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公开(公告)号：CN109679899A
公开(公告)日：2019-04-26
申请号：CN201811560030.2
申请日：2018-12-20
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/077 , C12N5/0775 , C12Q1/02 , G01N33/68 , C12Q1/6888
CPC classification number: C12N5/0655 , C12N5/0667 , C12N5/0668 , C12N2503/00 , C12Q1/6888 , C12Q2600/158 , G01N33/5005 , G01N33/68 , G01N2333/78
Abstract: 本发明公开了一种人脂肪干细胞与脐带间充质干细胞成软骨能力的比较方法，包括脂肪干细胞分离与培养、脐带间充质干细胞分离与培养、脂肪干细胞成软骨诱导、脐带间充质干细胞成软骨诱导、脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的检测和压力调控进行比对。本发明的有益效果是：分别对脂肪干细胞与脐带间充质干细胞建立完善的体外培养系统以及冻存方法，确保分离的脂肪干细胞与脐带间充质干细胞能在体外维持高活力，对脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的细胞形态、生长增殖及成软骨能力进行检测，能够揭示二者骨分化能力的不同，均采用胶原酶消化法对脂肪干细胞与脐带间充质干细胞的组织中进行分离，能够分离出高活性、高纯度的脂肪干细胞。
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公开(公告)号：CN107446889A
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201710678118.3
申请日：2017-08-10
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司
IPC: C12N5/0789 , A01N1/02
CPC classification number: C12N5/0647 , A01N1/0221 , C12N2509/00
Abstract: 本发明公开了一种脐血造血干细胞分离及存储的方法，包括以下步骤：取新采集的脐血，并加入有抗凝剂的采血袋中，并密封；将羟乙基淀粉与非结合胆红素加入纯水中；将混合液过树脂筛过滤；将脐血缓慢加入到混合液中，静置30-120分钟；静置后，收集上层含有白细胞的血浆层；将收集的血浆加入冲洗液冲洗多次，得到分离的造血干细胞；向造血干细胞中加入诱导液，在细胞培养瓶内进行诱导处理，然后培养；然后在造血干细胞置装入储存容器，于冰块中1-3h，然后取出，置于干冰中放置12-24h，之后取出，放置于液氮中冻存。本发明能够从脐血中分离出造血干细胞，并进行冷冻保存，分离及存储过程简单，操作方便。
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公开(公告)号：CN116121187A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202210777800.9
申请日：2022-07-04
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/078 , C12N5/0789
Abstract: 本发明公开了一种脐带血造血干细胞人工诱导分化为红细胞的方法，具体涉及生物医学技术领域，包括具体包括以下步骤，造血干细胞提取，在新生婴儿与胎盘分离后，立即提取脐带血内部的造血干细胞，并将造血干细胞放置在80％DMEM培养基内部，加入10％的胎牛血清，并放置在37℃、6％CO2培养箱内部进行常规培养，并备用。本发明利用扩增期对造成干细胞进行扩增、分化期对红细胞进行分化并且成熟期提高红细胞脱核成熟三种不同的方式对造血干细胞进行人工诱导，同时根据不同培养周期对造血干细胞以及红细胞进行培养，进而使分化后的红细胞数量产量大，而且成熟率高等优势，为目前人工造血等技术领域奠定了基础，具有实时性的意义。
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公开(公告)号：CN111334474A
公开(公告)日：2020-06-26
申请号：CN202010117537.1
申请日：2020-02-25
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/0797 , C12N5/079
Abstract: 本发明公开了一种用于神经干细胞的体外移植培养方法，包括分离神经干细胞、神经干细胞体外扩增培养、观察神经干细胞表达、分离星形胶质细胞、干细胞接种组培养、观察细胞表达和统计分析。本发明的有益效果是：探索出新型神经干细胞的体外培养方法，简化培养流程，降低培养成本，建立新的神经干细胞的体外培养体系，且便于数据之间的对比，从而使得数据更加准确。
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公开(公告)号：CN107354132A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710739751.9
申请日：2017-08-25
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司
IPC: C12N5/0783
CPC classification number: C12N5/0646 , C12N2500/32 , C12N2500/36 , C12N2500/38 , C12N2500/44 , C12N2501/24 , C12N2501/33 , C12N2501/71 , C12N2501/90
Abstract: 本发明公开了一种NK免疫细胞培养基，其由以下组分组成：基础培养基，壳聚糖，γ-干扰素，胰岛素，过氧化氢酶，二巯基乙醇，亚油酸，氨基酸，维生素。各组分的含量为：基础培养基5-20g/L，壳聚糖0.5-2g/L，γ-干扰素10-20μg/L，胰岛素10-20μg/L，过氧化氢酶3-9mg/L，二巯基乙醇5-10mg/L，亚油酸1-3mg/L，氨基酸20-50mg/L，维生素20-50mg/L。本发明的NK免疫细胞培养基，能够提供NK免疫细胞生长增殖所需的充足营养与良好环境，能够显著提高NK免疫细胞的扩增速度，大大缩短NK免疫细胞培养的时间。
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公开(公告)号：CN113061576A
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN202110206293.9
申请日：2021-02-24
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/0783 , A01N1/02 , G01N1/30 , G01N15/14
Abstract: 本发明公开了一种免疫细胞NK的冻存液及其活性研究方法，包括免疫细胞NK的分离、细胞NK的无血清体外扩增、分析细胞NK的生长曲线、分析细胞NK表面抗原表达、分析细胞NK周期、免疫细胞NK的冻存及复苏、免疫细胞各项指标检测。无血清培养基悬浮培养体系，分离获得的免疫细胞NK具有较强的增殖能力，利用细胞冻存液1冻存的细胞复苏后，细胞活性在四种细胞冻存液中的细胞活性最高，在90%以上，流式细胞仪检测结果表明，冻存前的细胞与冻存复苏后的细胞的免疫表型无明显差异，均具有免疫细胞的免疫表型，流式细胞术检测细胞凋亡实验表明，细胞冻存液1冻存的细胞复苏后，晚期凋亡的细胞数最少，且未发生凋亡的细胞数最多。
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公开(公告)号：CN109628400A
公开(公告)日：2019-04-16
申请号：CN201811588331.6
申请日：2018-12-25
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/0797 , C12M1/12
CPC classification number: C12N5/0623 , C12M47/04 , C12N2509/00
Abstract: 本发明公开了一种神经干细胞的分离装置及传代培养方法，包括外筒、进料口、切割刀片、过滤挡板、导流板、第一进液管、排液管、阀门、消化池、第二进液管、出液管、底架、收集筒和过滤膜。本发明的有益效果是：切割刀片呈螺纹状，且切割刀片在进料口内设置有两层，便于将脂肪块切割成小块的脂肪组织，第一进液管成向上倾斜状安置在过滤挡板的底端，且第一进液管向过滤挡板与外筒所形成的过滤腔内冲入磷酸缓冲盐溶液，且经由出液管排出，能够除去脂肪组织上的血细胞，第二进液管呈向下倾斜状安置在消化池上端，便于将消化液注入消化池内，过滤膜设置有两层，且过滤膜的孔径为30μm，以便更加容易、准确地对神经干细胞进行分离。
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公开(公告)号：CN111235110A
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN202010035686.3
申请日：2020-01-14
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/0797
Abstract: 本发明公开了一种神经干细胞的体外培养方法，包括分离神经干细胞、神经干细胞体外培养扩增、观察神经干细胞表达、分离星形胶质细胞、干细胞接种培养、观察细胞表达。本发明的有益效果是：从新生大鼠海马中分离的神经干细胞为具有能自我更新、具有増殖能力和多分化潜能表达Nestin蛋白的干细胞，该类细胞属于中枢神经系统的干细胞，是进行诱导分化的良好细胞模型；釆用化学法、差速贴壁法和振荡法分离纯化的星型胶质细胞与神经干细胞在互不接触的条件下进行共培养，使星型胶质细胞能促神经干细胞更快、更多地向神经元分化，且分化为多巴胺神经元的含量也明显增多，能够为进一步研究神经干细胞增殖、定向分化机制及细胞移植治疗帕金森病奠定基础。
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公开(公告)号：CN109504655A
公开(公告)日：2019-03-22
申请号：CN201811560112.7
申请日：2018-12-20
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: C12N5/0775 , A01N1/02
CPC classification number: C12N5/0667 , A01N1/0221 , C12N2509/00
Abstract: 本发明公开了一种脂肪干细胞的分离及传代培养的方法，包括脂肪采集、获取并制备小块脂肪组织、制备脂肪单细胞悬液、免疫磁珠分选、流式细胞分选、脂肪干细胞培养和脂肪干细胞传代培养。制备小块脂肪组织为1-2m³左右的脂肪小块，并采用胰蛋白酶联合I型-II型混合胶原酶时间梯度消化法对脂肪小块进行消化，使得组织消化更彻底，脂肪干细胞培养时所使用的培养箱温度设有37℃，且内部充有含量为5%的CO2气体，满足造血干细胞生长繁殖所需环境及温度，能够提高脂肪干细胞的培养速度，原代培养细胞达到85%融合时,以25%胰蛋白酶将贴壁细胞消化分离3~5分钟,并按照1：3的比例进行接种，保证传代接种后的细胞密度。
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公开(公告)号：CN113100224A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110206301.X
申请日：2021-02-24
Applicant: 河南省银丰生物工程技术有限公司 , 银丰生物工程集团有限公司
IPC: A01N1/02 , C12N5/0775
Abstract: 本发明公开了一种间充质干细胞冻存液及其活性研究方法，包括进行hUC‑MSCs的分离、hUC‑MSCs的体外扩增、收集P3代细胞进行降温冻存、hUC‑MSCs复苏后与新鲜细胞进行比较统计和hUC‑MSCs的检测及鉴定。本发明的有益效果是：使用无血清培养贴壁法获得大量且纯度较高的MSCs，使用程序降温仪进行程序降温，降低对细胞的伤害，且保持较好的细胞活力，且得出冻存液比例为DMSO:FBS:DMEM=1:8.5:0.5时，冻存后活率最佳，复苏后形态及生长速率与正常新鲜细胞培养基本一致。
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