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公开(公告)号:CN110669665A
公开(公告)日:2020-01-10
申请号:CN201811104785.1
申请日:2018-09-21
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于培养肝癌切片的微流控芯片,包括顶层、培养层,培养层包括微通道板与底板,底板、微通道板、顶层依次连接;顶层上设有进液孔、出液孔,微通道板上设有流入通道、流出通道及培养区域,流入通道与培养区域连通,流出通道与培养区域连通;进液孔、出液孔为圆形孔;流入通道与流出通道横截面呈长方形形状;培养区域为圆形培养区域;流入通道的入口连接有与进液孔直径相同的第一圆孔,流出通道出口连接有与出液孔直径相同的第二圆孔;顶层、培养层均设有螺纹孔。本发明还公开了该微流控芯片的使用方法,该微流控芯片能够用于体外培养肝癌组织切片,使得代谢废物及时排出,能够真实准确的模拟肝癌组织在人体内的生长情况。
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公开(公告)号:CN106093392B
公开(公告)日:2018-04-17
申请号:CN201610386872.5
申请日:2016-06-05
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/574
Abstract: 本发明提供一种外泌体分离、富集和检测的集成检测方法,包括:设计和组装双膜过滤芯片,构建芯片ELISA检测标准曲线,样本收集、注样和清洗,芯片ELISA检测,数据处理分析。本发明还提供一种尿液外泌体分离、富集及检测的集成检测芯片。本发明的反应体系与检测方法,可用于检测膀胱癌患者尿液样本或膀胱癌细胞系培养液上清中外泌体的含量,本方法具有高度特异性的特点,且不会对人体造成任何影响或创伤,检测方法也不需要昂贵且精密的实验仪器(如超速离心机、荧光显微镜),具有很大的应用前景。
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公开(公告)号:CN106093392A
公开(公告)日:2016-11-09
申请号:CN201610386872.5
申请日:2016-06-05
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/574
Abstract: 本发明提供一种外泌体分离、富集和检测的集成检测方法,包括:设计和组装双膜过滤芯片,构建芯片ELISA检测标准曲线,样本收集、注样和清洗,芯片ELISA检测,数据处理分析。本发明还提供一种尿液外泌体分离、富集及检测的集成检测芯片。本发明的反应体系与检测方法,可用于检测膀胱癌患者尿液样本或膀胱癌细胞系培养液上清中外泌体的含量,本方法具有高度特异性的特点,且不会对人体造成任何影响或创伤,检测方法也不需要昂贵且精密的实验仪器(如超速离心机、荧光显微镜),具有很大的应用前景。
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公开(公告)号:CN111363680B
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN201811601021.3
申请日:2018-12-26
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于外泌体分泌、分离和收集的脉冲搅拌式生物反应器,包括细胞培养装置、外泌体分离收集装置;外泌体分离收集装置连接细胞培养装置,并能够将外泌体从细胞培养装置内的培养液中分离出来进行收集;细胞培养装置包括搅拌装置,用于向细胞培养装置中的培养液施加搅拌动力;细胞培养装置包括脉冲装置,可以向细胞培养装置以脉冲方式加入培养液。该生物反应器可以使培养液和细胞充分混合以保持足够供氧,而且搅拌装置不直接接触细胞,减小细胞所受剪切力,同时,本发明能够模拟体内细胞生长环境,刺激NK细胞或其他悬浮细胞大量分泌细胞产物。
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公开(公告)号:CN110665061A
公开(公告)日:2020-01-10
申请号:CN201811029396.7
申请日:2018-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种脱细胞支架溶液-GelMA水凝胶复合材料及制备方法,将脱细胞支架溶液混合溶于GelMA水凝胶中,采用生物化学酶解和物理搅拌结合的方法构建多孔结构的复合支架材料。本发明以GelMA为基体以保证支架的机械强度和生物降解性;复合脱细胞支架溶液旨在提高生物相容性,保留原器官中生物活性因子和天然的细胞外基质成分,促进细胞在支架上黏附和增殖。该方法制备的复合支架具有孔隙大小可调控、机械性能好,生物相容性好、活性因子多等优点,可作为一种优良的生物材料应用于组织工程领域。
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公开(公告)号:CN106053811A
公开(公告)日:2016-10-26
申请号:CN201610387088.6
申请日:2016-06-05
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/574
CPC classification number: G01N33/57488 , G01N33/57407
Abstract: 本发明提供一种外泌体检测的ELISA方法,具体步骤包括:样本收集、包被孵育、封闭、加样、终止反应、判定结果、构建标准曲线,进行临床样本测试。本发明还提供一种检测尿液外泌体的ELISA检测方法在膀胱癌疾病的评估和防治方面的应用。本方法具有高度特异性的特点,本发明的检测方法也不需要昂贵且精密的实验仪器,具有很大的应用前景。
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公开(公告)号:CN111363679B
公开(公告)日:2023-02-28
申请号:CN201811600979.0
申请日:2018-12-26
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N5/0783 , C12M1/42 , C12M1/02 , C12N5/0781 , C12N5/0786
Abstract: 本发明公开了一种用于刺激细胞大量分泌外泌体的方法,采用脉冲搅拌式生物反应器培养细胞,包括以下步骤:打开生物反应器开关,开启培养液加注口阀门,加注培养基,灌满细胞培养腔;控制接种口阀门开启,接种细胞;打开磁力搅拌及脉冲装置,模拟体内细胞生长环境,刺激细胞分泌外泌体;监测芯片实时监测细胞培养环境,并通过主机调节培养条件;细胞在培养装置中生长2天后,开启过滤泵,使培养液通过分离收集装置,收集终产物外泌体。该生物反应器可以使培养液和细胞充分混合以保持足够供氧,而且搅拌装置不直接接触细胞,减小细胞所受剪切力,同时,本发明方法模拟体内细胞生长环境,刺激NK细胞大量分泌外泌体。
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公开(公告)号:CN111944881A
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN202010609617.9
申请日:2020-06-29
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/70 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种新型快速实时荧光定量PCR方法,包括优化设计上下游引物和优化设计MGB荧光探针以及修改RT-PCR反应条件;本发明通过对上下游引物、荧光探针的优化设计,提高引物探针的Tm值,大幅提高了扩增过程中退火/延伸步骤温度,缩小了变性与退火/延伸过程的温度差,从而减少了升温、降温过程中所需的时间,以达到缩短核酸扩增反应时间的目的。本发明既可适用于普通荧光定量PCR仪,也可适用于任何基于RT-PCR技术的核酸诊断设备,搭配最适反应温度的程序设置,均可实现缩短RT-PCR反应时间的效果。该方法对基于RT-PCR技术的疾病快速核酸诊断提供新思路,其成果具有一定的理论意义和较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN111363679A
公开(公告)日:2020-07-03
申请号:CN201811600979.0
申请日:2018-12-26
Applicant: 浙江大学
IPC: C12M1/42 , C12M1/02 , C12N5/0781 , C12N5/0783 , C12N5/0786
Abstract: 本发明公开了一种用于刺激细胞大量分泌外泌体的方法,采用脉冲搅拌式生物反应器培养细胞,包括以下步骤:打开生物反应器开关,开启培养液加注口阀门,加注培养基,灌满细胞培养腔;控制接种口阀门开启,接种细胞;打开磁力搅拌及脉冲装置,模拟体内细胞生长环境,刺激细胞分泌外泌体;监测芯片实时监测细胞培养环境,并通过主机调节培养条件;细胞在培养装置中生长2天后,开启过滤泵,使培养液通过分离收集装置,收集终产物外泌体。该生物反应器可以使培养液和细胞充分混合以保持足够供氧,而且搅拌装置不直接接触细胞,减小细胞所受剪切力,同时,本发明方法模拟体内细胞生长环境,刺激NK细胞大量分泌外泌体。
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公开(公告)号:CN112111601A
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN202010608673.0
申请日:2020-06-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明开了一种新型冠状病毒双重快速RT‑PCR检测试剂盒,包括正反向引物对集和荧光探针组,所述正反向引物对集包括第一引物对、第二引物对和内参质控引物对,还包括阳性标准品、内参质控品、阴性标准品和RT‑Taq mix试剂。本发明可以实现快速检测的目的,缩短检测时间;本发明还可以实现对新型冠状病毒COVID‑19的高灵敏度的检测,能稳定检测出低至100copies/mL的核酸样本;此外,本发明可以降低出现非特异性扩增及假阳性结果的几率,提高检测结果可靠性。
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