一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法

    公开(公告)号:CN114426971B

    公开(公告)日:2024-07-05

    申请号:CN202111665304.6

    申请日:2021-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法,属于分子生物学检测技术领域。本发明以金纳米颗粒为载体,合成AuNP‑DNA‑抗体检测探针,抗体用于捕获目标物,Trigger DNA用于放大信号;黑色96微孔板经抗原包板、封闭、洗涤后,加入检测探针,包被抗原与待测样本竞争结合检测探针上的抗体;洗去多余探针及与目标物结合的探针,加入信号DNA及Mg2+,与检测探针上的Trigger DNA完成信号放大步骤。本方法对氯霉素的检测限为0.1ng/L,对氯霉素具有高选择性。本发明灵敏度高,可操作性强,反应成本低,能够很好的应用在抗生素检测领域。

    一种用核酸适配体和G-四链体免标记荧光分析法检测氯霉素的方法

    公开(公告)号:CN114397282A

    公开(公告)日:2022-04-26

    申请号:CN202111600430.3

    申请日:2021-12-24

    Abstract: 本发明公开了一种基于靶点诱导G‑四链体结构转变的氯霉素(CAP)检测方法,将G4探针和适配体在Tris‑HCl缓冲液中合成一种特殊介导中间发卡构象的G4‑DNA‑G4检测探针,抑制了G四链体的形成,NMM染料无法被G四链体结构增强,荧光信号减弱;加入氯霉素竞争结合适配体,使得G4探针结构改变,荧光信号加强;基于上述G‑四链体荧光变化,确定待测样品中的CAP浓度;该发明检测时间不到10分钟,灵敏度高,检出限为0.518ng·mL‑1。且选择性和回收性实验也证明了该方法具有令人满意的结果。该方法具有潜在的适用性,为基于适配体和G‑四链体的无标签传感器的开发提供了一种新的策略。

    一种基于聚腺嘌呤球形核酸的荧光免疫吸附分析方法

    公开(公告)号:CN117737194A

    公开(公告)日:2024-03-22

    申请号:CN202311618222.5

    申请日:2023-11-30

    Abstract: 本发明公开了一种基于聚腺嘌呤球形核酸的荧光免疫吸附分析方法,属于分子生物学检测技术领域。本发明采用成本更低的S1核酸酶结合信号DNA H1、信号DNA H2显示荧光信号,并使用制备更简单、成本更低的聚腺嘌呤DNA与金纳米颗粒构建AuNP‑DNA‑抗体检测探针,实现对氯霉素的检测,在降低成本的同时保持对氯霉素检测的准确性。本发明对氯霉素的检测限为0.005ng/L,线性范围为0.01~5ng/L,与卡那霉素、庆大霉素和链霉素交叉反应仅有8.2%、10.8%、9.5%,与土霉素、四环素交叉反应率为6%、3.6%,能够很好的应用在抗生素检测领域。

    一种用核酸适配体和G-四链体免标记荧光分析法检测氯霉素的方法

    公开(公告)号:CN114397282B

    公开(公告)日:2023-11-17

    申请号:CN202111600430.3

    申请日:2021-12-24

    Abstract: 本发明公开了一种基于靶点诱导G‑四链体结构转变的氯霉素(CAP)检测方法,将G4探针和适配体在Tris‑HCl缓冲液中合成一种特殊介导中间发卡构象的G4‑DNA‑G4检测探针,抑制了G四链体的形成,NMM染料无法被G四链体结构增强,荧光信号减弱;加入氯霉素竞争结合适配体,使得G4探针结构改变,荧光信号加强;基于上述G‑四链体荧光变化,确定待测样品中的CAP浓度;该发明检测时间不到10分钟,灵敏度高,检出限为0.518ng·mL‑1。且选择性和回收性实验也证明了该方法具有令人满意的结果。该方法具有潜在的适用性,为基于适配体和G‑四链体的无标签传感器的开发提供了一种新的策略。

    一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法

    公开(公告)号:CN114426971A

    公开(公告)日:2022-05-03

    申请号:CN202111665304.6

    申请日:2021-12-31

    Abstract: 本发明公开了一种基于DNAzyme辅助信号放大的荧光免疫分析方法,属于分子生物学检测技术领域。本发明以金纳米颗粒为载体,合成AuNP‑DNA‑抗体检测探针,抗体用于捕获目标物,Trigger DNA用于放大信号;黑色96微孔板经抗原包板、封闭、洗涤后,加入检测探针,包被抗原与待测样本竞争结合检测探针上的抗体;洗去多余探针及与目标物结合的探针,加入信号DNA及Mg2+,与检测探针上的Trigger DNA完成信号放大步骤。本方法对氯霉素的检测限为0.1ng/L,对氯霉素具有高选择性。本发明灵敏度高,可操作性强,反应成本低,能够很好的应用在抗生素检测领域。

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