公开(公告)号：CN106544313B

公开(公告)日：2019-09-06

申请号：CN201611129793.2

申请日：2016-12-09

Applicant: 济南大学

Inventor： 谷劲松 ,  韩甜 ,  单秋丽 ,  李艳华 ,  李超 ,  郝委委 ,  谭晓军

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/02 ,  C07D487/04 ,  C12R1/19 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明涉及一种缺失sahn基因的大肠杆菌MG1655菌株及构建方法和应用，包括以下步骤：本发明利用中间为筛选标记基因、两端为同源序列的线性DNA片段，借助Red重组酶的作用，同源序列与目的基因发生同源重组，从而用标记基因替换靶基因。为了消除筛选标记基因的痕迹，在两侧加上能被Cre位点特异性重组酶识别的特殊位点，通过位点特异性重组酶的作用将筛选标记基因删除，得到缺失sahn基因的大肠杆菌MG1655菌株：MG1655△sahn。本发明提供该菌株的应用，利用该突变株△sahn的群感效应特征作为对照筛选到一种新型抑制剂1‑((4‑amino‑5H‑pyrrolo[3,2‑d]pyrimidin‑7‑yl)methyl)‑5‑(1H‑1,2,3‑triazo l‑4‑yl)piperidin‑3‑ol，降低了病原菌的生长和分裂能力。

公开(公告)号：CN106544354A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201611119480.9

申请日：2016-12-08

Applicant: 济南大学

Inventor： 谷劲松 ,  李艳华 ,  单秋丽 ,  韩甜 ,  贺盛 ,  郝委委 ,  谭晓军

IPC: C12N15/81 ,  C12N9/14 ,  A61K31/085 ,  A61P25/28 ,  C12Q1/34 ,  C12R1/84

CPC classification number: Y02A50/473 ,  C12N15/815 ,  A61K31/085 ,  C12N9/14 ,  C12Q1/34 ,  C12Y303/01001 ,  G01N2333/914

Abstract: 本发明涉及生物工程领域，具体涉及一种人源S-腺苷高半胱氨酸水解酶的制备方法及筛选得到的抑制剂及应用，通过制备一种人源S-腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)，利用该人源S-腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)来筛选SAHH抑制剂，所得到的抑制剂可以用于去制备一种新型的治疗阿尔兹海默症的药物。包括以下步骤：提供编码人源的sahh基因序列；构建pPIC9K-sahh重组质粒；将重组质粒pPIC9K–sahh转化到大肠杆菌载体；提取pPIC9K–sahh质粒，酶切处理，转化整合到毕赤酵母GS115基因组；诱导毕赤酵母表达人源SAHH，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，纯化，制备的水解酶具有高产量、高纯度，以及更高的活性，更好的稳定性，并筛选得到一种新型抑制剂4-(3-Hydroxyprop-1-en-1-yl)-2-methoxyphenol(CAS:458-35-5，ZINC：12359045)，从而用于制备治疗阿兹海默症的药

公开(公告)号：CN106544313A

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201611129793.2

申请日：2016-12-09

Applicant: 济南大学

Inventor： 谷劲松 ,  韩甜 ,  单秋丽 ,  李艳华 ,  李超 ,  郝委委 ,  谭晓军

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12Q1/02 ,  C07D487/04 ,  C12R1/19 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明涉及一种缺失sahn基因的大肠杆菌MG1655菌株及构建方法和应用，包括以下步骤：本发明利用中间为筛选标记基因、两端为同源序列的线性DNA片段，借助Red重组酶的作用，同源序列与目的基因发生同源重组，从而用标记基因替换靶基因。为了消除筛选标记基因的痕迹，在两侧加上能被Cre位点特异性重组酶识别的特殊位点，通过位点特异性重组酶的作用将筛选标记基因删除，得到缺失sahn基因的大肠杆菌MG1655菌株：MG1655△sahn。本发明提供该菌株的应用，利用该突变株△sahn的群感效应特征作为对照筛选到一种新型抑制剂1-((4-amino-5H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-7-yl)methyl)-5-(1H-1,2,3-triazo l-4-yl)piperidin-3-ol，降低了病原菌的生长和分裂能力。