公开(公告)号：CN117603935A

公开(公告)日：2024-02-27

申请号：CN202311312527.3

申请日：2023-10-11

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  朱芳莹 ,  张晓健 ,  黄梦钰 ,  郑垦 ,  郑裕国

IPC: C12N9/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N1/21 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域，尤其涉及一种ω‑转氨酶突变体及其编码基因与应用。本发明构建的ω‑转氨酶嵌合体MwTAMc对底物前西他列汀酮第一次出现催化活性，且表现出严格的(R)‑立体选择性。针对MwTAMc的酶活改造，获得一系列优势突变菌株。突变体MwTAM3、MwTAM4、MwTAM7和MwTAM8的比细胞活力较过表达嵌合体的菌株MwTAMc分别提高了11.28倍、20.33倍、42.33倍和278.48倍。其中，嵌合体和突变体催化2g/L前西他列汀酮时，底物转化率由MwTAMc的4.5％提高到MwTAM4的30.3％，以及MwTAM8的95.6％。最佳优势突变体MwTAM8基本实现了2g/L前西他列汀酮的全转化，具有一定的应用前景。

公开(公告)号：CN117286130A

公开(公告)日：2023-12-26

申请号：CN202310034198.4

申请日：2023-01-10

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 柳志强 ,  黄梦钰 ,  张晓健 ,  郑裕国 ,  刘楠

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/10 ,  C12P17/18

Abstract: 本发明涉及氨基化碳纳米管共价固定转氨酶的方法，所述方法包括：(1)氨基化碳纳米管活化：将氨基化碳纳米管用缓冲液浸泡12～18h后离心，在体积浓度40～50％的戊二醛中处理1～2h，获得活化后的氨基化碳纳米管；(2)取转氨酶酶液，加入活化后的氨基化碳纳米管，1000～1200rpm、20～30℃下振荡固定24～48h，离心，PBS缓冲液冲洗，再离心去除缓冲液，获得固定化转氨酶。本发明的有益效果主要体现在：按照本发明方法制备的固定化转氨酶不对称还原制备西他列汀，连续反应15个批次，各批次的转化率均大于99％。