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公开(公告)号:CN1661104A
公开(公告)日:2005-08-31
申请号:CN200410093154.6
申请日:2004-12-17
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种长度大于五十个碱基的寡核苷酸的基因芯片的信号检测方法。方法的步骤是:目的基因进行聚合酶链式反应扩增并检测;阳性产物约5μg100℃煮沸变性,冰上冷却;将检测用基因芯片用磷酸缓冲液润湿后,加入预杂交液进行预杂交;接着加入制备好的5μg变性DNA,60℃进行杂交;用洗膜液I洗涤2次,用洗膜液II洗涤;将芯片放入混有1×SYBR Green I的1×TE缓冲液染色;用TE缓冲液漂洗,重复2次;紫外光下或荧光显微镜下进行信号检测。该方法省却了对探针进行标记的繁杂程序,特别是避免了同位素标记对人体所造成的伤害和对环境造成的放射污染;应用该方法可以克服单纯运用聚合酶链式反应扩增可能造成的假阳性结果,使所得结果更灵敏、稳定、可靠。
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公开(公告)号:CN1367261A
公开(公告)日:2002-09-04
申请号:CN01132493.7
申请日:2001-10-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了水稻叶片特异表达序列标签及构成的基因芯片。cDNA序列具有SEQ ID No.1~SEQ ID No.50所示的DNA序列。运用表达序列标签技术对构建的水稻胚乳cDNA文库进行脱氧核糖核酸序列测序,获得的表达序列标签通过剔除冗余序列、互联网数据库进行检索、分类,富积非冗余序列,获得了50条新的表达序列标签,这些新的表达序列标签应用微阵列技术制成表达序列标签组合基因芯片;该芯片能用于对农作物的重要农艺性状的基因克隆、杂种优势的早期预测、转基因农产品的安全性检测、新型除草剂的筛选和新型农药的筛选、新药物的发现和毒理学研究、疾病诊断、动植物育种和植物新品种的产生、植物抗逆性的研究和动植物品种的鉴定等。
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公开(公告)号:CN1366080A
公开(公告)日:2002-08-28
申请号:CN01137671.6
申请日:2001-10-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一类水稻胚乳特异表达序列标签及其构成的生物芯片。cDNA序列具有SEQ ID No.1~SEQ IDNo.50所示的DNA序列。运用表达序列标签技术对构建的水稻胚乳cDNA文库进行脱氧核糖核酸序列测序,获得的表达序列标签通过剔除冗余序列、互联网数据库进行检索、分类,富积非冗余序列,获得了50条新的表达序列标签,这些新的表达序列标签应用微阵列技术制成表达序列标签组合生物芯片;该芯片能用于对农作物的重要农艺性状的基因克隆、杂种优势的早期预测、转基因农产品的安全性检测、新型除草剂的筛选和新型农药的筛选、新药物的发现和毒理学研究、疾病诊断、动植物育种和植物新品种的产生、植物抗逆性的研究和动植物品种的鉴定等。
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公开(公告)号:CN1364936A
公开(公告)日:2002-08-21
申请号:CN01137672.4
申请日:2001-10-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一类新的水稻叶片表达序列标签及其构成的生物芯片。cDNA序列具有SEQ ID No.1~SEQ IDNo.50所示的DNA序列。运用表达序列标签技术对构建的水稻胚乳cDNA文库进行脱氧核糖核酸序列测序,获得的表达序列标签通过剔除冗余序列、互联网数据库进行检索、分类,富积非冗余序列,获得了50条新的表达序列标签,这些新的表达序列标签应用微阵列技术制成表达序列标签组合生物芯片;该芯片能用于对农作物的重要农艺性状的基因克隆、杂种优势的早期预测、转基因农产品的安全性检测、新型除草剂的筛选和新型农药的筛选、新药物的发现和毒理学研究、疾病诊断、动植物育种和植物新品种的产生、植物抗逆性的研究和动植物品种的鉴定等。
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公开(公告)号:CN1364931A
公开(公告)日:2002-08-21
申请号:CN01137661.9
申请日:2001-10-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了新的水稻叶片表达序列标签及其构成的基因芯片。cDNA序列具有SEQ ID No.1~SEQ ID No.50所示的DNA序列。运用表达序列标签技术对构建的水稻胚乳cDNA文库进行脱氧核糖核酸序列测序,获得的表达序列标签通过剔除冗余序列、互联网数据库进行检索、分类,富积非冗余序列,获得了50条新的表达序列标签,这些新的表达序列标签应用微阵列技术制成表达序列标签组合基因芯片;该芯片能用于对农作物的重要农艺性状的基因克隆、杂种优势的早期预测、转基因农产品的安全性检测、新型除草剂的筛选和新型农药的筛选、新药物的发现和毒理学研究、疾病诊断、动植物育种和植物新品种的产生、植物抗逆性的研究和动植物品种的鉴定等。
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公开(公告)号:CN1364920A
公开(公告)日:2002-08-21
申请号:CN01135864.5
申请日:2001-10-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一类新的水稻叶片特异表达序列标签及构成的基因芯片。cDNA序列具有SEQ ID No.1~SEQ ID No.50所示的DNA序列。运用表达序列标签技术对构建的水稻胚乳cDNA文库进行脱氧核糖核酸序列测序,获得的表达序列标签通过剔除冗余序列、互联网数据库进行检索、分类,富积非冗余序列,获得了50条新的表达序列标签,这些新的表达序列标签应用微阵列技术制成表达序列标签组合基因芯片;该芯片能用于对农作物的重要农艺性状的基因克隆、杂种优势的早期预测、转基因农产品的安全性检测、新型除草剂的筛选和新型农药的筛选、新药物的发现和毒理学研究、疾病诊断、动植物育种和植物新品种的产生、植物抗逆性的研究和动植物品种的鉴定等。
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公开(公告)号:CN1364917A
公开(公告)日:2002-08-21
申请号:CN01135861.0
申请日:2001-10-31
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了水稻叶片表达序列标签及构成的基因芯片。cDNA序列具有SEQ ID No.1~SEQ ID No.25所示的DNA序列。运用表达序列标签技术对构建的水稻胚乳cDNA文库进行脱氧核糖核酸序列测序,获得的表达序列标签通过剔除冗余序列、互联网数据库进行检索、分类,富积非冗余序列,获得了25条新的表达序列标签,这些新的表达序列标签应用微阵列技术制成表达序列标签组合基因芯片;该芯片能用于对农作物的重要农艺性状的基因克隆、杂种优势的早期预测、转基因农产品的安全性检测、新型除草剂的筛选和新型农药的筛选、新药物的发现和毒理学研究、疾病诊断、动植物育种和植物新品种的产生、植物抗逆性的研究和动植物品种的鉴定等。
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公开(公告)号:CN1314814C
公开(公告)日:2007-05-09
申请号:CN200410093154.6
申请日:2004-12-17
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种长度大于五十个碱基的寡核苷酸的基因芯片的信号检测方法。方法的步骤是:目的基因进行聚合酶链式反应扩增并检测;阳性产物约5μg100℃煮沸变性,冰上冷却;将检测用基因芯片用磷酸缓冲液润湿后,加入预杂交液进行预杂交;接着加入制备好的5μg变性DNA,60℃进行杂交;用洗膜液I洗涤2次,用洗膜液II洗涤;将芯片放入混有1×SYBR Green I的1×TE缓冲液染色;用TE缓冲液漂洗,重复2次;紫外光下或荧光显微镜下进行信号检测。该方法省却了对探针进行标记的繁杂程序,特别是避免了同位素标记对人体所造成的伤害和对环境造成的放射污染;应用该方法可以克服单纯运用聚合酶链式反应扩增可能造成的假阳性结果,使所得结果更灵敏、稳定、可靠。
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公开(公告)号:CN1277838C
公开(公告)日:2006-10-04
申请号:CN200410093153.1
申请日:2004-12-17
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种从大豆异黄酮中快速分离残留DNA的方法。方法的步骤为:取0.1g大豆异黄酮粉末,加入200μl 10%的Chelex溶液,充分混匀,100℃煮5-10min;12,000rpm离心10-15min,吸取上清液,Sephadex-G 25柱离心过柱后的溶液直接用于聚合酶链式反应(PCR)扩增。与常规DNA提取方法相比,该方法可快速从大豆异黄酮中分离残留DNA,该技术流程可有效去除所得DNA中抑制PCR反应的抑制因子,可用于聚合酶链式反应的模板。该方法简单、快速、成本低、灵敏度和检出率高,所获得的痕迹量DNA可用于定性和定量PCR扩增。该技术流程适用于转基因农产品的多聚酶链式反应检验及相关领域,也可用于大豆异黄酮提取工艺的质控和优化。
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公开(公告)号:CN1431222A
公开(公告)日:2003-07-23
申请号:CN03115183.3
申请日:2003-01-23
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/12 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种抗稻瘟病菌单克隆抗体及检测包被和在抗原表面的定位方法。稻瘟病菌的分生孢子、芽管、附着胞的混合物作为抗原免疫BALB/C小鼠,取免疫小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞在50%PEG下融合成杂交瘤细胞,用间接ELISA筛选阳性孔,获4株杂交瘤细胞及其单克隆抗体。间接免疫荧光试验表明其中4株单克隆抗体分别与稻瘟病菌孢子、芽管或附着胞有特异性结合;Western blotting分析发现2B4、4A1、1D1单克隆抗体分别与孢子、芽管表面的提取物有不同的结合带。此四株单克隆抗体均干扰稻瘟病菌附着胞形成,并抑制稻瘟病菌在水稻叶表的致病性。
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