申请日:2022-12-29

    Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体提供了一种用于检测长棘海星环境DNA的引物组合物,包括上游引物和下游引物;所述上游引物的序列为5’‑CTTGAACAATGTACGCTACCGACAATTCG‑3’;所述下游引物的序列为5’‑CATCAATGCTTTATGGCCTCTGCGTGAAGTC‑3’。还包括探针5’‑FAM‑AGCTGTAGCCCTGCCTTGTAGCGAATGCGTTCTTG‑THF‑ATGC TGAAGCCTTG‑SpC3‑3’。本发明还提供了利用上述引物组合物检测长棘海星环境DNA的方法。突破了传统PCR检测手段的局限,实现了常温条件下长棘海星环境DNA的快速检测,在长棘海星种群动态监测和暴发成灾预警中拥有广阔的应用前景。

    基于caspase3活性的造礁石珊瑚健康评估方法

    公开(公告)号:CN107646748A

    公开(公告)日:2018-02-02

    申请号:CN201710924807.8

    申请日:2017-10-01

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供一种基于caspase3活性的造礁石珊瑚健康评估方法,包括确定生物指标步骤、选定标准参照点步骤和建立评估标准步骤。所述的确定生物指标步骤包括选出造礁石珊瑚响应环境胁迫的关键酶caspase3,以造礁石珊瑚caspase3活性为评估珊瑚健康水平的指标;所述的选定标准参照点步骤包括通过选定理想生长状态及不同胁迫条件下的珊瑚样本作为参照点;所述的建立评估标准步骤包括根据不同参照点样本caspase3活性数据、造礁石珊瑚生长状态和恢复到理想海水环境中的存活率来建立珊瑚健康水平标准。本发明可以客观准确的评估珊瑚健康水平,操作过程简单快捷,不仅可以填补珊瑚礁资源调查技术空白,而且可以指导珊瑚人工移植母体选择,助力珊瑚礁生态系统的研究和保护。

    一种砗磲的人工诱导产卵方法

    公开(公告)号:CN106577413A

    公开(公告)日:2017-04-26

    申请号:CN201610938879.3

    申请日:2016-11-01

    Applicant: 海南大学

    CPC classification number: Y02A40/822

    Abstract: 本发明公开了一种砗磲的人工诱导产卵方法,包括以下步骤:根据砗磲的生殖特性,在每年7~9月砗磲繁殖季节的满月或新月的凌晨对性腺发育成熟的砗磲用20μmol/L五羟色胺(5‑hydroxytryptamine)进行诱导,使其在2h内产卵,具体操作方法如下:将选定的性腺发育成熟的砗磲从水里移出,使用注射器在性腺注射20μmol/L的五羟色胺2mL,将砗磲置于500目筛网过滤海水中,使水位高出砗磲2~3cm,小量充氧,将排出的精子和卵子按1:200的体积比混匀后受精。本发明方法具有操作简单、安全可靠、产卵率及受精率高和可规模化操作等特点,可以有效缓解砗磲生物资源破坏的现状,实现了砗磲人工养殖的重大突破。

    基于caspase3活性的造礁石珊瑚健康评估方法

    公开(公告)号:CN107646748B

    公开(公告)日:2021-02-23

    申请号:CN201710924807.8

    申请日:2017-10-01

    Applicant: 海南大学

    Abstract: 本发明提供一种基于caspase3活性的造礁石珊瑚健康评估方法,包括确定生物指标步骤、选定标准参照点步骤和建立评估标准步骤。所述的确定生物指标步骤包括选出造礁石珊瑚响应环境胁迫的关键酶caspase3,以造礁石珊瑚caspase3活性为评估珊瑚健康水平的指标;所述的选定标准参照点步骤包括通过选定理想生长状态及不同胁迫条件下的珊瑚样本作为参照点;所述的建立评估标准步骤包括根据不同参照点样本caspase3活性数据、造礁石珊瑚生长状态和恢复到理想海水环境中的存活率来建立珊瑚健康水平标准。本发明可以客观准确的评估珊瑚健康水平,操作过程简单快捷,不仅可以填补珊瑚礁资源调查技术空白,而且可以指导珊瑚人工移植母体选择,助力珊瑚礁生态系统的研究和保护。

    一种砗磲的人工诱导产卵方法

    公开(公告)号:CN106577413B

    公开(公告)日:2019-07-12

    申请号:CN201610938879.3

    申请日:2016-11-01

    Applicant: 海南大学

    CPC classification number: Y02A40/822

    Abstract: 本发明公开了一种砗磲的人工诱导产卵方法,包括以下步骤:根据砗磲的生殖特性,在每年7~9月砗磲繁殖季节的满月或新月的凌晨对性腺发育成熟的砗磲用20μmol/L五羟色胺(5‑hydroxytryptamine)进行诱导,使其在2h内产卵,具体操作方法如下:将选定的性腺发育成熟的砗磲从水里移出,使用注射器在性腺注射20μmol/L的五羟色胺2mL,将砗磲置于500目筛网过滤海水中,使水位高出砗磲2~3cm,小量充氧,将排出的精子和卵子按1:200的体积比混匀后受精。本发明方法具有操作简单、安全可靠、产卵率及受精率高和可规模化操作等特点,可以有效缓解砗磲生物资源破坏的现状,实现了砗磲人工养殖的重大突破。

    基于砗磲线粒体16S基因扩增引物及其应用

    公开(公告)号:CN106399548A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610966874.1

    申请日:2016-10-28

    Applicant: 海南大学

    CPC classification number: C12Q1/6888

    Abstract: 本发明公开了一种基于砗磲线粒体16S基因扩增引物及其应用,基于Genbank数据库中的砗磲16S序列,设计出通用正向引物F,并针对不同砗磲Tri_squ_YZ_R(鳞砗磲)、Tri_max_YZ_R(长砗磲)、Tri_gig_YZ_R(库氏砗磲)、Tri_cro_YZ_R(番红砗磲)和Hip_hip_YZ_R(砗蚝)设计特异性的反向引物,在50μL体系下进行PCR,最后可通过琼脂糖凝胶电泳的条带鉴别砗磲的种类。采用本发明的砗磲线粒体16S基因扩增引物,可以迅速,准确的鉴别出砗磲物种。

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