公开(公告)号：CN110054687B

公开(公告)日：2022-10-11

申请号：CN201811473268.1

申请日：2018-12-04

Applicant: 江西农业大学

Inventor： 隗黎丽 ,  何丽 ,  钟其旺 ,  梁惜梅 ,  阮记明

IPC: C07K16/18 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C07K16/06

Abstract: 草鱼ATG12多克隆抗体制备方法，首先以草鱼肝脏RNA为模板，反转录合成cDNA，再以cDNA为模板通过引物进行PCR扩增回收目的片段，进而构建ATG12/pGEX‑4T‑1原核表达载体；将ATG12/pGEX‑4T‑1原核表达载体转入大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行处理后超声破碎离心得上清和沉淀，再将沉淀纯化后得纯化后的ATG12融合蛋白；最后将纯化后的ATG12融合蛋白作为抗原与等体积的弗氏完全佐剂进行1：1充分混合乳化，对新西兰纯种大白兔进行免疫后提取其心脏采血，分离血清，得到ATG12多克隆抗体，该抗体具有特异性高、成本低、周期短的优势，为获得可商品化的ATG12抗体奠定基础。

公开(公告)号：CN110054687A

公开(公告)日：2019-07-26

申请号：CN201811473268.1

申请日：2018-12-04

Applicant: 江西农业大学

Inventor： 隗黎丽 ,  何丽 ,  钟其旺 ,  梁惜梅 ,  阮记明

IPC: C07K16/18 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C07K16/06

Abstract: 草鱼ATG12多克隆抗体制备方法，首先以草鱼肝脏RNA为模板，反转录合成cDNA，再以cDNA为模板通过引物进行PCR扩增回收目的片段，进而构建ATG12/pGEX-4T-1原核表达载体；将ATG12/pGEX-4T-1原核表达载体转入大肠杆菌DH5α感受态细胞中进行处理后超声破碎离心得上清和沉淀，再将沉淀纯化后得纯化后的ATG12融合蛋白；最后将纯化后的ATG12融合蛋白作为抗原与等体积的弗氏完全佐剂进行1：1充分混合乳化，对新西兰纯种大白兔进行免疫后提取其心脏采血，分离血清，得到ATG12多克隆抗体，该抗体具有特异性高、成本低、周期短的优势，为获得可商品化的ATG12抗体奠定基础。