公开(公告)号：CN107815458A

公开(公告)日：2018-03-20

申请号：CN201711261238.X

申请日：2017-12-04

Applicant: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所

Inventor： 陆健 ,  豆欣喜 ,  吴殿辉 ,  李晓敏 ,  孙军勇 ,  蔡国林

IPC: C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12N9/02 ,  C12G3/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种表达人源乙醛脱氢酶基因的基因工程菌及其应用，属于基因工程和酶技术领域。本发明的ALDH2基因高效表达组件Trp1L-URA3-TPIp-ALDH2-TPIt-Trp1R是整合到了酿酒酵母W303-1A的基因组上，与游离质粒表达相比，提高了基因表达的稳定性，并且采用的组成型启动子，在发酵过程中没有诱导剂的加入，产物相对来说比较安全。在发酵96h时，产乙醛脱氢酶的比活达到0.97U/mg。在250mg/100mL浓度的乙醇中，产乙醛脱氢酶的比酶活达到6.256U/mg，在pH 3缓冲液中，产乙醛脱氢酶的比活达到0.301U/mg。本发明选用酿酒酵母作为宿主菌，一方面保持了酶的活性，另一方面提高了产品的安全性，为解酒药的研发提供了一条新的途径和理论基础。

公开(公告)号：CN107815458B

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN201711261238.X

申请日：2017-12-04

Applicant: 江南大学(如皋)食品生物技术研究所

Inventor： 陆健 ,  豆欣喜 ,  吴殿辉 ,  李晓敏 ,  孙军勇 ,  蔡国林

IPC: C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12N9/02 ,  C12G3/02 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种表达人源乙醛脱氢酶基因的基因工程菌及其应用，属于基因工程和酶技术领域。本发明的ALDH2基因高效表达组件Trp1L‑URA3‑TPIp‑ALDH2‑TPIt‑Trp1R是整合到了酿酒酵母W303‑1A的基因组上，与游离质粒表达相比，提高了基因表达的稳定性，并且采用的组成型启动子，在发酵过程中没有诱导剂的加入，产物相对来说比较安全。在发酵96h时，产乙醛脱氢酶的比活达到0.97U/mg。在250mg/100mL浓度的乙醇中，产乙醛脱氢酶的比酶活达到6.256U/mg，在pH 3缓冲液中，产乙醛脱氢酶的比活达到0.301U/mg。本发明选用酿酒酵母作为宿主菌，一方面保持了酶的活性，另一方面提高了产品的安全性，为解酒药的研发提供了一条新的途径和理论基础。