公开(公告)号：CN110484488B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN201910808332.5

申请日：2019-08-29

Applicant: 浙江大学医学院附属第一医院

Inventor： 周水洪 ,  敖胤杰 ,  鲍洋洋 ,  钟江涛 ,  陈哲 ,  沈丽芳 ,  喻而 ,  余祺

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域，尤其涉及人喉白斑上皮细胞三维培养模型的建立方法及其应用。技术要点主要包括：白斑细胞原代培养；不定期检测细胞增殖；取培养至第三代或第四代的白斑细胞，制成细胞悬液；冰上操作，Matrigel基质胶中加入DMEM培养基制成稀释液，按照稀释液：细胞悬液为2：1的比例混合，得到新的细胞悬液，将新的细胞悬液按照每孔0.6ml加入至24孔板中；将24孔板转移至37℃细胞培养箱中培养12h后，各孔加入DMEM 1ml后继续培养1天即可。本发明在体外成功构建人白斑上皮细胞三维培养模型，构建方法简单，可操作性强，模型状态稳定。三维模型构建，成为二维细胞实验和在体细胞实验的桥梁。

公开(公告)号：CN110484488A

公开(公告)日：2019-11-22

申请号：CN201910808332.5

申请日：2019-08-29

Applicant: 浙江大学医学院附属第一医院

Inventor： 周水洪 ,  敖胤杰 ,  鲍洋洋 ,  钟江涛 ,  陈哲 ,  沈丽芳 ,  喻而 ,  余祺

IPC: C12N5/071

Abstract: 本发明属于细胞培养技术领域，尤其涉及人喉白斑上皮细胞三维培养模型的建立方法及其应用。技术要点主要包括：白斑细胞原代培养；不定期检测细胞增殖；取培养至第三代或第四代的白斑细胞，制成细胞悬液；冰上操作，Matrigel基质胶中加入DMEM培养基制成稀释液，按照稀释液：细胞悬液为2：1的比例混合，得到新的细胞悬液，将新的细胞悬液按照每孔0.6ml加入至24孔板中；将24孔板转移至37℃细胞培养箱中培养12h后，各孔加入DMEM 1ml后继续培养1天即可。本发明在体外成功构建人白斑上皮细胞三维培养模型，构建方法简单，可操作性强，模型状态稳定。三维模型构建，成为二维细胞实验和在体细胞实验的桥梁。