公开(公告)号：CN117737270A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202311782189.X

申请日：2023-12-22

Applicant: 浙江大学

Inventor： 胡宝兰 ,  孙凌涛 ,  刘子述 ,  虞臻迪

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6816 ,  C12N15/11 ,  C12N15/113 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR/Cas12a的碳青霉烯抗性基因blaNDM检测方法，属于分子生物学领域。该方法以待测样本的blaNDM序列为模板，利用核苷酸序列如SEQ ID No.1所示的引导RNA、核苷酸序列如SEQ ID No.2所示的单链荧光探针和Cas12a蛋白进行CRISPR/Cas12a反应。反应在37℃恒温条件下进行，获取不同时间点的荧光信号值组成荧光曲线，并选取线性区域的斜率衡量待测样本的荧光值大小，用于定性判定或定量计算blaNDM浓度。相较于传统方法，本发明特异性强、检测速度快、对仪器依赖性低，为抗生素抗性基因现场检测提供新的技术路线。

公开(公告)号：CN116555444A

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202310625843.X

申请日：2023-05-30

Applicant: 浙江大学

Inventor： 胡宝兰 ,  虞臻迪 ,  程东庆 ,  刘子述

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于联合检测四环素抗性基因的四重荧光定量PCR引物和探针组合及检测方法，属于分子生物学领域。本发明中联合检测的四种四环素抗性基因为tetA、tetM、tetX、tet39。本发明建立了同一体系同时检测四种四环素抗性基因的荧光定量PCR方法，该方法具有联合检测、特异、灵敏、快速的特点，为四环素抗性基因定性定量检测提供技术储备。