公开(公告)号：CN111440785B

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202010126502.4

申请日：2020-02-28

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 金利群 ,  柳志强 ,  陈贤筱 ,  贾东旭 ,  张晓健 ,  金怡婷 ,  万克柔 ,  李勉 ,  郑裕国

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/92 ,  C12N1/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法，所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经缓冲液悬浮，制成菌悬液；向菌悬液中添加改性硅藻土，搅拌混匀，加入聚乙烯亚胺，然后再加入戊二醛进行交联，15～35℃搅拌交联0.5～5h后抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤后，粉碎成粒，得到含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶制剂；本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低，操作简单，机械强度高，制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于催化D‑葡萄糖生产D‑果糖，在60℃条件下，分批次反应重复使用40批次后，仍具有86％以上的残余酶活力；连续反应603h，时空产率为3.8kg/L/d，平均转化率大于42％，具有良好的工业化应用前景。

公开(公告)号：CN111440785A

公开(公告)日：2020-07-24

申请号：CN202010126502.4

申请日：2020-02-28

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 金利群 ,  柳志强 ,  陈贤筱 ,  贾东旭 ,  张晓健 ,  金怡婷 ,  万克柔 ,  李勉 ,  郑裕国

IPC: C12N11/14 ,  C12N9/92 ,  C12N1/20 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种改性硅藻土固定化含有葡萄糖异构酶细胞的方法，所述方法是将含葡萄糖异构酶基因的基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体经缓冲液悬浮，制成菌悬液；向菌悬液中添加改性硅藻土，搅拌混匀，加入聚乙烯亚胺，然后再加入戊二醛进行交联，15～35℃搅拌交联0.5～5h后抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤后，粉碎成粒，得到含葡萄糖异构酶的固定化葡萄糖异构酶制剂；本发明所提供的固定化方法具有固定化材料成本低，操作简单，机械强度高，制备的固定化产葡萄糖异构酶重组大肠杆菌全细胞用于催化D-葡萄糖生产D-果糖，在60℃条件下，分批次反应重复使用40批次后，仍具有86％以上的残余酶活力；连续反应603h，时空产率为3.8kg/L/d，平均转化率大于42％，具有良好的工业化应用前景。