公开(公告)号：CN116355902A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202310083004.X

申请日：2023-02-08

Applicant: 浙江中医药大学

Inventor： 孙桂芹 ,  陈妍雯

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/867 ,  C12N7/01 ,  C12N15/55 ,  C12N15/85 ,  C12R1/92

Abstract: 本发明涉及基因表达调控技术领域，公开了一种NGLY1调控细胞模型的构建方法。本发明提供的shRNA的干扰靶点序列为如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；载体质粒中包含编码所述shRNA的核苷酸序列；慢病毒中包含编码所述shRNA的核苷酸序列，或者包含所述载体质粒。本发明中的shRNA、载体质粒和慢病毒能够应用于慢病毒介导的RNA干扰技术中，有效下调NGLY1基因的表达，构建NGLY1下调细胞模型，因而能够为NGLY1蛋白的生理病理功能研究提供方法，为NGLY1‑CDDG的致病机制研究奠定基础，并为NGLY1激活剂或抑制剂药物筛选、NGLY1‑CDDG的药物筛选提供技术支持。

公开(公告)号：CN116218885A

公开(公告)日：2023-06-06

申请号：CN202210399618.4

申请日：2022-04-15

Applicant: 浙江中医药大学

Inventor： 孙桂芹 ,  陈力 ,  袁舒颖 ,  陈妍雯

IPC: C12N15/56 ,  C12N9/24 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K16/40 ,  C07K16/06 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及人NGLY1基因和人工NGLY1技术领域，尤其涉及一种包含人NGLY1基因的重组质粒、工程菌以及人工NGLY1的制备方法和检测方法，一种检测人工基因突变体NGLY1活性的检测方法，包括以标准N‑糖蛋白RNase B为底物，以人工正常NGLY1为对照，具体步骤如下：步骤1）底物变性：将RNase B置于恒温金属浴中，80‑100℃，5‑10 min使RNase B变性；步骤2）酶切反应：1~2μg热变性后的RNase B冷却至室温后，分别加入1~2μg纯化后的人工基因突变体NGLY1和对照组的人工正常NGLY11‑2μg/μL，定容20~30μL，在35~37℃下水浴反应8‑12 h；步骤3）取反应产物用十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS‑PAGE及质谱MALDI‑TOF·MS鉴定。

公开(公告)号：CN105001064A

公开(公告)日：2015-10-28

申请号：CN201510407587.2

申请日：2015-07-10

Applicant: 浙江中医药大学

Inventor： 丁志山 ,  丁兴红 ,  蒋福升 ,  钱朝东 ,  沈勇 ,  孙桂芹 ,  丁滨

IPC: C07C43/23 ,  C07C41/34 ,  A61P31/04 ,  A61P35/00

CPC classification number: C07C43/23 ,  C07C41/34

Abstract: 本发明公开了一种新的白及须根联菲A及其制备方法与应用，属于中药技术领域。白及须根联菲A如式一所示。本发明通过95％乙醇回流提取后采用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯萃取物进行硅胶柱层析，氯仿：甲醇梯度洗脱，收集氯仿：甲醇＝(20-70)：1洗脱组份，薄层硅胶板点样，合并相同Rf值的斑点，得到合并物；将合并物进行硅胶柱层析后，进行半制备高效液相，得到白及须根联菲A。新联菲化合物具有很好的抑菌和抗肿瘤作用，其主要存在于白及须根中，从而为合理的利用白及须根，提供了有效的手段。

公开(公告)号：CN116585333A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202310161689.5

申请日：2023-02-24

Applicant: 浙江中医药大学

Inventor： 孙桂芹 ,  刘瑞杰 ,  陈妍雯 ,  张绍兴 ,  张瑜芯

IPC: A61K31/704 ,  A61K31/7016 ,  A61P35/00 ,  A61P31/12 ,  G01N33/00

Abstract: 本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种化合物在制备NGLY1抑制剂中的应用及NGLY1抑制剂筛选方法。本发明首次发现当化合物中含有由通过糖苷键或‑CH2‑O‑键相连的鼠李糖基和葡萄糖基构成的二糖单元时，能够用于制备NGLY1抑制剂，这能为抗肿瘤和抗病毒药物的研发奠定基础。此外，本发明的NGLY1抑制剂筛选方法中，基于模拟分子对接的预测结果具有较高的准确性，能够减小后续实验验证的盲目性和工作量。

公开(公告)号：CN106134986A

公开(公告)日：2016-11-23

申请号：CN201610497421.9

申请日：2016-06-24

Applicant: 浙江中医药大学

Inventor： 丁志山 ,  钱朝东 ,  金丽霞 ,  黄燕芬 ,  黄伟鹏 ,  蒋福升 ,  孙桂芹

IPC: A01H1/08 ,  A01H4/00

CPC classification number: A01H1/08 ,  A01H4/005

Abstract: 本发明提供了一种独蒜兰多倍体植株的培育方法，所述培育方法包括秋水仙素处理独蒜兰种子、独蒜兰种子萌发培养、独蒜兰幼苗增殖培养等步骤，鉴定为多倍体的植株再转接到生根壮苗培养基中进行培养，即获得独蒜兰多倍体植株的幼苗；本发明利用独蒜兰种子为材料获得的独蒜兰多倍体植株，具有显著的多倍体特征，且制备方法简单，对独蒜兰新品种的培育工作具有重要的指导意义，本发明获得的独蒜兰多倍体具有较高的应用价值。

公开(公告)号：CN106105585A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610455737.1

申请日：2016-06-22

Applicant: 浙江中医药大学

Inventor： 丁志山 ,  钱朝东 ,  黄燕芬 ,  黄伟鹏 ,  金丽霞 ,  孙桂芹 ,  蒋福升

IPC: A01F25/00

CPC classification number: A01F25/00

Abstract: 本发明公开了一种独蒜兰种茎的储藏方法，（1）首先在熏蒸法消毒的仓库内分厢，在每个厢内地面上均匀铺设一层底泥层，在底泥层上面放置一层做种的独蒜兰块茎层；（2）然后在独蒜兰块茎层上覆盖一层上盖泥层形成储藏堆，最后在采用湿润毛毯或湿润草垫完全覆盖储藏堆层表面，保持仓库内的相对湿度在60‑75%之间，温度保持5‑20℃。本发明能降低独蒜兰种茎烂种率，提高出苗速度和出苗率。