公开(公告)号：CN114958715A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202110194816.2

申请日：2021-02-21

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 刘孟军 ,  王立新 ,  张梦玲

IPC: C12N5/04 ,  C12N5/02 ,  C12P19/32

Abstract: 本发明公开了一种枣细胞悬浮培养的建立及利用其调控环磷酸腺苷合成的方法，含以下步骤：（1）取无核枣76幼胚作为外植体，在愈伤诱导培养基上进行培养，获得胚性愈伤组织；（2）将获得的愈伤组织在愈伤增殖培养基上进行增殖培养，获得浅黄色、质地疏松的细胞团；（3）将细胞团接种进行细胞预培养和细胞悬浮培养，获得稳定的细胞悬浮系；（4）悬浮细胞死亡率维持在5%‑10%之间，生长曲线呈典型的S型；（5）悬浮细胞系中cAMP含量的变化受到钙离子的调控。本发明建立的枣悬浮细胞系培养方法，具有繁殖周期短、生产效率高、不受季节限制的特点，且可将来利用其进行枣重要特色成cAMP的调控和提取，极具开发利用价值。

公开(公告)号：CN113717924A

公开(公告)日：2021-11-30

申请号：CN202111209718.8

申请日：2021-10-18

Applicant: 河北农业大学

Inventor： 刘孟军 ,  王立新 ,  王林霞 ,  刘志国 ,  张梦玲 ,  赵若雨

IPC: C12N5/04 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明属于植物原生质体培养技术领域，本发明提供了一种枣树原生质体的高效分离方法及其应用。本发明以枣树的胚性悬浮细胞系为研究材料，通过酶解得到原生质体，纯化后得到了数量多且活性高的原生质体，并利用钙离子染料对原生质体内Ca2+浓度进行了探究。本发明方法简单、成本低，获得的原生质体数量多且活性高，为利用其研究Ca2+信号途径奠定了基础。