一种利用蛋白变性分离特定金属结合蛋白的方法

    公开(公告)号:CN105085607A

    公开(公告)日:2015-11-25

    申请号:CN201510636105.0

    申请日:2015-09-30

    Abstract: 一种利用蛋白变性分离特定金属结合蛋白的方法,涉及蛋白质化学领域技术领域;该方法首先,取生物组织或细胞用液氮充分研磨后,加入蛋白提取液,混合均匀后,低温离心,获得变性的蛋白溶液;将Ni-NTA琼脂糖中Ni替换成Cu装入层析柱中;将变性的蛋白溶液与Cu-NTA琼脂糖孵育,使变性蛋白与之充分结合;然后低温条件下,注入洗脱液1,对蛋白进行复性,并将非特异性的铜结合蛋白洗脱出来;然后再注入洗脱液2将特异性的铜结合蛋白分离出来;本发明利用琼脂糖-NTA来分离变性条件下的铜结合蛋白,大大提高了铜结合蛋白的获得效率,建立了一套适合于过量重金属处理条件下生物组织或细胞中特定金属结合蛋白的分离技术。

    一种可从大分子中移除金属离子的金属螯合磁珠制备方法

    公开(公告)号:CN105107464A

    公开(公告)日:2015-12-02

    申请号:CN201510516623.9

    申请日:2015-08-21

    Abstract: 一种可从大分子中移除金属离子的金属螯合磁珠制备方法,制备方法为,在羟基磁珠中加入碱液进行活化,得到含活化后羟基磁珠和碱液的混合物Ⅰ;所得混合物Ⅰ中加入二甲亚砜、环氧氯丙烷和氢氧化钠溶液,混合后在60℃的温度下,缓慢搅拌12-14小时,得到环氧活化磁珠;所得环氧活化磁珠中加入碳酸钠溶液、乙二胺二琥珀酸三钠和硼氢化钠,混合后在40-60℃的温度下,缓慢搅拌10~15小时,即制备出可从大分子中移除金属离子的金属螯合磁珠;该方法制备工艺简单,易于放大,将该磁珠加入溶液后可快速移除溶液及生物大分子中的重金属离子,方便对生物大分子的结构和功能进行分析。

    一种利用蛋白变性分离特定金属结合蛋白的方法

    公开(公告)号:CN105085607B

    公开(公告)日:2018-05-29

    申请号:CN201510636105.0

    申请日:2015-09-30

    Abstract: 一种利用蛋白变性分离特定金属结合蛋白的方法,涉及蛋白质化学领域技术领域;该方法首先,取生物组织或细胞用液氮充分研磨后,加入蛋白提取液,混合均匀后,低温离心,获得变性的蛋白溶液;将Ni‑NTA琼脂糖中Ni替换成Cu装入层析柱中;将变性的蛋白溶液与Cu‑NTA琼脂糖孵育,使变性蛋白与之充分结合;然后低温条件下,注入洗脱液1,对蛋白进行复性,并将非特异性的铜结合蛋白洗脱出来;然后再注入洗脱液2将特异性的铜结合蛋白分离出来;本发明利用琼脂糖‑NTA来分离变性条件下的铜结合蛋白,大大提高了铜结合蛋白的获得效率,建立了一套适合于过量重金属处理条件下生物组织或细胞中特定金属结合蛋白的分离技术。

    一种可从大分子中移除金属离子的金属螯合磁珠制备方法

    公开(公告)号:CN105107464B

    公开(公告)日:2017-10-31

    申请号:CN201510516623.9

    申请日:2015-08-21

    Abstract: 一种可从大分子中移除金属离子的金属螯合磁珠制备方法,制备方法为,在羟基磁珠中加入碱液进行活化,得到含活化后羟基磁珠和碱液的混合物Ⅰ;所得混合物Ⅰ中加入二甲亚砜、环氧氯丙烷和氢氧化钠溶液,混合后在60℃的温度下,缓慢搅拌12‑14小时,得到环氧活化磁珠;所得环氧活化磁珠中加入碳酸钠溶液、乙二胺二琥珀酸三钠和硼氢化钠,混合后在40‑60℃的温度下,缓慢搅拌10~15小时,即制备出可从大分子中移除金属离子的金属螯合磁珠;该方法制备工艺简单,易于放大,将该磁珠加入溶液后可快速移除溶液及生物大分子中的重金属离子,方便对生物大分子的结构和功能进行分析。

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