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公开(公告)号：CN103837513A
公开(公告)日：2014-06-04
申请号：CN201410057269.3
申请日：2014-02-20
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于差分的光片照明显微方法，包括以下步骤：1）照明光束经扩束后转换为平行偏振光和垂直偏振光；2）单独采用平行偏振光，以光斑为实心的平行偏振光为第一照明光，该第一照明光转换为第一圆偏照明光后，经聚焦模块聚焦到荧光样品表面，并采集荧光样品发出的荧光，得到第一幅图；3）单独采用垂直偏振光，对该垂直偏振光进行调制，调制为具有空心光斑的第二照明光，第二照明光转换为第二圆偏照明光后，经聚焦模块聚焦到荧光样品表面，并采集荧光样品发出的荧光，得到第二幅图；4）计算机对步骤2）和步骤3）中的两幅图进行差分处理，完成对样品的一次扫描。本发明还公开了一种基于差分的光片照明显微装置。
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公开(公告)号：CN103472042A
公开(公告)日：2013-12-25
申请号：CN201310389145.0
申请日：2013-08-30
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于荧光开关的快速超分辨显微方法，在激活光对样品的荧光分子激活后，利用激光经两个渥拉斯顿棱镜形成两束垂直偏振光（s光）和两束平行偏振光（p光），这四束线偏光聚焦在样品上形成的干涉光斑对荧光样品进行漂白，再用激发光激发未被漂白的部分，也就是干涉光斑的暗斑部分并发出荧光，以实现快速超分辨显微，直接成像。本发明还公开了一种基于荧光开关的快速超分辨显微装置。本发明装置结构简单，数据处理方便；能够实现对标记荧光开关的样品进行快速的超分辨显微，无需对获取的图像进行高斯拟合以确定荧光分子中心位置；激活光能够激活更高密度的荧光分子。
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公开(公告)号：CN103837513B
公开(公告)日：2016-05-11
申请号：CN201410057269.3
申请日：2014-02-20
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于差分的光片照明显微方法，包括以下步骤：1）照明光束经扩束后转换为平行偏振光和垂直偏振光；2）单独采用平行偏振光，以光斑为实心的平行偏振光为第一照明光，该第一照明光转换为第一圆偏照明光后，经聚焦模块聚焦到荧光样品表面，并采集荧光样品发出的荧光，得到第一幅图；3）单独采用垂直偏振光，对该垂直偏振光进行调制，调制为具有空心光斑的第二照明光，第二照明光转换为第二圆偏照明光后，经聚焦模块聚焦到荧光样品表面，并采集荧光样品发出的荧光，得到第二幅图；4）计算机对步骤2）和步骤3）中的两幅图进行差分处理，完成对样品的一次扫描。本发明还公开了一种基于差分的光片照明显微装置。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103852458A
公开(公告)日：2014-06-11
申请号：CN201410071793.6
申请日：2014-02-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于宽场受激发射差分的显微方法，首先对样品进行宽场照明并成像，然后利用激光经两个渥拉斯顿棱镜形成两束垂直偏振光（s光）和两束平行偏振光（p光），这四束线偏光聚焦形成的干涉光斑对荧光样品进行照明并成像，然后同FED类似对宽场下得到的图像和干涉光斑下得到的图像进行差分处理，由于暗斑的大小小于衍射极限，所以能够得到暗斑中的超分辨图像，最后通过扫描振镜控制干涉光斑在样品上移动，以得到样品全部的显微图像。本发明还公开了本发明一种基于宽场受激发射差分的显微装置，结构简单，便于操作，能够实现基于宽场受激发射差分的快速超分辨显微成像，可用于光学显微成像领域。
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公开(公告)号：CN103852458B
公开(公告)日：2016-02-03
申请号：CN201410071793.6
申请日：2014-02-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于宽场受激发射差分的显微方法，首先对样品进行宽场照明并成像，然后利用激光经两个渥拉斯顿棱镜形成两束垂直偏振光（s光）和两束平行偏振光（p光），这四束线偏光聚焦形成的干涉光斑对荧光样品进行照明并成像，然后同FED类似对宽场下得到的图像和干涉光斑下得到的图像进行差分处理，由于暗斑的大小小于衍射极限，所以能够得到暗斑中的超分辨图像，最后通过扫描振镜控制干涉光斑在样品上移动，以得到样品全部的显微图像。本发明还公开了本发明一种基于宽场受激发射差分的显微装置，结构简单，便于操作，能够实现基于宽场受激发射差分的快速超分辨显微成像，可用于光学显微成像领域。
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公开(公告)号：CN103472042B
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201310389145.0
申请日：2013-08-30
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种基于荧光开关的快速超分辨显微方法，在激活光对样品的荧光分子激活后，利用激光经两个渥拉斯顿棱镜形成两束垂直偏振光（s光）和两束平行偏振光（p光），这四束线偏光聚焦在样品上形成的干涉光斑对荧光样品进行漂白，再用激发光激发未被漂白的部分，也就是干涉光斑的暗斑部分并发出荧光，以实现快速超分辨显微，直接成像。本发明还公开了一种基于荧光开关的快速超分辨显微装置。本发明装置结构简单，数据处理方便；能够实现对标记荧光开关的样品进行快速的超分辨显微，无需对获取的图像进行高斯拟合以确定荧光分子中心位置；激活光能够激活更高密度的荧光分子。
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公开(公告)号：CN103163106B
公开(公告)日：2014-12-17
申请号：CN201310039978.4
申请日：2013-01-30
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6408 , G01N21/6458 , G02B21/16
Abstract: 本发明公开了一种基于受激发射损耗的超分辨荧光寿命成像方法，包括以下步骤：1)将第一激光光束投射到待测样品上，待测样品中的粒子由基态激活至激发态；2)用STED光消耗步骤1)中处于激发态的粒子的数量；3)用于第二激光光束激发剩余的粒子发出荧光，并收集荧光得到相应的荧光强度图像；4)第二激光光束和STED光之间设有延迟，改变延迟时间，重复步骤3)，得到不同延迟时间下的荧光强度图像；5)通过计算机对不同延迟时间下的荧光强度图像进行处理，并拟合光点强度衰减规律，反演寿命图像，完成对待测样品一点的扫描6)通过改变光束投射到待测样品上的位置，完成对待测样品的二维扫描。本发明还公开了一种用于实施上述方法的装置。
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公开(公告)号：CN103163106A
公开(公告)日：2013-06-19
申请号：CN201310039978.4
申请日：2013-01-30
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N21/64
CPC classification number: G01N21/6408 , G01N21/6458 , G02B21/16
Abstract: 本发明公开了一种基于受激发射损耗的超分辨荧光寿命成像方法，包括以下步骤：1)将第一激光光束投射到待测样品上，待测样品中的粒子由基态激活至激发态；2)用STED光消耗步骤1)中处于激发态的粒子的数量；3)用于第二激光光束激发剩余的粒子发出荧光，并收集荧光得到相应的荧光强度图像；4)第二激光光束和STED光之间设有延迟，改变延迟时间，重复步骤3)，得到不同延迟时间下的荧光强度图像；5)通过计算机对不同延迟时间下的荧光强度图像进行处理，并拟合光点强度衰减规律，反演寿命图像，完成对待测样品一点的扫描6)通过改变光束投射到待测样品上的位置，完成对待测样品的二维扫描。本发明还公开了一种用于实施上述方法的装置。
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