公开(公告)号：CN108641963A

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201810554929.7

申请日：2018-05-31

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 宋微 ,  王磊 ,  张虎 ,  杨广荣 ,  周莉 ,  刘梦

IPC: C12N1/04 ,  C12N1/14 ,  C12R1/645 ,  C12R1/77

Abstract: 本发明公开了一种铁线莲叶斑病致病菌的筛选方法，取带有褐色坏死斑的成熟铁线莲叶片培养致病菌悬浮液；以加入100u/mL青霉素的PDA培养基制备初筛培养基；用无菌生理盐水稀释致病菌悬液成不同浓度，取1mL稀释液涂布于初筛培养基上，并在24～26℃条件下培养72～76h，获得致病菌落群；挑取初筛培养基上长出的菌落至含10％铁线莲汁的PDA培养基中进行纯培养，连续分离3～5次，获得的单一菌落即为铁线莲叶斑病菌落。本发明方法选择性强，分离效果好，纯化率高。

公开(公告)号：CN108504578A

公开(公告)日：2018-09-07

申请号：CN201810560518.9

申请日：2018-05-31

Applicant: 江苏农林职业技术学院

Inventor： 宋微 ,  王磊 ,  张虎 ,  刘梦 ,  周莉

IPC: C12N1/02

CPC classification number: C12N1/02

Abstract: 本发明公开了一种铁线莲叶斑病拮抗菌的筛选方法，包括如下步骤：制备铁线莲叶斑病致病菌悬液；取带有叶斑的铁线莲叶片，研磨后置于无菌水中，充分振荡后得到菌悬液；取1mL菌悬液加入99mL无菌水中，按1∶10进行梯度稀释，得到10-1、10-2、10-3、10-4、10-5的稀释液；取100μL不同稀释梯度的稀释液均匀涂布于LB培养基平板上进行培养；用无菌滤纸在LB培养基上培养后长出细菌的菌落上进行影印，然后接种至PDA培养基上培养，将铁线莲叶斑病致病菌悬液喷至PDA培养基上，将PDA培养基密封好，并置于28℃下黑暗倒扣培养2～3d；筛选出PDA培养基中具有抑菌圈的细菌菌落，即为叶斑病拮抗菌。本发明筛选方法大大缩小了筛选对象的范围，减少了工作量，降低了成本，对促进拮抗菌的筛选，加快生防菌的开发利用，具有重要的应用价值。