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公开(公告)号:CN103060335B
公开(公告)日:2017-06-09
申请号:CN201110322750.7
申请日:2011-10-21
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了优化的门冬胰岛素前体基因序列及其在酵母的高效表达。本发明优化的门冬胰岛素前体基因所编码的氨基酸序列与原基因序列一致,但在酵母内的表达水平远高于原基因序列。通过摇瓶发酵试验对表达结果进行检测发现:优化后门冬胰岛素前体的蛋白表达量提高了1.8~7.5倍;在30L发酵罐中,摇瓶结果最佳的改造序列重组子的产量比原来可提高10.8倍。本发明还公开了上述基因序列的改造方法。
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公开(公告)号:CN103060335A
公开(公告)日:2013-04-24
申请号:CN201110322750.7
申请日:2011-10-21
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明公开了优化的门冬胰岛素前体基因序列及其在酵母的高效表达。本发明优化的门冬胰岛素前体基因所编码的氨基酸序列与原基因序列一致,但在酵母内的表达水平远高于原基因序列。通过摇瓶发酵试验对表达结果进行检测发现:优化后门冬胰岛素前体的蛋白表达量提高了1.8~7.5倍;在30L发酵罐中,摇瓶结果最佳的改造序列重组子的产量比原来可提高10.8倍。本发明还公开了上述基因序列的改造方法。
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公开(公告)号:CN103468595A
公开(公告)日:2013-12-25
申请号:CN201310441524.X
申请日:2013-09-24
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种表达重组人血白蛋白的巴斯德毕赤酵母菌、所述巴斯德毕赤酵母菌的构建方法和应用,以及利用该巴斯德毕赤酵母菌表达重组人血白蛋白的方法。本发明利用交配单倍体酵母菌获得二倍体巴斯德毕赤酵母菌,所述二倍体菌含有两个染色体组,两个染色体组均包含人血白蛋白成熟肽编码序列,但分别包含不同的筛选标记。利用二倍体菌株具有两个染色体组的性质高效表达重组人血白蛋白,本发明有效地解决了现有技术中表达菌株构建周期长、重组人血白蛋白表达量偏低等问题。
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公开(公告)号:CN103468595B
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201310441524.X
申请日:2013-09-24
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及一种表达重组人血白蛋白的巴斯德毕赤酵母菌、所述巴斯德毕赤酵母菌的构建方法和应用,以及利用该巴斯德毕赤酵母菌表达重组人血白蛋白的方法。本发明利用交配单倍体酵母菌获得二倍体巴斯德毕赤酵母菌,所述二倍体菌含有两个染色体组,两个染色体组均包含人血白蛋白成熟肽编码序列,但分别包含不同的筛选标记。利用二倍体菌株具有两个染色体组的性质高效表达重组人血白蛋白,本发明有效地解决了现有技术中表达菌株构建周期长、重组人血白蛋白表达量偏低等问题。
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公开(公告)号:CN102952836A
公开(公告)日:2013-03-06
申请号:CN201210433642.1
申请日:2012-11-02
Applicant: 浙江海正药业股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种重组人长效白介素1受体拮抗剂融合蛋白的纯化方法,包括发酵表达获得含有目的蛋白的发酵液、预处理、强阴离子交换层析、蓝胶亲和层析、弱阴离子交换层析。本发明得到较高纯度的目的蛋白,有效解决了在大规模发酵生产中无法得到足够纯度的目的蛋白的难题。
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