公开(公告)号：CN104673832B

公开(公告)日：2019-08-09

申请号：CN201510063215.2

申请日：2015-02-09

Applicant: 江苏大学附属医院

Inventor： 徐岷 ,  龚爱华 ,  蔡菁 ,  张尤历 ,  莫寅元

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/31 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明涉及一种组装TALE/TALEN模块的方法，属于基因工程技术领域。本发明采用一次PCR来获得组装TALE模块，具体技术方案包括：首先设计4 gBlock DNA寡核苷酸，在相邻2个寡核苷酸之间有30bp的重叠；然后通过PCR将它们连接起来，再克隆为一个表达载体；为了检测这一合成物的作用，我们设计一个携带p53结合位点和mCherry荧光蛋白的报告基因，检测p53特异性TALE是否能活化报告载体及内源性lncRNA‑RoR启动子，证明了实验的准确性；本发明与传统组装DNA连接模块的方法相比，更为方便、简单，省时省力，经济高效。

公开(公告)号：CN104673832A

公开(公告)日：2015-06-03

申请号：CN201510063215.2

申请日：2015-02-09

Applicant: 江苏大学附属医院

Inventor： 徐岷 ,  龚爱华 ,  蔡菁 ,  张尤历 ,  莫寅元

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/31 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明涉及一种组装TALE/TALEN模块的方法，属于基因工程技术领域。本发明采用一次PCR来获得组装TALE模块，具体技术方案包括：首先设计4 gBlock DNA寡核苷酸，在相邻2个寡核苷酸之间有30bp的重叠；然后通过PCR将它们连接起来，再克隆为一个表达载体；为了检测这一合成物的作用，我们设计一个携带p53结合位点和mCherry荧光蛋白的报告基因，检测p53特异性TALE是否能活化报告载体及内源性lncRNA-RoR启动子，证明了实验的准确性；本发明与传统组装DNA连接模块的方法相比，更为方便、简单，省时省力，经济高效。