一种水产养殖用宽谱噬菌体制剂及其制备方法

    公开(公告)号:CN108103031B

    公开(公告)日:2021-09-07

    申请号:CN201810024877.2

    申请日:2018-01-10

    Abstract: 本发明涉及水产养殖领域,公开了一种水产养殖用宽谱噬菌体制剂及其制备方法,该噬菌体制剂由保藏号为CGMCC No.9623的噬菌体毒株NTHP01以基因工程大肠杆菌DH5α为宿主菌发酵制备。制备方法:1)将大肠杆菌DH5α添加至培养基中发酵培养,得到宿主菌发酵液;2)将噬菌体和MgCl2母液投入至宿主菌发酵液中,混匀后静置,增殖培养,得到发酵混合液;3)将发酵混合液经离心后,得到噬菌体制剂。本发明的宽谱噬菌体制剂对多种水产养殖病原菌均有裂解作用,可单独或与其他微生态制剂复配使用。且其宿主菌采用基因工程菌,制备方法简便,使用安全,无副作用,可推广应用于水产养殖的细菌性病害防治。

    中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法

    公开(公告)号:CN104059875B

    公开(公告)日:2016-05-18

    申请号:CN201410171766.6

    申请日:2014-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种中华鳖胚胎细胞组织块的原代培养方法。本发明步骤为(1)采集中华鳖的受精蛋,消毒;(2)破开受精蛋的蛋壳,将胚胎从蛋黄中剥离出来,将剥离出来的胚胎组织放在1×PBS缓冲液中清洗,然后浸泡灭菌;(3)将胚胎组织放入M199培养基中清洗4-5次,然后转移至完全培养基中并将胚胎组织剪碎得组织块,再将组织块用完全培养基清洗一次;(4)用无菌的一次性接种针均匀分散组织块于细胞瓶的内壁上,使组织块贴壁生长3-4小时,然后加入完全培养基浸没组织块,30-31℃恒温培养3天以上。本发明操作简单,培养方便,无需特定的细胞分离液,培养成功率高。

    脂质体包裹的真核表达质粒pEGFP-IFNα及用途

    公开(公告)号:CN105200082A

    公开(公告)日:2015-12-30

    申请号:CN201510506343.X

    申请日:2015-08-18

    Abstract: 本发明涉及脂质体包裹的真核表达质粒pEGFP-IFNα及用途。脂质体包裹的真核表达质粒pEGFP-IFNα,它是通过以下方法制备的:反转录-PCR扩增-连接到T载体-转化至大肠杆菌-双酶切-回收IFNα片段-插入真核表达载体的多克隆位点-转化大肠杆菌DH5ɑ-抽提质粒-酶切-形成W/O型初乳-得到复乳-除去有机溶剂得到干扰素脂质体混悬液。如图5所示,与对照组相比较,这些基因在4种组织中均被强烈诱导表达,其中大多数ISG基因在24h达到最高水平,在72h内回落到正常水平。这从另一个方面证实脂质体包裹的pEGFP-IFNα抗病毒效果。另外,我们还检测了经脂质体包裹的pEGFP-IFNɑ刺激后草鱼体内EGFP基因的表达,结果显示,在草鱼4种组织中均检测到EGFP,其诱导表达水平显得既快速又显著。

    一株中华鳖气单胞菌噬菌体及其应用

    公开(公告)号:CN104450629A

    公开(公告)日:2015-03-25

    申请号:CN201410506817.6

    申请日:2014-09-28

    Abstract: 本发明提供一种中华鳖气单胞菌噬菌体,保藏号为CGMCC:No.9623,该噬菌体核酸部分序列片段与气单胞菌噬菌体同源性达到75%以上,能对中华鳖嗜水气单胞菌形成噬菌斑,对致病性气单胞菌具有裂解作用,可用于对气单胞菌所导致的疾病采用生物疗法治疗和预防。本发明的有益效果在于:特异性强、副作用小、增殖能力强、不易产生抗性、病原菌依赖性、使用方便,对中华鳖烂脖子病和白点病等具有显著的治疗作用。采用本发明治疗中华鳖烂脖子病和白点病等能达到特异性强、副作用小、增殖能力强、不易产生抗性、病原菌依赖性、使用方便的目的。

    罗氏沼虾野田村病毒RT-LAMP-LFD检测方法及其检测试剂盒

    公开(公告)号:CN103409555A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310305396.6

    申请日:2013-07-19

    Abstract: 本发明公开了一种罗氏沼虾野田村病毒RT-LAMP-LFD检测试剂盒及其检测方法。该检测方法是根据GenBank公布的罗氏沼虾野田村病毒(MrNV)序列的保守区域设计了MrNVRT-LAMP-LDF反应系统所需引物与探针;采用本发明人配制的病毒RNA提取试剂提取MrNV病毒RNA,使用本发明建立的MrNVRT-LAMP反应体系进行检测,依据反应体系中加入的检测探针,在反应结束后利用核酸快速检测试纸判定结果。同现在该病毒的常用检测技术相比,本发明具有简便快速、特异性好、灵敏度高的特点,而且可用于生产一线的技术人员和养殖户现场使用,有利于罗氏沼虾白体病的诊断与预防。

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