公开(公告)号：CN116144454A

公开(公告)日：2023-05-23

申请号：CN202211533700.8

申请日：2022-12-01

Applicant: 浙江大学

Inventor： 吴坚 ,  杨天怡 ,  陈艳菊

IPC: C12M1/00 ,  C12M1/34 ,  C12M1/24 ,  C12M1/14 ,  C12Q1/6844 ,  C08J5/18 ,  C08L29/04

Abstract: 本发明公开了一种基于聚乙烯醇膜的封闭式核酸扩增检测装置及应用，属于核酸检测技术领域。所述装置包括扩增管以及盖体，盖体包括与扩增管插接配合的连接部以及与所述连接部另一端插接配合的中空套管，连接部插接于套管内腔并限位于限位凸起处，连接部顶面与限位凸起之间设置有聚乙烯醇膜层，聚乙烯醇膜层与套管空腔形成用于存放检测试剂的储存腔室，所述连接部具有连通聚乙烯醇膜层和扩增管的通孔。本发明装置可以将核酸扩增和终点检测过程耦合，PVA膜作为“定时”阀门，在核酸扩增结束后，PVA膜被检测试剂溶解，试剂自动流入扩增管中，无需进行额外的移液操作。在核酸扩增检测过程中，整个装置处于密闭状态，防止气溶胶污染。

公开(公告)号：CN115491376A

公开(公告)日：2022-12-20

申请号：CN202210556122.3

申请日：2022-05-19

Applicant: 浙江大学

Inventor： 杨天怡 ,  陈艳菊 ,  徐俊锋 ,  吴坚

IPC: C12N15/113 ,  C12Q1/6816

Abstract: 本发明公开了一种生物成分特异性的crRNA序列组合和免扩增核酸检测方法。所述的crRNA序列组合包括SEQ ID No.1～SEQ ID No.4四条crRNA序列中的至少两条；方法是利用CRISPR蛋白和特异性的crRNA序列配置免扩增CRISPR反应体系，从生物制品中提取DNA样本溶液，加入到免扩增CRISPR反应体系中，在一定的反应条件下进行反应，反应结束后采集荧光值，根据荧光值判断是否生物制品中是否存在生物成分。本发明利用多条特异性crRNA序列组合协同作用提高CRISPR系统的检测性能，实现对特定生物成分，提高CRISPR检测的灵敏度，具有操作简便，响应快速、灵敏度高、特异性好、闭管检测等优点。

公开(公告)号：CN119534332A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411970838.3

申请日：2024-12-30

Applicant: 浙江大学

Inventor： 马斯韩 ,  杨天怡 ,  朱媛媛 ,  杜俊刚 ,  吴坚

IPC: G01N21/01 ,  G01N21/31

Abstract: 本发明提供水质中硝酸盐与亚硝酸盐含量的微流控检测系统和方法，该微流控检测系统包括检测单元、进液单元和循环单元。本发明将微流控技术与Griess试剂检测法、氯化钒还原法结合，进行水质中硝酸盐与亚硝酸盐的检测，通过泵和电磁阀的流动注射，对样品进行预处理、混合、加热反应、检测，整个检测系统体积小、试剂消耗量少、自动化程度高、操作简单，适合水质样本的小型检测分析。本发明通过循环单元使待测水质样品和检测试剂在液体混合流道中多次循环混合，提高混合效率和反应效率，并且不需要搅拌装置，从而减小检测系统体积。

公开(公告)号：CN116254353A

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN202211496020.3

申请日：2022-11-24

Applicant: 浙江大学杭州国际科创中心

Inventor： 吴坚 ,  杨天怡 ,  陈艳菊

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明公开了一种检测副溶血弧菌的LAMP引物、试剂盒及其检测方法，属于核酸检测技术领域。所述LAMP引物包括一对外引物F3和B3，一对内引物FIP和BIP以及一对环引物LF和LB，核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1‑6所示。本发明提供的LAMP引物用于检测副溶血弧菌，在30分钟内检测低至10copies/μL的目标模板，反应速度快，灵敏度高。LAMP扩增产物中含有PAM序列，可用于CRISPR检测，利用CRISPR基因编辑技术对扩增产物进一步检测，提高反应结果的准确性。本发明提供的核酸提取方法操作简便、提取效率高，LAMP‑CRISPR检测反应结果可视化，检测成本低，对仪器依赖性低。