公开(公告)号：CN101402954A

公开(公告)日：2009-04-08

申请号：CN200810122275.7

申请日：2008-11-17

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  韩菲菲 ,  谢永刚 ,  刘倚帆 ,  杜华华 ,  刘光富 ,  黄海青 ,  汪敏

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/81 ,  C07K14/47 ,  C12P21/04

Abstract: 本发明涉及一种用毕赤嗜甲醇酵母表达重组猪乳铁蛋白N叶的方法，由PLFN基因的扩增、重组酵母表达载体的构建与鉴定、重组酵母表达载体转化酵母细胞PMAD11、Ade+Muts表型转化子的筛选检测、Ade+Muts菌株的诱导表达、目的蛋白的纯化与鉴定、目的蛋白表达量的检测、摇瓶及10l发酵罐发酵条件优化及发酵等步骤组成，该工艺生产过程简单，产品纯度高，可以开发为饲料添加剂。

公开(公告)号：CN101481724A

公开(公告)日：2009-07-15

申请号：CN200910095498.3

申请日：2009-01-19

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  刘倚帆 ,  单体中 ,  郭佳 ,  张艳芳 ,  高彦华 ,  王爱苹

IPC: C12P21/08 ,  C07K16/18 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽PMAP－23单克隆抗体的制备方法，用化学合成的抗菌肽PMAP－23的氨基酸片段免疫Balb/c小鼠，再用免疫鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合，经筛选克隆获得分泌抗猪抗菌肽PMAP－23单克隆抗体的杂交瘤株，最终得到所需抗体。本发明的单克隆抗体可用于建立酶联免疫吸附剂测定法，检测乳铁蛋白对骨髓细胞分泌PMAP－23水平的影响。

公开(公告)号：CN101434914A

公开(公告)日：2009-05-20

申请号：CN200810122351.4

申请日：2008-11-20

Applicant: 浙江大学

Inventor： 汪以真 ,  谢永刚 ,  韩菲菲 ,  刘倚帆 ,  郭佳 ,  杜华华

IPC: C12N1/19 ,  A23K1/00 ,  A23K1/16 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种含猪乳铁蛋白N叶的高蛋白酵母粉的生产方法，包括以下步骤：1)种子活化：将保藏号为CGMCC NO：2724的重组猪乳铁蛋白N叶的重组P.methanolica酵母菌在YPD固体培养基上进行种子活化；2)种子的初培养：将活化后所得的单菌落接入液体种子培养基中使用摇瓶配制成初级种子液；3)种子的扩培：将初级种子液以4％体积比的接种量接种于发酵罐内的发酵基础培养基中培养；4)发酵：将种子液以4％体积比的接种量接种于发酵罐内的发酵基础培养基发酵；5)发酵液的后处理：将发酵液依次经分离纯化、浓缩和干燥，得含有猪乳铁蛋白N叶的高蛋白酵母粉。采用本发明方法生产的酵母粉蛋白质含量高。